【摘要】：目的:研究Ca~(2+)感受蛋白[基質(zhì)相互作用分子1(STIM1)與鈣釋放激活鈣通道蛋白1(Orai1)]在人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)鈣敏感受體(Ca SR)介導(dǎo)的鈣內(nèi)流和一氧化氮(NO)生成中的相互作用。方法:將Ca SR激動劑精胺[鈣池操縱性鈣通道(SOC)和受體操縱性鈣通道(ROC)均激活]單用或與ROC模擬劑12-O-十四烷酰佛波醇-13-醋酸酯(TPA)+Ca SR負性變構(gòu)調(diào)節(jié)劑Calhex 231(激活ROC、阻斷SOC)、蛋白激酶C(PKC)抑制劑Ro 31-8220和PKCα/β1選擇性抑制劑Go 6976(激活SOC、阻斷ROC)聯(lián)合孵育HUVECs;利用免疫熒光技術(shù)檢測HUVECs中STIM1和Orai1的蛋白表達和共定位;免疫共沉淀法檢測STIM1和Orai1之間的相互作用;取2~3代HUVECs隨機分為特異性的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組(sh STIM1+sh Orai1組)、空質(zhì)粒組(vehicle-STIM1+vehicle-Orai1組)和未轉(zhuǎn)染組(control組),將3組細胞分別加入上述4組不同藥物刺激,采用熒光探針Fura-2/AM檢測HUVECs中Ca~(2+)濃度的變化,NO熒光探針DAF-FM DA負載方法同步檢測HUVECs中NO生成的變化。結(jié)果:STIM1和Orai1蛋白表達共定位于胞漿,與control組相比,加入Calhex 231+TPA、Ro 31-8220和Go 6976刺激后,STIM1和Orai1在胞漿中的定位均減少,且二者的相互作用均減弱;在4種不同處理因素作用下,sh STIM1+sh Orai1組細胞內(nèi)Ca~(2+)濃度和NO凈熒光強度均明顯降低(P0.05)。結(jié)論:STIM1與Orai1以二元復(fù)合物的形式共同調(diào)節(jié)Ca SR,并通過激活SOC和ROC介導(dǎo)鈣內(nèi)流及NO生成。

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3 寧鋼民,楊曉玲 ,李海燕 ,鄭筱祥;內(nèi)源性和外源性NO對大鼠動脈壓力感受器反射的調(diào)節(jié)(英文)[J];航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程;2004年06期

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5 閻長棟，顧洛，陳閩，，田蘇平，李棟生;辣椒素敏感傳入神經(jīng)和NO中介胃內(nèi)蛋白陳引起的酸和血流增加效應(yīng)[J];生理學(xué)報;1996年01期

6 姜志勝,王相智,龔曼麗,劉初峰,唐朝樞;堿性成纖維細胞生長因子對猴冠狀動脈NO生成的影響[J];北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1997年06期

7 王新良,黃善生,陳曉玲,凌亦凌,喬麗敏;腎缺血再灌注損傷時腎臟NO的生成及其作用[J];中國病理生理雜志;2000年10期

8 余國膺;;NO與內(nèi)皮素研究近況[J];國外醫(yī)學(xué)情報;1996年11期

9 張位星,龔光甫,陳勝喜;吸入NO對在體兔肺缺血再灌注損傷時的保護作用[J];中國醫(yī)師雜志;2005年01期

10 王六一;白細胞機能與NO的相關(guān)性研究[J];青海醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2001年01期

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2 武建軍;沈洪;張穎麗;顏光濤;王成斌;;大鼠缺氧、缺血時α_1和β腎上腺素能受體和NO的變化[A];中華醫(yī)學(xué)會急診醫(yī)學(xué)分會復(fù)蘇、災(zāi)害、中毒專業(yè)聯(lián)合學(xué)術(shù)交流會資料匯編[C];1999年

3 張海濤;張海風;祝其鋒;;鱟血細胞多肽對脂多糖誘導(dǎo)人動脈平滑肌細胞釋放NO的影響的研究[A];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)會第八屆會員代表大會暨全國學(xué)術(shù)會議論文摘要集[C];2001年

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5 朱曉晴;程津培;;一氧化氮(NO)化學(xué)親合勢標度的建立及其應(yīng)用[A];中國化學(xué)會第四屆有機化學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集（下冊）[C];2005年

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