目的:研究?jī)?nèi)胚層分化過(guò)程中初級(jí)纖毛的形態(tài)變化及纖毛合成有關(guān)基因的表達(dá)變化。方法:通過(guò)免疫熒光檢測(cè)人胚胎干細(xì)胞和內(nèi)胚層細(xì)胞內(nèi)中心粒周蛋白及乙�；⒐艿鞍椎谋磉_(dá),利用qRT-PCR測(cè)定纖毛合成有關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果:初級(jí)纖毛同時(shí)存在于兩種細(xì)胞中;與人胚胎干細(xì)胞比較,內(nèi)胚層細(xì)胞的纖毛明顯縮短,KIF17和IFT172基因表達(dá)顯著下調(diào)。結(jié)論:初級(jí)纖毛在內(nèi)胚層分化過(guò)程中會(huì)變短。
【部分圖文】：

廣東化工2019年第22期·8·www.gdchem.com第46卷總第408期圖1hESCs和DE細(xì)胞中存在初級(jí)纖毛Fig.1PresenceofprimaryciliainbothhESCsandDEs2.2與初級(jí)纖毛合成有關(guān)基因的表達(dá)情況qRT-PCR分析發(fā)現(xiàn)，與未分化的hESCs相比，DE細(xì)胞中驅(qū)動(dòng)蛋白基因(KIF17)和纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白復(fù)合物B基因(IFT172)的表達(dá)量都顯著下調(diào)，見(jiàn)圖2。圖2hESCs和DE細(xì)胞中KIF17和IFT172基因的表達(dá)情況Fig.2GeneexpressionofKIF17andIFT172inbothhESCsandDEs3討論初級(jí)纖毛是一種突出于細(xì)胞表面的細(xì)胞器，廣泛存在于多種類(lèi)型的細(xì)胞中，它是細(xì)胞的信號(hào)感受器。初級(jí)纖毛的基部由中心體母中心粒構(gòu)成，中心粒頂端生長(zhǎng)出纖毛的軸絲。對(duì)于不同類(lèi)型的細(xì)胞而言，細(xì)胞表面初級(jí)纖毛的長(zhǎng)度有顯著差異。初級(jí)纖毛的組裝過(guò)程是由纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(IFT)復(fù)合物B以及驅(qū)動(dòng)蛋白-2介導(dǎo)，使纖毛蛋白從細(xì)胞質(zhì)沿軸絲向纖毛頂端轉(zhuǎn)運(yùn)完成纖毛的裝配[6]。IFT復(fù)合物B和驅(qū)動(dòng)蛋白-2對(duì)于初級(jí)纖毛的裝配和維持至關(guān)重要，在大多數(shù)情況下，任何IFT復(fù)合物B蛋白或驅(qū)動(dòng)蛋白-2的缺失都會(huì)導(dǎo)致纖毛的縮短或缺失[7,8]。人胚胎干細(xì)胞的分化與胚胎早期發(fā)育過(guò)程相似，是研究人類(lèi)胚胎早期發(fā)育機(jī)制的重要工具。將hESCs定向分化為DE細(xì)胞，初級(jí)纖毛的長(zhǎng)度顯著縮短，母中心粒附近的微管蛋白濃度升高，與纖毛合成有關(guān)的KIF17、IFT172基因在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)量顯著減少。KIF17蛋白是構(gòu)成驅(qū)動(dòng)蛋白-2的元件之一，IFT172蛋白是組成纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白復(fù)合物B的成分之一。二者基因表達(dá)水平的降低與免疫熒光染色的結(jié)果一致，揭示了人多能
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