【摘要】：小分子熱休克蛋白(small heat shock proteins, sHSPs)是熱休克蛋白的重要組成部分。在各種應(yīng)激狀態(tài)的刺激下,它們在組織中表達(dá)迅速增加,參與對組織的保護(hù)作用從而防止組織損傷。小分子熱休克蛋白,α-晶體蛋白,是晶狀體中的結(jié)構(gòu)蛋白,存在兩種不同的亞基,即αA-和αB-晶體蛋白。 晶狀體上皮細(xì)胞的凋亡已被揭示為非遺傳性白內(nèi)障病理機(jī)制之一,研究表明氧化應(yīng)激壓力是晶狀體上皮廣泛應(yīng)對的一種環(huán)境壓力并證明是白內(nèi)障形成的重要因素。α-晶體蛋白在對抗外界刺激所引起的細(xì)胞凋亡中有著重要的作用。基于對α-晶體蛋白生物功能的認(rèn)識,我們實(shí)驗(yàn)室以及其他研究實(shí)驗(yàn)室的工作都表明α-晶體蛋白可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡途徑中兩個重要的家族：Caspase和Bcl-2家族來抑制細(xì)胞凋亡,而且還有研究表明aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白在特定的應(yīng)激狀態(tài)下表現(xiàn)了不同的抗凋亡機(jī)制。比如。在由紫外線和氧化應(yīng)激壓力導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡過程中,aA-晶體蛋白是通過調(diào)節(jié)激活A(yù)KT信號通路來抑制細(xì)胞凋亡,而aB-晶體蛋白則是通過負(fù)性調(diào)節(jié)MAPK信號通路來抑制細(xì)胞凋亡。雖然已有研究表明aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白能夠調(diào)節(jié)Caspase和Bcl-2家族的成員,但是其具體的分子機(jī)制,尤其體內(nèi)調(diào)節(jié)機(jī)制并未被詳細(xì)闡述。 本實(shí)驗(yàn)的首要目的就是研究α-晶體蛋白與Caspase-3和Bax之間的相互作用對小鼠眼睛發(fā)育的影響。其主要研究方法和結(jié)果如下： (1)首先本實(shí)驗(yàn)小組首先通過表面等離子共振技術(shù)分析得知aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白能夠和Caspase-3蛋白相互作用并顯示出不同程度的作用強(qiáng)度； (2)運(yùn)用免疫組織化學(xué)染色技術(shù),通過對小鼠不同胚胎時期的眼睛組織切片進(jìn)行熒光染色,可得知aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白與Caspase-3在小鼠不同胚胎時期都有表達(dá),并且aA-晶體蛋白和Caspase-3以及aB-晶體蛋白與Caspase-3都存在共定位表達(dá),但是兩者共定位的胚胎時期不同,而且表達(dá)量均有顯著差異； (3)通過酵母雙雜交系統(tǒng),初步確定aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白能夠與Bax在體外結(jié)合,并且顯示了對Bax結(jié)合的不同的親和性； (4)運(yùn)用免疫組織化學(xué)染色技術(shù),通過對小鼠不同胚胎時期的眼睛組織切片進(jìn)行熒光染色,可得知aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白與Bax在小鼠不同胚胎時期都有表達(dá),并且aA-晶體蛋白和Bax以及aB-晶體蛋白與Bax都有共定位表達(dá),但兩者在小鼠不同胚胎時期的表達(dá)量不同； (5)以新生小鼠的晶狀體為材料,通過免疫共沉淀以及Western Blot技術(shù)分析進(jìn)一步證實(shí)了在小鼠的晶狀體中aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白均可與Caspase-3和Bax在小鼠晶狀體內(nèi)形成相互作用的蛋白復(fù)合物。 本研究首次提供體內(nèi)和體外證據(jù)表明aA-晶體蛋白和aB-晶體蛋白能夠直接與Caspase-3和Bax結(jié)合形成相互作用的蛋白復(fù)合物,并通過對Caspase-3和Bax活性的調(diào)節(jié),保護(hù)小鼠眼睛晶狀體的正常發(fā)育。
【學(xué)位授予單位】：湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R339.14;Q51

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王樹茂;蘭道亮;陳亞冰;林寶山;李鍵;;牦牛HSPA1A和HSPA2基因組織分布的檢測[J];動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2013年12期

2 王俊利;元輝雄;韋貴將;王春芳;羅春英;韋葉生;黃照權(quán);;我國廣西人群CRYAB基因rs3212227與rs6894567遺傳多態(tài)性研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2013年31期

3 練冬梅;王會芳;陳綿才;;植物寄生線蟲Hsp70研究進(jìn)展[J];基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué);2013年06期

4 ;Cloning of murine BRI3 gene and study on its function for inducing cell death[J];Chinese Science Bulletin;2002年05期

5 林麗珠,喻紅,應(yīng)明耀,唐炯,周煒,趙壽元,李昌本;小鼠BRI3基因的克隆及其誘導(dǎo)細(xì)胞死亡的作用[J];科學(xué)通報;2001年18期

6 徐勤;高珊;劉吉娜;;喉鱗狀細(xì)胞癌組織中Caspase-3的表達(dá)及其與bFGF和微血管密度的關(guān)系[J];臨床耳鼻咽喉頭頸外科雜志;2013年19期

7 李巧云;張海華;游仁芳;;保護(hù)素D1對大鼠全腦缺血再灌注損傷海馬Caspase-3表達(dá)及神經(jīng)元凋亡的影響[J];南昌大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2013年10期

8 張元新;葛雅琨;;水飛薊賓對MCF-7和SK-OV-3誘導(dǎo)凋亡作用的不同敏感性[J];吉林化工學(xué)院學(xué)報;2014年01期

9 陳連香;肖鎮(zhèn);王威;;辛伐他丁對淋巴瘤CA46細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制[J];海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2014年02期

10 夏歡;張其中;;近江牡蠣(Crassostrea hongkongensis)熱休克蛋白70對壬基酚的響應(yīng)[J];生態(tài)與農(nóng)村環(huán)境學(xué)報;2014年02期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉冬梅;玻璃體切割術(shù)后并發(fā)性白內(nèi)障發(fā)病機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2010年

2 熊濤;人涎腺腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移及其凋亡的光學(xué)成像[D];華中科技大學(xué);2005年

3 廖旭東;壓力負(fù)荷誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡的機(jī)制[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2003年

4 侍作亮;腫瘤壞死因子信號傳導(dǎo)及其旁路在小鼠肝癌細(xì)胞凋亡過程中作用及其機(jī)制的研究[D];華中科技大學(xué);2006年

5 曾憲東;桿狀病毒AcMNPViap基因功能及分子機(jī)理的研究[D];中國科學(xué)院研究生院（武漢病毒研究所）;2007年

6 王璞;神經(jīng)節(jié)苷脂GM3通過Arhgdib和TNFα調(diào)節(jié)細(xì)胞的表現(xiàn)型[D];沈陽藥科大學(xué);2007年

7 謝昌傳;基礎(chǔ)穩(wěn)態(tài)重鏈鐵蛋白和可誘導(dǎo)重鏈鐵蛋白在腫瘤壞死因子誘導(dǎo)L929細(xì)胞死亡中的不同作用[D];廈門大學(xué);2007年

8 張娜;TNF-α誘導(dǎo)的caspase非依賴性死亡需要Rip3介導(dǎo)的胞內(nèi)ROS積聚[D];廈門大學(xué);2008年

9 劉梅;miR-17-92在食管癌中作用機(jī)制的初步研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

10 趙立杰;小白菊內(nèi)酯對胃癌細(xì)胞增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡作用的研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 馮偉燕;Vasostatin治療糖尿病視網(wǎng)膜�。―R）的初步研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2009年

2 孫振民;腸道病毒71型拮抗TLR3信號通路及其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

3 喬京京;rhTNF-α衍生物3a治療小鼠移植性肝癌的實(shí)驗(yàn)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2003年

4 馬湘;人LIGHT基因的克隆及其在HepG_2細(xì)胞中的表達(dá)[D];青島大學(xué);2006年

5 盧先鋒;新生大鼠缺血缺氧性腦損傷HSP70的合成及與細(xì)胞凋亡的關(guān)系[D];山西醫(yī)科大學(xué);2006年

6 王琪;LIGHT誘導(dǎo)DC成熟過程中SOCS1、SOCS3的表達(dá)及其相互作用的初步研究[D];四川大學(xué);2006年

7 于少娟;急性心肌梗死早期血清sTRAIL與IL-10的變化及相關(guān)性研究[D];吉林大學(xué);2007年

8 肖麗;rhGH對LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞凋亡和NF-κB的影響[D];中南大學(xué);2007年

9 陳迎迎;去整合素Kistrin對人晶狀體上皮細(xì)胞株黏附、增殖的影響[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2007年

10 賈蒙嵐;KH902溶劑對人晶狀體上皮細(xì)胞的作用[D];四川大學(xué);2007年

本文編號：2790996