【摘要】：背景:椎間盤退行性病變(Intervertebral Disc Degeneration,IVDD)是骨科常見病,是指腰椎自然老化、退化的病理及生理過程,常表現(xiàn)為下腰痛及急性下肢神經(jīng)根性病變,嚴(yán)重影響人們的生活和工作。目前,對腰椎間盤退變發(fā)生的機(jī)制尚未明確。近年來發(fā)現(xiàn),炎癥因素、生長因子異常表達(dá)等均與椎間盤退變發(fā)生有關(guān),其中骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMPs)是一類誘導(dǎo)成骨形成的酸性多肽,能夠刺激細(xì)胞生長,屬于轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)超家族成員,在骨組織形成過程中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用,并積極促進(jìn)椎間盤合成及代謝。目前已發(fā)現(xiàn)多種BMPs亞成員與骨質(zhì)疏松性疾病發(fā)生有關(guān),其中BMP-2、BMP-4已成為臨床研究熱點(diǎn)。淫羊藿則為小檗科植物大花淫羊藿、箭葉淫羊藿、心葉淫羊藿全草,主要化學(xué)成分為黃酮、淫羊藿苷、多糖等,屬傳統(tǒng)補(bǔ)腎壯陽、強(qiáng)筋健骨藥物,可拮抗骨質(zhì)疏松。有動物試驗(yàn)證實(shí),淫羊藿總黃酮可促進(jìn)體外培養(yǎng)大鼠成骨細(xì)胞增殖及分化,這對研究淫羊藿對腰椎間盤退變患者軟骨組織BMPs的影響提供了可能。目的:本研究建立兔腰椎間盤退變模型,分別予淫羊藿、生理鹽水干預(yù),并檢測軟骨組織BMP-2、BMP-4蛋白的表達(dá),旨在明確淫羊藿對腰椎間盤退變軟骨組織骨形態(tài)發(fā)生蛋白的影響,為淫羊藿的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。方法:取30只新西蘭大白兔,分為假手術(shù)組、模型組、淫羊藿組各10只,除假手術(shù)組外均建立腰椎間盤退變模型,淫羊藿組給予10mg/kg·d淫羊藿藥液灌胃,模型組給予同等劑量生理鹽水灌胃,90d收集各組腰椎軟骨終板標(biāo)本,觀察組織形態(tài)改變情況。采用免疫組化法測定凋亡因子fas受體表達(dá),最后用蛋白印跡分析法(western blot)對假手術(shù)組、模型組、淫羊藿組中BMP-2、BMP-4蛋白的表達(dá)情況進(jìn)行檢測。結(jié)果:1.倒置顯微鏡下見染色后細(xì)胞核及細(xì)胞骨架顏色較深,細(xì)胞核周圍分布深紫色異染顆粒,細(xì)胞骨架部分呈均勻藍(lán)色,可鑒定此細(xì)胞為軟骨終板細(xì)胞;熒光倒置顯微鏡下見不同波段光的激發(fā)下,細(xì)胞骨架部分呈綠色熒光,細(xì)胞核部分未見綠色熒光標(biāo)記,可鑒定此細(xì)胞為軟骨終板細(xì)胞。2.假手術(shù)組終板組織結(jié)構(gòu)完整,表面光滑,排列規(guī)律,軟骨細(xì)胞飽滿,呈圓形或橢圓形,柱狀排列,軟骨基質(zhì)著色均勻;模型組軟骨表面粗糙,局部缺損,組織結(jié)構(gòu)不完整,軟骨細(xì)胞分布不均,排列紊亂,部分區(qū)見軟骨細(xì)胞克隆增生,呈簇狀分布,軟骨基質(zhì)著色淺,不規(guī)律,潮線扭曲,不完整;淫羊藿組軟骨細(xì)胞尚完整,細(xì)胞排列尚規(guī)律,細(xì)胞凋亡少,軟骨基質(zhì)染色較均勻,潮線尚且完整。3.模型組、淫羊藿組fas受體陽性率高于假手術(shù)組(P0.05),淫羊藿組fas受體陽性率低于模型組,比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.Western Blot檢測結(jié)果表明:與其他兩組相比,假手術(shù)組BMP-2、BMP-4蛋白相對表達(dá)量明顯高于其他兩組(P0.05);淫羊藿組BMP-2、BMP-4蛋白相對表達(dá)量明顯高于模型組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:淫羊藿可上調(diào)兔腰椎間盤退變模型軟骨組織BMP-2、BMP-4蛋白表達(dá),促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖、分化。
【學(xué)位授予單位】：蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R681.5;R-332

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 徐宏光;;終板軟骨在椎間盤退變中的作用[J];中國組織工程研究;2015年53期

2 梁鶴;董雙海;夏天;江民波;田紀(jì)偉;;氧化應(yīng)激介導(dǎo)的NF-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在椎間盤退變中的作用[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2015年14期

3 錢素瑛;汪翼凡;葉楊;;醇提紅曲對骨質(zhì)疏松大鼠骨折愈合過程中BMP-4 mRNA和蛋白表達(dá)的影響[J];中國中醫(yī)藥科技;2015年03期

4 劉學(xué)光;邱 勇;孫振中;錢邦平;王守豐;;Ⅰ型神經(jīng)纖維瘤病萎縮區(qū)椎體終板軟骨細(xì)胞體外分離培養(yǎng)及表型鑒定[J];中國組織工程研究;2014年46期

5 周栩;權(quán)正學(xué);;骨形態(tài)發(fā)生蛋白在椎間盤退變修復(fù)中的作用機(jī)制研究進(jìn)展[J];重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2015年02期

6 劉林;駱文遠(yuǎn);張超;宋玉鑫;舍煒;;兔退變椎間盤纖維環(huán)及髓核組織中的PG、MMP-3、TIMP-2表達(dá)變化及意義[J];重慶醫(yī)學(xué);2014年17期

7 林曦;葉君健;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白2對退變椎間盤組織學(xué)和Ⅰ,Ⅱ型膠原的影響[J];中國組織工程研究;2013年43期

8 夏冬冬;林勝磊;王向陽;;兔椎間盤退變模型的研究進(jìn)展[J];中國脊柱脊髓雜志;2013年06期

9 陳智;沈洪興;;骨形態(tài)發(fā)生蛋白在椎間盤退變過程中作用及相關(guān)機(jī)制的研究進(jìn)展[J];中國脊柱脊髓雜志;2012年05期

10 孫健;余優(yōu)成;顧章愉;顧亮;畢瑋;;BMP-2對大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨作用的影響[J];上�？谇会t(yī)學(xué);2011年04期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 曹曉鵬;骨形態(tài)發(fā)生蛋白4在椎間盤退變中作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2007年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 曹德軍;Ad-hBMP-4對人退變椎間盤髓核細(xì)胞的影響[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

本文編號：2738028