【摘要】：克羅諾桿菌是一種兼性厭氧革蘭氏陰性菌,通常以嬰幼兒配方奶粉為主要感染渠道,對嬰幼兒的身體健康造成嚴重危害。該菌可引起新生兒細菌性腦膜炎、壞死性小腸結(jié)腸炎和菌血癥等,且致死率高達40%-80%。克羅諾桿菌分布廣泛且嚴重危害某些特定人群(如新生兒)生命而被廣泛關(guān)注�？肆_諾桿菌的抗逆性很強,而目前對克羅諾桿菌抗逆性的相關(guān)基因研究鮮有報道。本課題以丙二酸鹽克羅諾桿菌野生株為主要研究對象,通過質(zhì)粒結(jié)合轉(zhuǎn)移的方法構(gòu)建克羅諾桿菌的突變體庫�；谕蛔冎旰鸵吧暝诓煌婢趁{迫下(滲透壓脅迫、氧化應(yīng)激脅迫、干燥脅迫、酸脅迫)生長情況,篩選出具有代表性的不同逆境耐受突變株;通過隨機PCR反應(yīng)及數(shù)據(jù)庫比對確定其突變位點。在此基礎(chǔ)上,開展結(jié)晶紫染色測量突變株和野生株生物膜形成能力實驗研究,并借助激光共聚焦和掃描電子顯微鏡表征逆境脅迫下野生株和突變株的生物膜微觀變化。結(jié)果表明,1.滲透壓脅迫相關(guān)因子包括:內(nèi)膜蛋白Yhj D、鉀離子外流蛋白Kef A、肽基輔氨酰異構(gòu)酶、半胱氨酸-t RNA復(fù)合結(jié)構(gòu)脫�；�、寡聚半乳酸裂解酶;2.干燥脅迫相關(guān)因子包括:葡萄糖-6-磷酸異構(gòu)酶、糖基水解酶、海藻糖-6-磷酸合酶、外膜蛋白A、碳磷裂解酶復(fù)合物亞基團;3.氧化應(yīng)激脅迫相關(guān)因子包括:泛酰酸激酶、絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶、丙酮酸激酶、磷脂酶A、丙氨酸消旋酶2、鐵離子轉(zhuǎn)運蛋白A、硫氧還蛋白2和谷氧還蛋白3;4.酸脅迫相關(guān)基因包括:葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶Mdo H、胞外絲氨酸蛋白酶、硫酸鹽轉(zhuǎn)運體、磷酸鹽轉(zhuǎn)運體亞基,并且我們發(fā)現(xiàn)除了糖基水解酶之外,其他突變株生物膜形成較野生株均為顯著下降,可見,克羅諾桿菌通過產(chǎn)生生物膜增強自身在逆境條件下的存活能力,研究結(jié)果為探究克羅諾桿菌抗逆性機制提供了基礎(chǔ)理論數(shù)據(jù),對預(yù)防和控制食品加工過程中的克羅諾桿菌的污染具有重要意義。
【圖文】：

pBSL180質(zhì)粒Fig2.1ThepBSL180plasmid

圖 2.5 滲透壓脅迫下野生株與突變株菌膜形成能力（激光共聚焦） 2.5 Biofilm formation ability of mutants and WT under osmotic stress (CL透壓脅迫下培養(yǎng)克羅諾桿菌野生株與突變株的生物膜，結(jié)合 S標記死菌與活菌數(shù)，，用激光共聚焦對染色后各菌株的生物膜進
【學(xué)位授予單位】：合肥工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R378

【參考文獻】

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1 董曉暉;李程思;吳清平;張菊梅;莫樹平;郭偉鵬;楊小鵑;徐曉可;;食品污染克羅諾桿菌(阪崎腸桿菌)的分離及鑒定[J];微生物學(xué)報;2013年05期

2 李萍;邢麗萍;王文;;從醬腌菜中檢出一株阪崎腸桿菌[J];疾病監(jiān)測與控制;2013年01期

3 董曉暉;吳清平;莫樹平;楊小鵑;;阪崎腸桿菌隨機突變體庫的構(gòu)建[J];現(xiàn)代食品科技;2012年11期

4 陸幸兒;鄭悅康;吳燦權(quán);;10類食品污染阪崎腸桿菌狀況的調(diào)查研究[J];中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新;2011年18期

5 陸貞玉;;阪崎腸桿菌的生物學(xué)特性及檢測技術(shù)研究進展[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2010年10期

6 吳清平;董曉暉;張菊梅;葉應(yīng)旺;徐曉可;楊小鵑;吳葵;;阪崎腸桿菌分類與致病機制[J];微生物學(xué)報;2010年07期

7 李秀娟;徐保紅;田會方;高偉利;宋紅梅;;奶粉中阪崎腸桿菌PCR檢測方法的建立[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2010年07期

8 汪保衛(wèi);施慶珊;歐陽友生;陳儀本;;細菌抗氧化系統(tǒng)-oxyR調(diào)節(jié)子研究進展[J];微生物學(xué)報;2008年11期

9 吳清平;葉應(yīng)旺;郭偉鵬;楊寧;;阪崎腸桿菌的生物學(xué)特性及其檢測技術(shù)[J];微生物學(xué)通報;2006年06期

本文編號：2647432