【摘要】：目的:癲癇與中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮性遞質(zhì)和抑制性遞質(zhì)的平衡失調(diào)密切相關(guān)。生長抑素(Somatostatin,SST)和神經(jīng)肽Y(Neuropeptide Y,NPY)是內(nèi)源性多肽,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)重要的神經(jīng)遞質(zhì),在哺乳動物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)分布廣泛。癲癇模型大鼠(Epileptic rat model,TRM)是一種遺傳性癲癇動物模型,可在無任何外界刺激下引發(fā)癲癇。本研究檢測了TRM的大腦中海馬、顳葉皮質(zhì)和小腦部位SST和NPY的表達分布。探討SST和NPY的表達與TRM的相關(guān)性,闡明癲癇發(fā)病相關(guān)的分子機制,為癲癇的治療提供理論依據(jù)。方法:實驗動物采用14只TRM和14只對照組Wistar大鼠,取出各組大鼠海馬、顳葉皮質(zhì)和小腦3個部位。使用Trizol試劑提取各部位的總RNA,并用Real time-PCR法檢測各組間SST和NPY的mRNA表達水平變化。進一步采用免疫組化方法檢測各組大鼠海馬Ca3區(qū)、海馬hilus區(qū)、顳葉皮質(zhì)和小腦部位SST和NPY蛋白表達水平的變化。結(jié)果:Real time-PCR結(jié)果顯示,與正常對照組Wistar大鼠相比,TRM海馬和顳葉皮質(zhì)SST和NPY的mRNA表達均上調(diào),具有顯著性差異(p0.05)。免疫組化結(jié)果也證實TRM的海馬Ca3區(qū)、hilus區(qū)和顳葉部位SST和NPY的表達增加,具有顯著性差異(p0.05)。Real time-PCR和免疫組化證明,與對照組相比TRM組小腦部位的SST和NPY無論是mRNA水平還是蛋白表達水平均無顯著性差異(p0.05)。結(jié)論:綜上所述,與正常對照組Wistar大鼠相比,TRM組海馬和顳葉皮質(zhì)SST和NPY的mRNA水平和多肽合成水平均顯著上調(diào)。而與對照組相比,TRM組小腦部位的SST和NPY無顯著性差異。進一步分析認為,在TRM組海馬Ca3區(qū)和hilus區(qū),NPY和SST的表達增加,這可能是機體內(nèi)源性神經(jīng)系統(tǒng)自發(fā)激活的反饋作用,是機體的一種適應(yīng)性反應(yīng),以減輕或防止癲癇發(fā)作神經(jīng)元損傷。SST和NPY作為一種內(nèi)源性的抗癲癇藥物,在癲癇發(fā)病和治療中起著重要作用。外源給予SST和NPY或用基因治療方法過表達SST和NPY是癲癇病治療的新思路。
【圖文】：

均以平均值加減標準差表示。各組間比較采用 t 檢驗，，統(tǒng)設(shè)定為 0.05。所有統(tǒng)計分析均使用 SPSS 軟件 19.0 版本。3 結(jié)果 鼠基因鑒定認由實驗室自行繁殖并飼養(yǎng)至 4 周齡時 TRM 種鼠中真正具過 PCR 方法特異性擴增癲癇基因來鑒定。如圖所示，CO因的正常大鼠，條帶無明顯表達；CON2 為具有癲癇基因的陽性對照，有兩條條帶。TRM1 至 TRM4 為 4 只癲癇基源的電泳條帶與陽性對照 CON2 表達條帶相同，可確定其為鼠。取用該鼠鼠腦進行 RT-PCR 及免疫組化等后續(xù)一系列

中國醫(yī)科大學碩士學位論文3.2 Real time-PCR 檢測兩種信號肽的相對表達量采用 RT-PCR 方法測量 TRM 和對照組大鼠的大腦區(qū)域 SST 和 NPY 的 水平。如圖 2 所示，TRM 與對照組相比，海馬和顳葉皮質(zhì) SST 和 NPY 的 表達均升高，具有顯著性差異（p<0.05），結(jié)果見表 2。然而，在 TRM 的小中兩種神經(jīng)肽的表達無顯著性差異（p>0.05），如圖 2 所示。
【學位授予單位】：中國醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R742.1;R-332

【參考文獻】

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2 徐曉雪;郭鳳;王千慧;張朝東;楊軍;趙久晗;蔡際群;;神經(jīng)肽Y及其Y1受體在遺傳性癲癇大鼠腦內(nèi)的表達及意義[J];中國醫(yī)科大學學報;2014年09期

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本文編號：2616199