MicroRNA-21轉(zhuǎn)染豬源生物人工胰腺對(duì)食蟹猴糖尿病模型的療效
【部分圖文】:
餛溲?恰?2結(jié)果2.1豬胰島分離純化分離與純化五指山豬胰島,得到足夠數(shù)量的高質(zhì)量高活力的胰島,數(shù)量在30~40萬(wàn)IEQ(直徑150μm的胰島為1IEQ),得到胰島的純度>90%。見(jiàn)圖1。2.2海藻酸鈉微囊化胰島制備與生物人工胰腺定型將分離的豬胰島進(jìn)行微囊化,所得微囊呈球形,表面光滑,直徑350~450μm,每個(gè)囊內(nèi)包裹有1~2個(gè)胰島。見(jiàn)圖2。2.3體外培養(yǎng)體外用AAV9-miR-21載體和與微囊化胰島進(jìn)行共培養(yǎng)進(jìn)行轉(zhuǎn)染,48h后,體外培養(yǎng)24~48h。見(jiàn)圖3。2.4移植前后食蟹猴血糖變化①miR-21轉(zhuǎn)染后的生物人工胰腺植入4只食蟹猴動(dòng)物體內(nèi),血糖維持正常均超過(guò)8個(gè)月。移植前食蟹猴血糖濃度為(25.63±2.89)mmol/L,移植后24h血糖降至(9.3±1.73)mmol/L(P<0.05),48h降至正常為(4.35±0.70)mmol/L(P<0.05)。血糖維持正常超過(guò)6個(gè)月,分別為9.7、10.7、12.1和13.2個(gè)月(P<0.05),再2個(gè)月后胰島功能完全喪失。②另一只移植未轉(zhuǎn)染miR-21胰島,血糖正常維持了6個(gè)月,此后胰島功能減退血糖回升,8個(gè)月后胰島完全喪失功能。移植前糖尿病食蟹猴血糖濃度為23.5mmol/L,移植后24h血糖降至6.4mmol/L,48h降至正常為4.3mmol/L,維持6個(gè)月后開(kāi)始回升(P<0.05),至第8個(gè)月血糖回到移植前的水平。見(jiàn)表1。移植后食蟹猴血糖變化見(jiàn)圖4。3討論微囊技術(shù)的發(fā)展使胰島移植進(jìn)入了新階段,可使胰島避免免疫系統(tǒng)的攻擊,又不影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的自由交換,為胰島的存活提供了良好的空間。胰島細(xì)胞移植后,面臨炎性
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