【摘要】：目的：LOH12CR1是由本課題組在2008年篩選到的LKB1羧基端互作蛋白,LOH12CR1位于12號(hào)染色體短臂雜合子缺失區(qū)域,進(jìn)化上高度保守,編碼的蛋白亞細(xì)胞定位于胞漿和少量細(xì)胞核內(nèi),但其具體作用機(jī)制尚不明確。PSME1是2011年本課題組初步篩選出LOH12CR1的互作蛋白,其主要功能是增加20S蛋白酶體的蛋白降解活性和參與主要組織相容性復(fù)合體aI(MHC-I)類分子限制性抗原提呈。本研究將驗(yàn)證LOH12CR1與PSME1是否存在真正的蛋白質(zhì)互作關(guān)系,為L(zhǎng)OH12CR1的功能研究提供新的方向。 方法：本研究將構(gòu)建的pCDNA3.1-myc-LOH12CR1和pCMV-tag2B-PSME1重組質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞,通過(guò)免疫共沉淀技術(shù)驗(yàn)證LOH12CR1與PSME1的蛋白互作關(guān)系。通過(guò)免疫熒光實(shí)驗(yàn)和激光共聚焦檢測(cè)驗(yàn)證LOH12CR1與PSME1亞細(xì)胞定位情況。 結(jié)果：經(jīng)免疫共沉淀技術(shù)證實(shí)PSME1是LOH12CR1的互作蛋白。經(jīng)免疫熒光實(shí)驗(yàn)和激光共聚焦檢測(cè)初步證實(shí)LOH12CR1與PSME1存在亞細(xì)胞共定位,且主要共定位于胞漿。 結(jié)論：PSME1是LOH12CR1互作蛋白,提示LOH12CR1可能參與了蛋白質(zhì)降解和主要組織相容性復(fù)合體I(MHC-I)類分子限制性抗原提呈過(guò)程,這些假設(shè)我們將在后續(xù)的研究中加以驗(yàn)證。
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R392.1

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本文編號(hào)：2570523