【摘要】：結(jié)直腸癌(CRC)是最常見的嚴(yán)重威脅人類生命健康的高發(fā)惡性腫瘤之一,全球發(fā)病率居第三位,且一旦發(fā)生轉(zhuǎn)移,病死率會大幅提高。有研究顯示,生殖器官是該病的主要轉(zhuǎn)移器官之一,且約占非生殖器官來源的轉(zhuǎn)移性卵巢癌的62.9%。但結(jié)直腸癌在生殖器官部位轉(zhuǎn)移的過程和治療方法以及相關(guān)藥物的研究都鮮有報(bào)道。且目前結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)機(jī)制尚未明確,移植動物模型該病的研究中仍有著重要價(jià)值。基于以上原因,建立一種穩(wěn)定發(fā)生在生殖器官部位的結(jié)直腸癌腫瘤動物模型對于研究結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移后的治療方法與抗腫瘤藥物研發(fā)就具有重要的意義。本研究以BALB/c小鼠為試驗(yàn)對象,將小鼠按性別分為A、C(雄性)和B、D(雌性)四個(gè)試驗(yàn)組各50只。為避免成瘤位置擴(kuò)散,均采用CT26細(xì)胞經(jīng)皮下傳3代培養(yǎng)后制成的細(xì)胞懸液,分別通過纖維蛋白凝膠移植接種(A、B組)和荷包縫合移植接種(C、D組)兩種手術(shù)方法,外科微創(chuàng)手術(shù)移植固定于小鼠生殖器官皮下,觀察小鼠生理狀況、成瘤率、移植瘤成長形狀,并和對照組(僅采取皮下注射腫瘤細(xì)胞懸液方式)建模成功率進(jìn)行比較分析,留瘤體組織標(biāo)本做病理切片。通過SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析以評判建立更為穩(wěn)定、經(jīng)濟(jì)、高效的建模方法。結(jié)果顯示:1.纖維蛋白凝膠移植接種試驗(yàn)組綜合成瘤率(72%)顯著高于荷包縫合移植接種試驗(yàn)組綜合成瘤率(59%)(P0.05);2.CT26細(xì)胞株皮下傳代培養(yǎng)移植試驗(yàn)組綜合成活率(131/200)65.50%極顯著高于皮下注射原代CT26細(xì)胞懸液對照組成活率(13/80)16.25%(P0.01)。3.手術(shù)移植接種成瘤小鼠平均生存天數(shù)25.86d,A組平均成瘤時(shí)間13.37d,B組平均成瘤時(shí)間12.33d,C組平均成瘤時(shí)間15.66d,D組平均成瘤時(shí)間14.25d。本研究結(jié)果表明:纖維蛋白凝膠移植成瘤組織病理特征符合腫瘤學(xué)動物模型需求。對BALB/c小鼠采用纖維蛋白凝膠粘合法移植接種經(jīng)三次皮下傳代培養(yǎng)的CT26細(xì)胞懸液可建立穩(wěn)定、經(jīng)濟(jì)、高效的結(jié)直腸癌生殖器官移植腫瘤動物模型,本試驗(yàn)建模方法可為該種疾病的研究提供參考。
【學(xué)位授予單位】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R-332;R735.34
【圖文】：

圖 2-1 鼠源結(jié)腸腺癌 CT26 體外培養(yǎng) 圖 2-2 傳代培養(yǎng)后細(xì)胞生理特征（HE×100）Fig.2-1 In vitro cultured CT26 cellsFig.2-2 Pathological characteristic of subcultured cells of implanted tumor(HE×100)3.4 細(xì)胞生長曲線從生長曲線圖 2-3 可以看出，兩個(gè)細(xì)胞前期生長速度無明顯差異，但后期傳代培養(yǎng)組的生長速率優(yōu)于于原代細(xì)胞株培養(yǎng)組。由公式算出傳代培養(yǎng)組 CT26 與原代細(xì)胞株培養(yǎng)組 CT26 細(xì)胞倍增時(shí)間分別為 31.5h 和 33.5h，同樣說明傳代培養(yǎng)組細(xì)胞的生長速率高于原代細(xì)胞株培養(yǎng)組細(xì)胞。

圖 2-1 鼠源結(jié)腸腺癌 CT26 體外培養(yǎng) 圖 2-2 傳代培養(yǎng)后細(xì)胞生理特征（HE×100）Fig.2-1 In vitro cultured CT26 cellsFig.2-2 Pathological characteristic of subcultured cells of implanted tumor(HE×100)3.4 細(xì)胞生長曲線從生長曲線圖 2-3 可以看出，兩個(gè)細(xì)胞前期生長速度無明顯差異，但后期傳代培養(yǎng)組的生長速率優(yōu)于于原代細(xì)胞株培養(yǎng)組。由公式算出傳代培養(yǎng)組 CT26 與原代細(xì)胞株培養(yǎng)組 CT26 細(xì)胞倍增時(shí)間分別為 31.5h 和 33.5h，同樣說明傳代培養(yǎng)組細(xì)胞的生長速率高于原代細(xì)胞株培養(yǎng)組細(xì)胞。

圖 2-3 試驗(yàn)組和對比組細(xì)胞株生長曲線圖Fig.2-3 Growth curve of subcultured CT26 cells3.5 染色體核型檢查傳代培養(yǎng)組 CT26 細(xì)胞與原代組 CT26 細(xì)胞染色體均為近端著絲粒，呈短棒狀顯示為鼠源染色體。二者均呈異倍體核型，以擬四倍體為主。染色體范圍為 50 至130 條，眾數(shù)為 67 至 80。四倍體占 40%，超三倍體占 35%，亞三倍體占 10%，超二倍體占 5%。結(jié)果顯示該細(xì)胞具有惡性腫瘤細(xì)胞染色體的特點(diǎn)。

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本文編號：2751249