本文關(guān)鍵詞：糖原磷酸化酶同工酶BB在小型豬心肌缺血模型變化趨勢(shì)分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景心血管并發(fā)癥,特別是圍手術(shù)期心肌梗死是非心臟手術(shù)后死亡的主要原因。隨著外科手術(shù)量不斷增加,圍手術(shù)期心肌損傷在臨床實(shí)踐中越來(lái)越常見(jiàn)。因?yàn)槌^(guò)80%的圍手術(shù)期心肌損傷患者并沒(méi)有明顯的臨床癥狀,大部分圍手術(shù)期心肌損傷并沒(méi)有明確診斷處理,此外它不明顯的表現(xiàn)導(dǎo)致醫(yī)生和大眾對(duì)其認(rèn)識(shí)有限。盡管圍手術(shù)期心肌損傷在很大程度上是沒(méi)有癥狀的,它使得手術(shù)后30天患者死亡率增加近10倍。手術(shù)中患者處于鎮(zhèn)靜睡眠狀態(tài),在很大程度上掩蓋了缺血性心肌損害的臨床癥狀,而手術(shù)所致軀體不適也會(huì)影響我們對(duì)心血管癥狀的甄別。因此加強(qiáng)圍術(shù)期心血管系統(tǒng)監(jiān)護(hù),檢測(cè)心肌缺血的早期敏感指標(biāo),可以提高心血管事件檢出率以及評(píng)估冠狀動(dòng)脈再灌注水平。目的生物標(biāo)志物作為常規(guī)臨床檢驗(yàn)的一部分可以很容易地檢測(cè)。糖原磷酸化酶同工酶腦型(glycogen phosphorylaseBB,GPBB)為糖原分解的關(guān)鍵酶,在心肌細(xì)胞肌漿網(wǎng)構(gòu)成糖原分解復(fù)合物,該復(fù)合物對(duì)缺血引起的糖原分解特別敏感,使其構(gòu)成發(fā)生改變,形成可溶性GPBB,透過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入血液,適于臨床急診測(cè)定。本研究通過(guò)分析GPBB在小型豬急性心肌缺血模型中動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì),特別是3小時(shí)之內(nèi)的連續(xù)血清濃度變化,評(píng)估GPBB在心肌損傷中的診斷價(jià)值。方法健康雄性巴馬系香豬(體重25±5kg)外科手術(shù)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈,制作小型豬心肌損傷壞死模型。本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)了缺血再灌注組和缺血無(wú)灌注組。GPBB主要存在于與腦和心肌組織,肌肉組織為糖原磷酸化酶同工酶肌型(glycogen phosphorylase,GPMM),因此開(kāi)胸手術(shù)冠狀動(dòng)脈結(jié)扎之后不同時(shí)間點(diǎn)測(cè)到的GPBB是由心肌細(xì)胞釋放,而排除手術(shù)引起的肌肉損傷所致,所以本實(shí)驗(yàn)沒(méi)有設(shè)置假手術(shù)組,而是在冠狀動(dòng)脈結(jié)扎前設(shè)置一次采血,記作0h,便于結(jié)扎后各時(shí)間點(diǎn)與其對(duì)照。選取巴馬系香豬30頭,隨機(jī)分為兩組,缺血1小時(shí)再灌注6小時(shí)(I 1h-R 6h)組20頭,缺血7小時(shí)(I 7h)組10頭。在全身麻醉下,監(jiān)測(cè)血壓、五導(dǎo)聯(lián)心電圖、脈搏氧飽和度,打開(kāi)胸腔,充分暴露心臟,結(jié)扎左前降支中下三分之一處。術(shù)中I 1h-R 6h組結(jié)扎1小時(shí)松開(kāi)結(jié)扎線,開(kāi)放血流,I 7h組持續(xù)結(jié)扎,同時(shí)觀察心電圖變化。小型豬生命體征平穩(wěn)時(shí),逐層關(guān)閉胸腔,麻醉復(fù)蘇。開(kāi)胸后,結(jié)扎前采血一次,記作0h,結(jié)扎時(shí)刻之后0.5h、1h、2h、3h、5h和7h共計(jì)7個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行靜脈采血,每次3-5ml,離心取上清并立即放入-80℃冰箱凍存,血清送往醫(yī)院檢驗(yàn)科由固定檢驗(yàn)醫(yī)師檢測(cè)cTnI濃度,用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定GPBB濃度。7h后,麻醉處死動(dòng)物,立即取出心臟。用冰冷的磷酸鹽緩沖液(PhosphateBufferedSaline,PBS)沖洗干凈,放入-40℃冰箱中冰凍1 h,待心肌變硬后取出,垂直于心臟長(zhǎng)軸,自心尖向心底切成2mm厚的切片,浸沒(méi)于1%的2,3,5-氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)磷酸鹽緩沖液中,放入37℃恒溫水浴箱30 min后取出,數(shù)碼相機(jī)拍照。結(jié)果1.成功建立小型豬心肌缺血模型。I 1h-R 6h組20頭,2頭死于術(shù)中室顫,1頭死于氣道梗阻導(dǎo)致的窒息缺氧。I 7h組10頭,1頭術(shù)中室顫,1頭術(shù)后死亡。2.心電圖改變,結(jié)扎后ST段下降,繼而上升,呈現(xiàn)典型心肌缺血表現(xiàn)。3.TTC染色后,正常心肌呈玫瑰紅色,梗死心肌呈蒼白色。驗(yàn)證心梗模型建立成功。4.兩組小型豬血清cTnI濃度在不同時(shí)相變化趨勢(shì)不同(P0.001)。兩組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.001)。和0h相比,I 1h-R 6h組2h肌鈣蛋白明顯升高(P0.05),I 7h組3h后緩慢升高,5h有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。5.兩組小型豬血清GPBB濃度在不同時(shí)相變化趨勢(shì)不同(P0.001)。兩組之間比較沒(méi)有差異(P0.05)。和0h相比,I 1h-R 6h組1h明顯升高,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),2h有所下降,3h再次升高,之后下降至正常水平。其峰值濃度的時(shí)間周期狹窄。I 7h組變化趨勢(shì)和I 1h-R 6h組類似。結(jié)論1.在小型豬心肌缺血模型中,血清中GPBB濃度在缺血1小時(shí)后即明顯升高,早于cTnI。2.持續(xù)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)肌鈣蛋白和GPBB,可以應(yīng)用于心肌缺血的早期診斷。
【關(guān)鍵詞】：圍術(shù)期心梗 生物標(biāo)記物 GPBB 早期診斷
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R54;R-332
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 英文縮略表8-11
• 引言11-15
• 1 材料與方法15-21
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物15
• 1.2 主要藥品及試劑15-16
• 1.3 主要儀器設(shè)備16
• 1.4 實(shí)驗(yàn)方法16-21
• 1.4.1 實(shí)驗(yàn)分組16-17
• 1.4.2 建立小型豬心梗模型17
• 1.4.3 取材17-18
• 1.4.4 小型豬心肌組織TTC染色18
• 1.4.5 醫(yī)院設(shè)備檢測(cè)兩組小型豬各時(shí)間點(diǎn)血清肌鈣蛋白濃度18
• 1.4.6 ELISA檢測(cè)兩組小型豬各時(shí)間點(diǎn)血清GPBB濃度18-19
• 1.4.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析19-21
• 2 結(jié)果21-27
• 2.1 成功構(gòu)建小型豬心肌梗死模型21
• 2.2 心電圖變化21-22
• 2.3 TTC染色22-23
• 2.4 肌鈣蛋白分析23-24
• 2.5 GPBB分析24-27
• 3 討論27-33
• 結(jié)論33-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 綜述39-50
• 參考文獻(xiàn)46-50
• 致謝50-51

【相似文獻(xiàn)】

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