【摘要】：目的： 旨在研究脂多糖(LPS)及其拮抗劑TOLL樣受體4阻斷劑(TLR4mAb)作用于體外培養(yǎng)的蛻膜細(xì)胞后孕激素受體(PR)、 IL-1β及COX-2的表達(dá)情況,以探討脂多糖及其拮抗劑對(duì)蛻膜細(xì)胞中孕激素受體的影響,和孕激素受體與炎癥因子之間的關(guān)系。 方法： 分離培養(yǎng)人早孕蛻膜細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞傳代至3-4代時(shí),采用HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)、免疫熒光技術(shù)鑒別細(xì)胞純度,將蛻膜細(xì)胞隨機(jī)分為6組：分別用0ug/ml、1ug/ml和3ug/ml終濃度TLR4mAb各2孔預(yù)處理細(xì)胞24小時(shí),再用Ong/ml、100ng/ml LPS分別加入三組TLR4mAb中作用24小時(shí)。用MTT技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞存活及生長(zhǎng)率、RT-PCR半定量技術(shù),檢測(cè)PR、 IL-1β及COX-2mRNA的表達(dá)變化。 結(jié)果： 1.免疫熒光示,蛻膜細(xì)胞傳到3-4代時(shí)體積較第一代增大,胞核更明顯且純度更高,鏡下形態(tài)一致性高。 2.MTT實(shí)驗(yàn)示,與對(duì)照組比較LPS抑制細(xì)胞生長(zhǎng)(P0.05)；TLR4mAb促進(jìn)細(xì)胞增殖,且一定濃度的TLR4mAb能夠在一定程度上拮抗LPS對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用(P0.05),無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.RT-PCR實(shí)驗(yàn)示： (1)LPS使蛻膜細(xì)胞中PR mRNA的表達(dá)下調(diào)(P0.05),使IL-1β和COX-2mRNA的表達(dá)上調(diào)(P0.05)； (2)TLR4mAb使蛻膜細(xì)胞中PR和COX-2mRNA的表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),使IL-1β mRNA的表達(dá)下調(diào)(P0.05)； (3)TLR4mAb則使LPS作用后的蛻膜細(xì)胞中PR mRNA的表達(dá)上調(diào)(P0.05)、 IL-1βmRNA的表達(dá)下調(diào)(P0.05)；高濃度TLR4mAb使COX-2mRNA的表達(dá)下調(diào)(P0.05)。 結(jié)論： LPS作用于體外培養(yǎng)的人蛻膜細(xì)胞后, PR mRNA表達(dá)下調(diào);IL-1β、 COX-2的1mRNA表達(dá)增加；使用TOLL樣受體4阻斷劑后能拮抗LPS對(duì)蛻膜細(xì)胞中IL-1β、 COX-2的作用。
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類(lèi)號(hào)】：R321

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2580803