本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)的SHP-1過(guò)表達(dá)抑制模型小鼠動(dòng)脈粥樣硬化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景和目的:動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis)是血管疾病中最常見(jiàn)、最重要、最基礎(chǔ)的一種,其特點(diǎn)就是動(dòng)脈管壁逐漸增厚變硬,進(jìn)而失去彈性,最后管腔縮小;粥樣硬化病變的形成是動(dòng)脈對(duì)內(nèi)膜損傷作出的炎癥-纖維增生性反應(yīng)的結(jié)果,包括局部脂類(lèi)和復(fù)合糖類(lèi)聚集、纖維組織增生、鈣質(zhì)沉積及炎癥反應(yīng)等形成斑塊,最終繼發(fā)斑塊內(nèi)出血、斑塊破裂及局部血栓形成,進(jìn)而引起一系列惡性事件,嚴(yán)重者甚至失去生命。動(dòng)脈粥樣硬化(AS)是以脂質(zhì)代謝紊亂、血管內(nèi)皮細(xì)胞受損、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、斑塊破裂和血栓形成為特征的長(zhǎng)期慢性病理過(guò)程。因此,動(dòng)脈粥樣硬化(AS)基因治療的的發(fā)展可以從這四個(gè)方面尋找治療的靶點(diǎn)。CD40是一種I型跨膜蛋白,研究表明CD40高表達(dá)于人體和動(dòng)物模型的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中,抑制CD40信號(hào)傳導(dǎo)則可促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊消退;SHP-1是CD40信號(hào)傳遞的重要調(diào)控蛋白,其過(guò)表達(dá)可阻礙CD40對(duì)下游p38 MAPK蛋白的活化以及炎癥反應(yīng),含SH2結(jié)構(gòu)域的酪氨酸磷酸酶-1(SH2-domain-containing protein-tyrosine phosphatase-1,SHP-1)是一種胞內(nèi)蛋白酪氨酸磷酸酶,其N(xiāo)-末端包含有2個(gè)Src同源結(jié)構(gòu)域,主要表達(dá)于造血細(xì)胞系如T細(xì)胞、B細(xì)胞、單核細(xì)胞和上皮細(xì)胞系中。本研究通過(guò)建立動(dòng)脈粥樣硬化模型小鼠,利用慢病毒載體體內(nèi)轉(zhuǎn)染動(dòng)脈粥樣硬化斑塊,來(lái)研究含SH2結(jié)構(gòu)域的酪氨酸磷酸酶-1(SHP-1)慢病毒載體在動(dòng)脈粥樣硬化模型小鼠中的作用,從而為預(yù)防和治療動(dòng)脈粥樣硬化斑塊提供靶標(biāo)。材料和方法:將45只8周齡雄性Apo E基因敲除小鼠隨機(jī)分為3組,即對(duì)照組、綠色熒光蛋白(GFP)轉(zhuǎn)染組、SHP-1轉(zhuǎn)染組。3組小鼠右側(cè)頸總動(dòng)脈植入套環(huán)并高脂喂養(yǎng)8周,隨后分別轉(zhuǎn)染GFP空載體和SHP-1慢病毒(SHP-1-LV)。分別于轉(zhuǎn)染第1、2、6周檢測(cè)硬化斑塊熒光強(qiáng)度、小鼠體重、血清膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)水平變化,并利用q RT-PCR和Western blot檢測(cè)右側(cè)頸總動(dòng)脈中SHP-1、白介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)等基因的表達(dá),最后制作切片染色觀察斑塊病理變化。結(jié)果:熒光顯微鏡下觀察到慢病毒轉(zhuǎn)染第1、2、6周后斑塊具有明顯熒光,且在第一周時(shí)熒光強(qiáng)度最高慢病毒轉(zhuǎn)染對(duì)小鼠體重和血清膽固醇(Serum cholesterol)、甘油三脂(Triglyceride)水平無(wú)顯著影響。SHP-1-LV轉(zhuǎn)染顯著上調(diào)右側(cè)頸總動(dòng)脈中SHP-1m RNA和蛋白的表達(dá),同時(shí)抑制IL-6、TNF-α、MMP-2、MMP-9等表達(dá)水平。SHP-1-LV轉(zhuǎn)染也降低右側(cè)頸總動(dòng)脈斑塊面積比、脂質(zhì)含量。結(jié)論:過(guò)表達(dá)酪氨酸磷酸酶-1(SHP-1)可有效促進(jìn)小鼠動(dòng)脈粥樣硬化斑塊消退,從而為預(yù)防和治療動(dòng)脈粥樣硬化提供靶點(diǎn)。
【關(guān)鍵詞】：含SH2結(jié)構(gòu)域的酪氨酸磷酸酶-1 動(dòng)脈粥樣硬化 慢病毒 ApoE基因敲除小鼠
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R543.5;R-332
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 引言10-13
• 材料與方法13-23
• 結(jié)果23-27
• 討論27-33
• 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-38
• 綜述 CD40信號(hào)傳導(dǎo)通路與動(dòng)脈粥樣硬化的研究進(jìn)展38-57
• 參考文獻(xiàn)49-57
• 中英文縮略詞對(duì)照表57-58
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷及在校期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文58-59
• 致謝59

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 胥雪蓮;何川;;炎癥與動(dòng)脈粥樣硬化[J];心血管病學(xué)進(jìn)展;2015年05期

  本文關(guān)鍵詞：慢病毒介導(dǎo)的SHP-1過(guò)表達(dá)抑制模型小鼠動(dòng)脈粥樣硬化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：271011