【摘要】：目的:評價大鼠膝關節(jié)內側副韌帶離斷+內側半月板切除制作骨關節(jié)炎(OA)模型的方法的可行性,探討MMP-13和ADAMTS-5蛋白在大鼠骨關節(jié)炎模型不同時期軟骨組織中的表達情況。方法:雌性SD大鼠40只,隨機數(shù)字法分為模型組(n=30)和假手術組(n=10),模型組大鼠采用膝關節(jié)內側副韌帶離斷+內側半月板切除制作膝OA模型,假手術組大鼠打開膝關節(jié)囊后縫合。模型組大鼠分別于術后4、6、8周處死,假手術組大鼠于術后8周處死。解剖大鼠術側膝關節(jié),對退變關節(jié)軟骨大體觀察,進行軟骨損傷評分;行HE染色組織學觀察;剩余軟骨組織分別采用Western blot技術及免疫組化方法測定假手術組與模型組不同時期軟骨組織中MMP-13和ADAMTS-5蛋白表達情況。結果:(1)大體觀察結果顯示:模型組術后4周即可見軟骨退變,6周和8周時退變進一步加重,假手術組無明顯軟骨退變。不同組別相比大鼠關節(jié)軟骨損傷評分差異有統(tǒng)計學統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2)HE染色結果顯示:假手術組大鼠右膝關節(jié)軟骨面光滑,軟骨細胞數(shù)量正常;模型組術后4周大鼠右膝關節(jié)軟骨面可見糜爛或淺潰瘍,關節(jié)表層軟骨細胞少許丟失;模型組術后6周大鼠右膝關節(jié)軟骨面可見較深裂隙,呈潰瘍、糜爛,少量軟骨面剝脫;模型組術后8周大鼠右膝關節(jié)軟骨面可見大部分軟骨面剝脫,關節(jié)表層軟骨細胞大部分丟失。(3)Western blot檢測結果顯示,MMP-13及ADAMTS-5的蛋白表達在假手術組水平均較低。MMP-13蛋白表達于造模4周時開始升高,到造模第6周時持續(xù)升高,造模第8周是表達水平較前降低。假手術組、造模4周組、造模6周組和造模8周組之間蛋白表達比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。ADAMTS-5造模6周時開始升高,造模8周時維持之前表達水平。假手術組與造模4周組相比蛋白表達水平無統(tǒng)計學差異(P0.05),假手術組分別與造模6周組和造模8周組之間相比蛋白表達有統(tǒng)計學差異(P0.05),造模4周組分別與造模6周組和造模8周組之間相比蛋白表達有統(tǒng)計學差異(P0.05),造模6周組和造模8周組相比大鼠關節(jié)軟骨組織中蛋白表達差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。免疫組化檢測蛋白表達趨勢與Western blot檢測結果一致。結論:采用膝關節(jié)內側副韌帶離斷+內側半月板切除的方法可建立動物OA模型;MMP-13和ADAMTS-5在OA發(fā)病過程中的不同時期表達水平有明顯變化,可作為OA防治研究中的評價指標,仍需要進一步的研究來探討其相關信號通路。
【學位授予單位】：安徽醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R684.3;R-332

【參考文獻】

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