本文關(guān)鍵詞：柯薩奇A16滅活疫苗病毒候選株的優(yōu)化及其生物學特點，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：柯薩奇A16病毒(CA16)與腸道病毒71型病毒(EV71)均可以誘發(fā)手足口病,即一種在亞太地區(qū)廣泛傳播的流行性疾病。雖然在中國大陸,EV71滅活疫苗已經(jīng)完成三期臨床,并批注上市,但是CA16疫苗仍在研發(fā)當中。而我們實驗小組正在研制一種以Vero細胞為基礎(chǔ)的CA16滅活疫苗。我們從手足口病患者咽拭子中分離多株手足口病毒,經(jīng)分子生物學方法鑒定為CA16病毒,通過免疫動物制備血清、中和抗體試驗等方法篩選出一株具有較強的交叉保護能力。通過對病毒進行生物學特性的鑒定,我們發(fā)現(xiàn)CA16 CC024病毒株在Vero細胞中具有較高的滴度(107.5CCID50/m L),非常適合作為CA16疫苗的病毒候選株。一只候選疫苗生產(chǎn)過程的建立包括以下幾點:選擇合適的病毒收獲時間;選擇濾膜來對病毒進行過濾與濃縮;選擇凝膠過濾色譜來進行下游的病毒純化,以及選擇病毒滅活的方式。通過以上的分析,我們發(fā)現(xiàn)CC-16,一個CC024病毒有限稀釋的克隆株,具有較好的遺傳穩(wěn)定性,高滴度以及廣譜的免疫原性等特點,可以成為CA16滅活疫苗最佳的病毒候選株。所以,我們的研究可以為以后CA16疫苗以及CA16-EV71二價疫苗提供重要的信息。
【關(guān)鍵詞】：柯薩奇A16病毒 手足口病 疫苗候選株 滅活疫苗
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R392
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-9
• 第1章 緒論9-13
• 1.1 手足口病9-11
• 1.2 柯薩奇A16病毒11-12
• 1.2.1 柯薩奇A16病毒的基因結(jié)構(gòu)11
• 1.2.2 柯薩奇A16病毒的研究進展11-12
• 1.3 手足口病疫苗研究進展12-13
• 1.3.1 基因工程亞單位疫苗12
• 1.3.2 減毒疫苗12
• 1.3.3 滅活疫苗12-13
• 第2章 材料與方法13-21
• 2.1 材料及試劑13-15
• 2.1.1 細胞和病毒13
• 2.1.2 試劑13-14
• 2.1.3 主要儀器14
• 2.1.4 引物合成和測序14-15
• 2.2 實驗方法15-21
• 2.2.1 細胞復(fù)蘇與培養(yǎng)15
• 2.2.2 分離病毒15-16
• 2.2.3 病毒感染與擴增16
• 2.2.4 病毒滴度測定16-17
• 2.2.5 實時定量PCR17
• 2.2.6 病毒基因組測序17
• 2.2.7 電鏡觀察17
• 2.2.8 蛋白質(zhì)免疫印跡17-18
• 2.2.9 銀染實驗18
• 2.2.10 CA16病毒純化與規(guī)�；a(chǎn)初試18-19
• 2.2.11 免疫小鼠實驗19
• 2.2.12 中和試驗19-20
• 2.2.13 統(tǒng)計學分析20-21
• 第3章 結(jié)果21-30
• 3.1 CA16CC024疫苗病毒株的分離與鑒定21-22
• 3.2 CA16病毒在Vero細胞中的適應(yīng)株22-23
• 3.3 CA16CC024病毒株生物學特性23-24
• 3.4 在Vero細胞中篩選CC16CC024單克隆病毒株并鑒定24-26
• 3.5 上游工藝的初步研究26-27
• 3.6 下游工藝的初步研究及鑒定27-28
• 3.7 CA16 CC-16滅活疫苗在小鼠體內(nèi)誘導體液免疫28-30
• 第4章 討論30-32
• 第5章 結(jié)論32-33
• 參考文獻33-38
• 作者簡介及在學期間所取得的科研成果38-39
• 致謝39

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本文編號：274341