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中緬邊境惡性瘧原蟲MDR1基因及MSP1基因多態(tài)性的檢測(cè)分析

發(fā)布時(shí)間:2019-09-28 22:52
【摘要】:目的了解中緬邊境惡性瘧原蟲株pfmdr1及pfMSP1基因多態(tài)性及分布特點(diǎn);探究pfmdr1基因是否可以用于分型研究;分析pfMSP1基因多態(tài)性與pfmdr1、瘧疾臨床表現(xiàn)的相關(guān)性以及其影響因素。 方法Chelex-100提取濾紙血滴惡性瘧原蟲DNA,巢式PCR方法擴(kuò)增pfmdr1基因編碼蛋白第86氨基酸片段及pfMSP1基因第2區(qū)與第3區(qū)部分片段,并進(jìn)一步對(duì)其進(jìn)行DNA測(cè)序;對(duì)擴(kuò)增片段基因的結(jié)構(gòu)、同源性進(jìn)行分析;統(tǒng)計(jì)學(xué)分析pfMSP1基因多態(tài)性同種族、性別、年齡、瘧疾病史、原蟲血癥等影響因素以及與瘧疾臨床表現(xiàn)的相關(guān)性。 結(jié)果(1)49份樣本全部擴(kuò)增出pfmdr1基因的目的條帶,與3D7株比較顯示中緬邊境惡性瘧原蟲pfmdr1基因第86位點(diǎn)未發(fā)生突變,第25、27、28、29、30位氨基酸均發(fā)生基因突變。系統(tǒng)發(fā)育樹分析得出pfmdr1基因地域指示性不高。(2)47份樣本擴(kuò)增出72個(gè)目的條帶,,以MAD20型為主導(dǎo)型(占63.89%),K1、RO33型為次之,并存在不同等位基因株混合感染現(xiàn)象。(3)與泰國(guó)惡性瘧原蟲株MAD20亞型(AB276006.1)比較其105、109、116、122、128、132、133、134、135位氨基酸存在不同程度的突變,以T-109為甚,頻度分別為95.7%。與泰國(guó)惡性瘧原蟲株K1亞型(AB276007.1)比較見55、56、67、68、69、70、71、72、79、80、81、82、83、84、87、88、89、90、93、95、96、105、138、140、141位氨基酸存在不同程度的突變,以T-87、-88、-89、-90、T-93、G-95、T-96為甚,頻度分別為53.33%、53.33%、53.33%、53.33%、60%、53.33%和53.33%。與加納惡性瘧原蟲株的RO33亞型(AB276005.1)比較其55、56、57、67、119位氨基酸存在不同程度的突變,以D-55(63.6%)為甚?傊,中緬邊境惡性瘧原蟲pfMSP1基因具有較高的多態(tài)性。(5)pfMSP1基因多態(tài)性與種族、性別、年齡、瘧疾病史、原蟲血癥不存在相關(guān)性,推測(cè)可能與野生型pfmdr1、混合亞型感染、地理區(qū)域有關(guān)。(6) pfMSP1基因亞型單一感染與混合感染的癥狀無(wú)差異。兩例中緬邊境重癥瘧患者的血滴標(biāo)分離出MAD20亞型。 結(jié)論(1)中緬邊境pfmdr1基因具有多態(tài)性。(2)初步證實(shí)pfmdr1基因地域指示性不高,不適合作為分型基因。(3) pfMSP1存在MAD20型、K1型和RO33型三種等位基因型,以MAD20型為優(yōu)勢(shì)蟲株,且有瘧疾癥狀者以MAD20型為主,pfMSP1基因的感染復(fù)數(shù)(MOI)為1.47。(4)中緬邊境惡性瘧原蟲pfMSP1基因存在較高的多態(tài)性。
【學(xué)位授予單位】:大理學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號(hào)】:R392

【參考文獻(xiàn)】

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9 陳姝,陸惠民,高琪,張山鷹,唐學(xué)恒,孫臻安;IL-12對(duì)伯氏瘧原蟲紅內(nèi)期感染小鼠淋巴細(xì)胞增殖活性的影響[J];中國(guó)寄生蟲病防治雜志;2005年03期

10 諸欣平,周蕾,劉強(qiáng),高欣;云南省惡性瘧原蟲裂殖子表面蛋白1基因分型及測(cè)序[J];中國(guó)寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志;1999年03期



本文編號(hào):2543527

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