發(fā)布時(shí)間：2020-07-07 10:26

【摘要】：目的:本研究旨在探討p38MAPK信號(hào)通路在成年大鼠幻肢痛模型中的機(jī)理作用,為幻肢痛的治療提供新的方向。方法:選取健康的成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠(n=72),重約220-300g。在適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后,所有動(dòng)物進(jìn)行術(shù)前準(zhǔn)備,禁食8小時(shí),自由進(jìn)水,腹部及右后肢備皮。滿足手術(shù)條件后,隨機(jī)選取48只健康的大鼠,使用1%的戊巴比妥行腹腔注射麻醉,行右后肢坐骨神經(jīng)橫斷術(shù)來建立幻肢痛模型,同時(shí)另取同窩健康大鼠,在同樣的麻醉?xiàng)l件下僅分離出大鼠的右后肢的坐骨神經(jīng)后,然后逐層縫合,此組作為假手術(shù)組(S組,n=24),所有大鼠的手術(shù)保證在同一天內(nèi)完成。術(shù)后所有動(dòng)物等待麻醉自然蘇醒,蘇醒后所有動(dòng)物在同一條件下分籠飼養(yǎng)。術(shù)后第2日給予所有動(dòng)物傷口進(jìn)行消毒防止傷口感染影響大鼠的行為學(xué)表現(xiàn),同時(shí)觀察大鼠自我咬噬趾甲的行為表現(xiàn),并根據(jù)是否具有咬噬趾甲的行為依照相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行自我咬噬程度評(píng)分。幻肢痛大鼠模型制作成功后,將造模成功后的幻肢痛大鼠再隨機(jī)的平均分成2組:幻肢痛組(P組,n=24)和幻肢痛p38MAPK通路抑制劑組(P+I組,n=24)。模型制造成功后,每周周一,P+I組大鼠通過尾靜脈注射p38MAPK抑制劑SB2035800.8mg/kg,其余兩組經(jīng)尾靜脈注射0.8mg/kg的生理鹽水。于給藥后第4周末(T_1)、第6周末(T_2)和第8周末(T_3)分別從各組中隨機(jī)選取8只大鼠,然后分別取實(shí)驗(yàn)大鼠L_(3~5)節(jié)段的脊髓組織以及背根神經(jīng)節(jié)(Dorsal Root Ganglion,DRG),檢測(cè)兩種組織的磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)水平(分別采用Western blot法和免疫組化法兩種方法檢測(cè)脊髓和背根神經(jīng)節(jié)的P-p38MAPK水平)。結(jié)果:與假手術(shù)組(S組)比較,成模的幻肢痛組大鼠(P組和P+I組)自術(shù)后第3天開始便陸續(xù)發(fā)生咬噬趾甲的行為,最高咬噬評(píng)分8~11分。在分別給予抑制劑和生理鹽水后,P+I組大鼠的咬噬評(píng)分有所下降。而與S組相比,P組和P+I組大鼠無論是Western blot法還是免疫組化法檢測(cè)下兩個(gè)部位的組織P-p38MAPK水平均明顯升高(P0.05或P0.01)。與P組比較,P+I組大鼠在兩種檢測(cè)方法下兩個(gè)部位的組織P-p38MAPK的表達(dá)水平均明顯降低。(P0.05或P0.01)。結(jié)論:p38MAPK信號(hào)通路參與大鼠幻肢痛疼痛作用的調(diào)控。
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R614;R-332
【圖文】：

另外坐骨神經(jīng)橫斷組大鼠自術(shù)后第 2 天便開始陸噬評(píng)分約 8~11 分，其行為學(xué)與術(shù)前相比有著顯著的變化；在給大鼠的咬噬評(píng)分有所下降，其咬噬表現(xiàn)較前緩解。假手術(shù)組大鼠現(xiàn)象，行為學(xué)表現(xiàn)除有跛行外其他與術(shù)前基本無變化。stern blot 檢測(cè)結(jié)果部位蛋白電泳灰度與 actin 比值的比較顯示：P 組和 P+I 組大節(jié) P-p38MAPK 陽性表達(dá)明顯高于 S 組（圖 1～圖 2)；與 P+I 組和背根神經(jīng)節(jié) P-p38MAPK 陽性表達(dá)明顯升高(圖 1～圖 2)；灰度P<0.05 或 P＜0.01;表 1）。Con Phan Phan+Inhi__T1T2T3T1T2T3T1T2T3

幻肢痛大鼠成模后各組不同給藥時(shí)間點(diǎn)脊髓磷酸化 P38MAPK 的 Wester Western blot analysis for phosphorylation P38MAPK in the spinal of sin different groups at different points of injection time（ x± s, n=3）表 1 三組大鼠各時(shí)間點(diǎn)脊髓和 DRG Western blot 檢測(cè)結(jié)果ble 1 results of spinal cord and DRG Western blot at different timegroups of rats( x±s)位 組別 只數(shù) T1（8 只） T2（8 只） T3脊髓S 組 24 25.71±7.32 29.70±4.55 3P 組 24 68.56±9.79bd85.43±10.56ac76

S 組 P 組 P+I 組圖 1 T1 時(shí)間點(diǎn)脊髓中各組的 p-p38MAPK 表達(dá)（×400）Fig.1 p-p38MAPK expression in groups of spinal cord at T1 time point (×400)S 組 P 組 P+I 組圖 2 T2 時(shí)間點(diǎn)脊髓中各組的 p-p38MAPK 表達(dá)（×400）Fig.2 p-p38MAPK expression in groups of spinal cord at T2 time point (×400)

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2745008