本文關(guān)鍵詞：Reelin缺失對(duì)小鼠小腦皮質(zhì)和血管發(fā)育的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：血管的發(fā)生和細(xì)胞極性化的產(chǎn)生對(duì)于理解個(gè)體的發(fā)育、疾病的產(chǎn)生具有重要的意義。目前,實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域主要研究的是研究小腦表觀上面的發(fā)育,對(duì)于小腦的皮質(zhì)生長(zhǎng)過(guò)程中,由于Reelin蛋白缺失對(duì)血管發(fā)育的影響以及細(xì)胞極性化的產(chǎn)生所做的研究并不十分清楚。Reelin蛋白是在遷移細(xì)胞的過(guò)程中充當(dāng)了終止信號(hào)的作用,這種蛋白對(duì)細(xì)胞片層化和細(xì)胞極性化以及血管的形成起著決定性的關(guān)鍵作用。我們用正常小鼠(WT)與Reeler小鼠的小腦分別進(jìn)行尼氏染色,血管灌注和免疫細(xì)胞化學(xué)的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究,探討Reelin蛋白的缺失對(duì)小腦皮質(zhì)和血管發(fā)育的影響。目的觀察Reelin基因缺失的Reeler小鼠小腦浦肯野細(xì)胞遷移與極性化的改變以及Reelin基因?qū)π∈笱苌L(zhǎng)的影響;探討Reeler小鼠血管的發(fā)生和細(xì)胞之間的關(guān)系,同時(shí)分析這兩種小鼠浦肯野細(xì)胞極性化的改變和血管發(fā)育方式的不同。方法本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué),尼氏染色技術(shù)和墨汁灌注技術(shù)標(biāo)記兩種不同小鼠從E17到P21小腦內(nèi)神經(jīng)細(xì)胞的發(fā)育情況,并進(jìn)行形態(tài)學(xué)的觀察,同時(shí)對(duì)Reeler與野生型小鼠小腦皮質(zhì)內(nèi)血管體密度和浦肯野細(xì)胞直徑的大小和角度進(jìn)行測(cè)量與比較。結(jié)果①Reeler小鼠小腦的皮質(zhì)在發(fā)育過(guò)程中片層化發(fā)生了紊亂,沒(méi)有形成正常的三層分層結(jié)構(gòu):外顆粒層(分子層),浦肯野細(xì)胞層,內(nèi)顆粒層。②浦肯野細(xì)胞在遷移過(guò)程中細(xì)胞極性發(fā)生了改變,通過(guò)對(duì)小腦浦肯野細(xì)胞直徑的大小和細(xì)胞角度改變的測(cè)量,發(fā)現(xiàn)不同的小鼠細(xì)胞極性發(fā)生了明顯的不同,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05③墨汁灌注的方法顯示兩種小鼠小腦內(nèi)血管的體密度都呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì),根據(jù)發(fā)育過(guò)程中血管體密度變化的相關(guān)性分析可知:P3和P7時(shí)Reeler小鼠血管體密度與WT小鼠相比P0.05;P14和P21時(shí),Reeler小鼠血管體密度與WT小鼠相比P0.01,顯示出發(fā)育過(guò)程中血管的體密度與年齡有關(guān),差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。另外觀察不同小鼠血管的外觀也有很大的差異。結(jié)論在小腦發(fā)育過(guò)程中缺少Reelin蛋白的Reeler小鼠皮質(zhì)片層化發(fā)生紊亂,神經(jīng)細(xì)胞極性發(fā)生改變,血管排列紊亂,體密度與相同年齡點(diǎn)的野生小鼠相比增大,Reelin蛋白在小腦皮質(zhì)片層化發(fā)育生長(zhǎng)的過(guò)程中發(fā)揮了至關(guān)重要的作用,一方面控制了皮層神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變,并推進(jìn)了哺乳動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育的規(guī)律模式,形成了小腦發(fā)育的不同結(jié)構(gòu);Reelin也是一種支架蛋白,它的作用是調(diào)節(jié)放射狀膠質(zhì)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)排列,為提供了細(xì)胞的正確遷移方向以及可以使血管能正常發(fā)育。提示Reelin蛋白的突變對(duì)細(xì)胞的發(fā)育造成了損傷,從而使皮質(zhì)片層化發(fā)育和血管發(fā)生的紊亂以神經(jīng)細(xì)胞極性的改變。
【關(guān)鍵詞】：小腦 浦肯野細(xì)胞 Reelin蛋白 血管 細(xì)胞極性化
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R338
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 1 緒論10-16
• 1.1 Reelin及其受體的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和生物學(xué)特性10-12
• 1.1.1 Reelin的功能10-12
• 1.1.2 Reelin蛋白的受體與信號(hào)傳導(dǎo)12
• 1.2 Reelin蛋白和精神疾病的關(guān)系12-15
• 1.2.1 Reelin蛋白與自閉癥12-13
• 1.2.2 Reelin蛋白與精神分裂癥13
• 1.2.3 Reelin蛋白與阿爾茲海默13-14
• 1.2.4 Reelin蛋白與無(wú)腦回畸形14
• 1.2.5 Reelin蛋白與雙相情感障礙14-15
• 1.2.6 Reelin蛋白與重度抑郁癥15
• 1.3 目的及意義15-16
• 2 材料、儀器與方法16-24
• 2.1 動(dòng)物的選擇取材和切片16
• 2.1.1 PCR基因鑒定16
• 2.2 實(shí)驗(yàn)材料16-17
• 2.2.1 免疫組織化學(xué)試劑16-17
• 2.2.2 Nissl染色所用試劑17
• 2.3 實(shí)驗(yàn)試劑及配方17-19
• 2.4 實(shí)驗(yàn)主要儀器19-20
• 2.5 切片的制作20
• 2.5.1 石蠟切片20
• 2.5.2 震蕩切片20
• 2.6 Nissl染色20-21
• 2.7 免疫組織化學(xué)熒光反應(yīng)21
• 2.8 墨汁灌注法21
• 2.9 參數(shù)測(cè)量及統(tǒng)計(jì)學(xué)處理21-24
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-32
• 3.1 Reeler小鼠與神經(jīng)細(xì)胞極性的改變24-26
• 3.2 Reeler小鼠與小腦血管發(fā)育26-28
• 3.3 Reeler小鼠與小腦浦肯野細(xì)胞極性化改變28-32
• 4 討論32-36
• 4.1 Reelin蛋白可參與浦肯野細(xì)胞遷移的起始和終止32
• 4.2 Reelin蛋白的缺失可導(dǎo)致血管發(fā)育的紊亂32-33
• 4.3 Reelin蛋白可影響小腦浦肯野細(xì)胞的發(fā)育和極性變化33-36
• 5 結(jié)論36-38
• 參考文獻(xiàn)38-42
• 附圖42-46
• 圖片說(shuō)明46-52
• 附錄52-56
• 附錄A 縮略語(yǔ)表52-54
• 附錄B 攻讀學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文目錄54-56
• 致謝56-58

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本文編號(hào)：270153