【摘要】：目的:利用博來霉素誘導(dǎo)的C57BL/6小鼠肺纖維化模型,研究Ac-SDKP對(duì)特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化(IPF)病程中肺泡上皮細(xì)胞凋亡的影響,探討相關(guān)的作用機(jī)制。方法:選擇健康雄性C57BL/6小鼠24只(體重為25±2g),將小鼠隨機(jī)分為3組,其分組方法按照隨機(jī)數(shù)字表法進(jìn)行,分組情況:對(duì)照組(N組,n=8只)、肺纖維化模型組(B組,n=8只)、Ac-SDKP干預(yù)組(H組,n=8只)。B組及H組的小鼠氣管內(nèi)滴注博來霉素(按5 mg/kg,溶于0.9%生理鹽水共配制成50μl混合溶液)制備肺纖維化模型;造模14天后于小鼠腹腔內(nèi)埋入Ac-SDKP藥物微量釋放泵,H組微量泵內(nèi)含Ac-SDKP混合溶液(Ac-SDKP 800 ug.kg~(-1).d~(-1),冰乙酸0.1 M,卡托普利100mg.kg~(-1).d~(-1)),B組為不含Ac-SDKP的上述混合溶液,持續(xù)干預(yù)14天。N組小鼠處理方法同B組,氣管內(nèi)滴注與博來霉素等體積(50μl)的0.9%氯化鈉生理鹽水。在給予氣管內(nèi)給藥后第28天處死小鼠取肺組織。取右肺福爾馬林溶液固定后制片,通過HE染色和Masson染色,觀察肺纖維化病理變化程度,免疫組化法檢測(cè)GRP78、CHOP、Bax、AIF蛋白的表達(dá)情況,TUNEL法檢測(cè)小鼠肺組織細(xì)胞凋亡。取左肺組織液氮速凍,用堿水解法檢測(cè)肺組織中羥脯氨酸(HYP)含量,熒光RT-PCR檢測(cè)AIF、caspase 3的m RNA表達(dá)。結(jié)果:模型組肺組織纖維化病變明顯,Ac-SDKP的干預(yù)可減輕肺纖維化。干預(yù)組CHOP、GRP78、AIF蛋白及Bax蛋白表達(dá)與模型組比較表達(dá)少(P0.05)。干預(yù)組因子AIF、caspase3的mRNA表達(dá)較模型組有所下調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。干預(yù)組與模型組小鼠肺組織細(xì)胞亡指數(shù)較對(duì)照組均增高明顯,其中模型組高于干預(yù)組,3組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:Ac-SDKP可通過影響內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激-線粒體凋亡途徑減少特發(fā)性肺間質(zhì)纖維化肺泡上皮細(xì)胞凋亡。
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R563;R-332

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本文編號(hào)：2756518