抑制ASIC1a可降低NMDA受體過度興奮引起的腦缺血再灌損傷
【學位授予單位】:濱州醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:R743;R-332
【圖文】:
不僅NMDA受體的NR2A、NR2B蛋白含量表達上調(diào),磷酸化的NR2A(p-逡逑NR2A)及NR2B邋(p-NR2B)蛋白含量表達也有增加。并且它們的表達在大腦中動逡逑脈栓塞再灌注24h還處于一個相對較高水平(圖1A)。tMCAO組(tMCAO模擬腦逡逑缺血再灌注組)與shara組(假手術(shù)組)相比具有明顯的趨勢。逡逑接著我們進一步檢測tMCAO模型中炎癥介質(zhì)TNF-a及IL-10的表達,炎逡逑癥通路中p-NF-邋k邋B/NF-邋k邋B的表達量評價炎癥反應的程度,并用神經(jīng)功能缺陷逡逑評分及TTC染色方法評價腦損傷的程度。結(jié)果顯示模型中炎癥介質(zhì)TNF-a及逡逑IL-1P、p-NF-kB/NF-kB的表達(圖1B)、神經(jīng)功能缺陷評分均增加,TTC染逡逑色并計算腦梗死的面積也增加(圖1C)邋,邋HE染色死亡細胞增加(圖ID)。tMCAO逡逑組與sham組相比,差異明顯。逡逑然后我們在tMCAO模型建立前30分鐘提前運用氯胺酮處理,于24小時后逡逑提取細胞膜蛋白及突觸后膜蛋白,WB檢測其中NR2A、NR2B及磷酸化的NR2A邋(p-逡逑NR2A)、NR2B邋(p-NR2B)蛋白含量。結(jié)果顯示:NMDA受體抑制劑氯胺酮預處理后
蛋白印跡技術(shù)(WB)結(jié)果顯示,短暫性大腦中動脈栓塞模擬腦缺血再灌注逡逑的模型中,ASICla蛋白含量表達上調(diào),并且它們的表達在大腦中動脈栓塞再灌逡逑注24h還處于一個相對較高水平(圖2A)。tMCAO組(tMCAO模擬腦缺血再灌注逡逑組與邋sham組假手術(shù)組相比差異具有統(tǒng)計學意義p<0.邋05)。然后在tMCAO逡逑模型建立前30分鐘預防性或(和)tMCAO模型建立后2小時治療性運用ASICla逡逑抑制劑處理,24小時后通過TTC染色及神經(jīng)功能缺陷評分的方法,評定小鼠腦逡逑組織的損傷程度;ELISA的方法檢測炎癥因子IL-10的表達,WB檢測檢測口-逡逑NF-邋k邋B/NF-邋k邋B的表達量評定炎癥反應程度,結(jié)果顯示:邐運用兩種不同的逡逑ASICla抑制劑進行預防性或治療性處理,即將實驗組分為四小組:逡逑1?阿米洛利預防性用藥(amiloride邋pre_30min);逡逑2-阿米洛利治療性性用藥(amiloride邋post-30min);逡逑3.
圖3邋ASICla通過調(diào)節(jié)NMDA受體參與腦缺血再灌注損傷A.與短暫性大腦中動脈栓塞逡逑(tMCAO)模擬腦缺血再灌注組相比,ASICla抑制劑氟比洛芬(flurbiprofen)降低了邋NMDA逡逑受體的NR2B亞基的蛋白的表達量。但NR2A亞基及磷酸化的NR2A、NR2B的表達量與模型逡逑,。.
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本文編號:2765664
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