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LPS及TOLL樣受體4阻斷劑對蛻膜細胞中PR及IL-1β、COX-2影響的研究

發(fā)布時間:2020-02-18 19:59
【摘要】:目的: 旨在研究脂多糖(LPS)及其拮抗劑TOLL樣受體4阻斷劑(TLR4mAb)作用于體外培養(yǎng)的蛻膜細胞后孕激素受體(PR)、 IL-1β及COX-2的表達情況,以探討脂多糖及其拮抗劑對蛻膜細胞中孕激素受體的影響,和孕激素受體與炎癥因子之間的關系。 方法: 分離培養(yǎng)人早孕蛻膜細胞,當細胞傳代至3-4代時,采用HE染色觀察細胞形態(tài)、免疫熒光技術鑒別細胞純度,將蛻膜細胞隨機分為6組:分別用0ug/ml、1ug/ml和3ug/ml終濃度TLR4mAb各2孔預處理細胞24小時,再用Ong/ml、100ng/ml LPS分別加入三組TLR4mAb中作用24小時。用MTT技術檢測細胞存活及生長率、RT-PCR半定量技術,檢測PR、 IL-1β及COX-2mRNA的表達變化。 結果: 1.免疫熒光示,蛻膜細胞傳到3-4代時體積較第一代增大,胞核更明顯且純度更高,鏡下形態(tài)一致性高。 2.MTT實驗示,與對照組比較LPS抑制細胞生長(P0.05);TLR4mAb促進細胞增殖,且一定濃度的TLR4mAb能夠在一定程度上拮抗LPS對細胞生長的抑制作用(P0.05),無統(tǒng)計學意義。 3.RT-PCR實驗示: (1)LPS使蛻膜細胞中PR mRNA的表達下調(diào)(P0.05),使IL-1β和COX-2mRNA的表達上調(diào)(P0.05); (2)TLR4mAb使蛻膜細胞中PR和COX-2mRNA的表達無統(tǒng)計學意義(P0.05),使IL-1β mRNA的表達下調(diào)(P0.05); (3)TLR4mAb則使LPS作用后的蛻膜細胞中PR mRNA的表達上調(diào)(P0.05)、 IL-1βmRNA的表達下調(diào)(P0.05);高濃度TLR4mAb使COX-2mRNA的表達下調(diào)(P0.05)。 結論: LPS作用于體外培養(yǎng)的人蛻膜細胞后, PR mRNA表達下調(diào);IL-1β、 COX-2的1mRNA表達增加;使用TOLL樣受體4阻斷劑后能拮抗LPS對蛻膜細胞中IL-1β、 COX-2的作用。
【學位授予單位】:中南大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2012
【分類號】:R321

【參考文獻】

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本文編號:2580803

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