本文關鍵詞：慢病毒介導的SHP-1過表達抑制模型小鼠動脈粥樣硬化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景和目的:動脈粥樣硬化(Atherosclerosis)是血管疾病中最常見、最重要、最基礎的一種,其特點就是動脈管壁逐漸增厚變硬,進而失去彈性,最后管腔縮小;粥樣硬化病變的形成是動脈對內膜損傷作出的炎癥-纖維增生性反應的結果,包括局部脂類和復合糖類聚集、纖維組織增生、鈣質沉積及炎癥反應等形成斑塊,最終繼發(fā)斑塊內出血、斑塊破裂及局部血栓形成,進而引起一系列惡性事件,嚴重者甚至失去生命。動脈粥樣硬化(AS)是以脂質代謝紊亂、血管內皮細胞受損、炎性細胞浸潤、斑塊破裂和血栓形成為特征的長期慢性病理過程。因此,動脈粥樣硬化(AS)基因治療的的發(fā)展可以從這四個方面尋找治療的靶點。CD40是一種I型跨膜蛋白,研究表明CD40高表達于人體和動物模型的動脈粥樣硬化斑塊中,抑制CD40信號傳導則可促進動脈粥樣硬化斑塊消退;SHP-1是CD40信號傳遞的重要調控蛋白,其過表達可阻礙CD40對下游p38 MAPK蛋白的活化以及炎癥反應,含SH2結構域的酪氨酸磷酸酶-1(SH2-domain-containing protein-tyrosine phosphatase-1,SHP-1)是一種胞內蛋白酪氨酸磷酸酶,其N-末端包含有2個Src同源結構域,主要表達于造血細胞系如T細胞、B細胞、單核細胞和上皮細胞系中。本研究通過建立動脈粥樣硬化模型小鼠,利用慢病毒載體體內轉染動脈粥樣硬化斑塊,來研究含SH2結構域的酪氨酸磷酸酶-1(SHP-1)慢病毒載體在動脈粥樣硬化模型小鼠中的作用,從而為預防和治療動脈粥樣硬化斑塊提供靶標。材料和方法:將45只8周齡雄性Apo E基因敲除小鼠隨機分為3組,即對照組、綠色熒光蛋白(GFP)轉染組、SHP-1轉染組。3組小鼠右側頸總動脈植入套環(huán)并高脂喂養(yǎng)8周,隨后分別轉染GFP空載體和SHP-1慢病毒(SHP-1-LV)。分別于轉染第1、2、6周檢測硬化斑塊熒光強度、小鼠體重、血清膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)水平變化,并利用q RT-PCR和Western blot檢測右側頸總動脈中SHP-1、白介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)、基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)等基因的表達,最后制作切片染色觀察斑塊病理變化。結果:熒光顯微鏡下觀察到慢病毒轉染第1、2、6周后斑塊具有明顯熒光,且在第一周時熒光強度最高慢病毒轉染對小鼠體重和血清膽固醇(Serum cholesterol)、甘油三脂(Triglyceride)水平無顯著影響。SHP-1-LV轉染顯著上調右側頸總動脈中SHP-1m RNA和蛋白的表達,同時抑制IL-6、TNF-α、MMP-2、MMP-9等表達水平。SHP-1-LV轉染也降低右側頸總動脈斑塊面積比、脂質含量。結論:過表達酪氨酸磷酸酶-1(SHP-1)可有效促進小鼠動脈粥樣硬化斑塊消退,從而為預防和治療動脈粥樣硬化提供靶點。
【關鍵詞】：含SH2結構域的酪氨酸磷酸酶-1 動脈粥樣硬化 慢病毒 ApoE基因敲除小鼠
【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R543.5;R-332
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 引言10-13
• 材料與方法13-23
• 結果23-27
• 討論27-33
• 結論33-34
• 參考文獻34-38
• 綜述 CD40信號傳導通路與動脈粥樣硬化的研究進展38-57
• 參考文獻49-57
• 中英文縮略詞對照表57-58
• 個人簡歷及在校期間發(fā)表的學術論文58-59
• 致謝59

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 胥雪蓮;何川;;炎癥與動脈粥樣硬化[J];心血管病學進展;2015年05期

  本文關鍵詞：慢病毒介導的SHP-1過表達抑制模型小鼠動脈粥樣硬化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：271011