本文關(guān)鍵詞：糖原磷酸化酶同工酶BB在小型豬心肌缺血模型變化趨勢分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景心血管并發(fā)癥,特別是圍手術(shù)期心肌梗死是非心臟手術(shù)后死亡的主要原因。隨著外科手術(shù)量不斷增加,圍手術(shù)期心肌損傷在臨床實踐中越來越常見。因為超過80%的圍手術(shù)期心肌損傷患者并沒有明顯的臨床癥狀,大部分圍手術(shù)期心肌損傷并沒有明確診斷處理,此外它不明顯的表現(xiàn)導(dǎo)致醫(yī)生和大眾對其認(rèn)識有限。盡管圍手術(shù)期心肌損傷在很大程度上是沒有癥狀的,它使得手術(shù)后30天患者死亡率增加近10倍。手術(shù)中患者處于鎮(zhèn)靜睡眠狀態(tài),在很大程度上掩蓋了缺血性心肌損害的臨床癥狀,而手術(shù)所致軀體不適也會影響我們對心血管癥狀的甄別。因此加強圍術(shù)期心血管系統(tǒng)監(jiān)護,檢測心肌缺血的早期敏感指標(biāo),可以提高心血管事件檢出率以及評估冠狀動脈再灌注水平。目的生物標(biāo)志物作為常規(guī)臨床檢驗的一部分可以很容易地檢測。糖原磷酸化酶同工酶腦型(glycogen phosphorylaseBB,GPBB)為糖原分解的關(guān)鍵酶,在心肌細(xì)胞肌漿網(wǎng)構(gòu)成糖原分解復(fù)合物,該復(fù)合物對缺血引起的糖原分解特別敏感,使其構(gòu)成發(fā)生改變,形成可溶性GPBB,透過細(xì)胞膜進入血液,適于臨床急診測定。本研究通過分析GPBB在小型豬急性心肌缺血模型中動態(tài)變化趨勢,特別是3小時之內(nèi)的連續(xù)血清濃度變化,評估GPBB在心肌損傷中的診斷價值。方法健康雄性巴馬系香豬(體重25±5kg)外科手術(shù)結(jié)扎冠狀動脈,制作小型豬心肌損傷壞死模型。本實驗設(shè)計了缺血再灌注組和缺血無灌注組。GPBB主要存在于與腦和心肌組織,肌肉組織為糖原磷酸化酶同工酶肌型(glycogen phosphorylase,GPMM),因此開胸手術(shù)冠狀動脈結(jié)扎之后不同時間點測到的GPBB是由心肌細(xì)胞釋放,而排除手術(shù)引起的肌肉損傷所致,所以本實驗沒有設(shè)置假手術(shù)組,而是在冠狀動脈結(jié)扎前設(shè)置一次采血,記作0h,便于結(jié)扎后各時間點與其對照。選取巴馬系香豬30頭,隨機分為兩組,缺血1小時再灌注6小時(I 1h-R 6h)組20頭,缺血7小時(I 7h)組10頭。在全身麻醉下,監(jiān)測血壓、五導(dǎo)聯(lián)心電圖、脈搏氧飽和度,打開胸腔,充分暴露心臟,結(jié)扎左前降支中下三分之一處。術(shù)中I 1h-R 6h組結(jié)扎1小時松開結(jié)扎線,開放血流,I 7h組持續(xù)結(jié)扎,同時觀察心電圖變化。小型豬生命體征平穩(wěn)時,逐層關(guān)閉胸腔,麻醉復(fù)蘇。開胸后,結(jié)扎前采血一次,記作0h,結(jié)扎時刻之后0.5h、1h、2h、3h、5h和7h共計7個時間點進行靜脈采血,每次3-5ml,離心取上清并立即放入-80℃冰箱凍存,血清送往醫(yī)院檢驗科由固定檢驗醫(yī)師檢測cTnI濃度,用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定GPBB濃度。7h后,麻醉處死動物,立即取出心臟。用冰冷的磷酸鹽緩沖液(PhosphateBufferedSaline,PBS)沖洗干凈,放入-40℃冰箱中冰凍1 h,待心肌變硬后取出,垂直于心臟長軸,自心尖向心底切成2mm厚的切片,浸沒于1%的2,3,5-氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride,TTC)磷酸鹽緩沖液中,放入37℃恒溫水浴箱30 min后取出,數(shù)碼相機拍照。結(jié)果1.成功建立小型豬心肌缺血模型。I 1h-R 6h組20頭,2頭死于術(shù)中室顫,1頭死于氣道梗阻導(dǎo)致的窒息缺氧。I 7h組10頭,1頭術(shù)中室顫,1頭術(shù)后死亡。2.心電圖改變,結(jié)扎后ST段下降,繼而上升,呈現(xiàn)典型心肌缺血表現(xiàn)。3.TTC染色后,正常心肌呈玫瑰紅色,梗死心肌呈蒼白色。驗證心梗模型建立成功。4.兩組小型豬血清cTnI濃度在不同時相變化趨勢不同(P0.001)。兩組之間比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.001)。和0h相比,I 1h-R 6h組2h肌鈣蛋白明顯升高(P0.05),I 7h組3h后緩慢升高,5h有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。5.兩組小型豬血清GPBB濃度在不同時相變化趨勢不同(P0.001)。兩組之間比較沒有差異(P0.05)。和0h相比,I 1h-R 6h組1h明顯升高,有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),2h有所下降,3h再次升高,之后下降至正常水平。其峰值濃度的時間周期狹窄。I 7h組變化趨勢和I 1h-R 6h組類似。結(jié)論1.在小型豬心肌缺血模型中,血清中GPBB濃度在缺血1小時后即明顯升高,早于cTnI。2.持續(xù)動態(tài)監(jiān)測肌鈣蛋白和GPBB,可以應(yīng)用于心肌缺血的早期診斷。
【關(guān)鍵詞】：圍術(shù)期心梗 生物標(biāo)記物 GPBB 早期診斷
【學(xué)位授予單位】：河南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R54;R-332
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 英文縮略表8-11
• 引言11-15
• 1 材料與方法15-21
• 1.1 實驗動物15
• 1.2 主要藥品及試劑15-16
• 1.3 主要儀器設(shè)備16
• 1.4 實驗方法16-21
• 1.4.1 實驗分組16-17
• 1.4.2 建立小型豬心梗模型17
• 1.4.3 取材17-18
• 1.4.4 小型豬心肌組織TTC染色18
• 1.4.5 醫(yī)院設(shè)備檢測兩組小型豬各時間點血清肌鈣蛋白濃度18
• 1.4.6 ELISA檢測兩組小型豬各時間點血清GPBB濃度18-19
• 1.4.7 統(tǒng)計學(xué)分析19-21
• 2 結(jié)果21-27
• 2.1 成功構(gòu)建小型豬心肌梗死模型21
• 2.2 心電圖變化21-22
• 2.3 TTC染色22-23
• 2.4 肌鈣蛋白分析23-24
• 2.5 GPBB分析24-27
• 3 討論27-33
• 結(jié)論33-35
• 參考文獻35-39
• 綜述39-50
• 參考文獻46-50
• 致謝50-51

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中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉怡;房殿吉;王松靈;;小型豬在口腔醫(yī)學(xué)研究中的應(yīng)用[J];中華口腔醫(yī)學(xué)雜志;2007年07期

2 陳華;;小型豬在醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的應(yīng)用進展[J];中國實驗動物學(xué)報;2008年05期

3 王桂花;尹曉敏;孫霞;趙德明;;國內(nèi)外小型豬資源概況[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2009年02期

4 ;首屆國際小型豬學(xué)術(shù)論壇在廣州舉行[J];中國實驗動物學(xué)報;2010年01期

5 ;2010廣州-東莞首屆國際小型豬學(xué)術(shù)論壇順利舉行[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2010年02期

6 岳敏;范沛;吳麗紅;顧為望;;廣州地區(qū)三種小型豬血液生理生化指標(biāo)的比較[J];中國比較醫(yī)學(xué)雜志;2011年08期

7 Berton F Hill;封培勤;;小型豬[J];上海實驗動物科學(xué);1988年03期

8 王愛德;覃樹華;郭亞芬;藍(lán)干球;;廣西小型豬的選育(初報)[J];上海實驗動物科學(xué);1989年04期

9 秦樹存;孫仁俊;;小型豬實驗性動脈粥樣硬化研究的回顧與展望[J];上海實驗動物科學(xué);1990年01期

10 魏泓;我國小型豬研究的現(xiàn)狀[J];中國實驗動物學(xué)雜志;1997年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 范沛;岳敏;吳麗紅;顧為望;;廣州地區(qū)三種小型豬血液生理生化指標(biāo)的比較[A];第九屆中國實驗動物科學(xué)年會（2010新疆）論文集[C];2010年

2 馬玉媛;呂茂民;吳建敏;丁芳;徐述;陽玉彪;郭艷茹;田克恭;章金剛;;我國小型豬內(nèi)源性反轉(zhuǎn)錄病毒的相關(guān)研究[A];中國實驗動物學(xué)會第七屆學(xué)術(shù)年會論文集[C];2006年

3 韓雅玲;趙慧強;王守力;王斌;荊全民;;中國小型豬慢性完全閉塞病變模型的建立[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會第十次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2008年

4 李洪濤;劉蓉;吳清洪;張新鳳;趙瑾;錢元新;廖東江;顧為望;;野百合堿誘導(dǎo)小型豬慢性肺動脈高壓動物模型的建立[A];第十屆中國實驗動物科學(xué)年會論文集[C];2012年

5 張冬梅;朱春花;邱波;閆俊;;小型豬取血方法[A];2013年（第三屆）中國藥物毒理學(xué)年會暨藥物非臨床安全性評價研究論壇論文摘要[C];2013年

6 原野;馬華智;吳純啟;;小型豬作為生殖毒性實驗?zāi)Ｐ偷奶攸c與優(yōu)勢分析[A];2013年（第三屆）中國藥物毒理學(xué)年會暨藥物非臨床安全性評價研究論壇論文摘要[C];2013年

7 張冬梅;朱春花;邱波;閆俊;;小型豬取血方法[A];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

8 原野;馬華智;吳純啟;;小型豬作為生殖毒性實驗?zāi)Ｐ偷奶攸c與優(yōu)勢分析[A];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志(2013年6月第27卷第3期)[C];2013年

9 詹純列;徐本法;李建軍;李權(quán)超;;SPF小型豬階段生長指標(biāo)的測定[A];中國實驗動物學(xué)會第五屆學(xué)術(shù)年會論文匯編[C];2000年

10 謝忠忱;黃廣勇;陳華;黃麗潔;茍鵬;賈琳;劉亞千;郭雄明;辛寧波;;小型豬高脂血癥對內(nèi)皮功能的影響[A];中國實驗動物學(xué)會第七屆學(xué)術(shù)年會論文集[C];2006年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉海峰;我國成功克隆出世界著名醫(yī)用小型豬[N];新華每日電訊;2007年

2 北京琉璃科興試驗動物養(yǎng)殖中心 孫國濤;小型豬的飼養(yǎng)和市場前景[N];中國特產(chǎn)報;2008年

3 記者 王丹 通訊員 朱丹萍;我學(xué)者建立免疫缺陷小型豬模型[N];健康報;2014年

4 駐站記者 李云飛 通訊員 呂小飛;小型豬禽飼養(yǎng)帶來大效益[N];赤峰日報;2007年

5 記者 白毅;基因敲除免疫缺陷小型豬模型建立[N];中國醫(yī)藥報;2014年

6 本報記者 張奇鋒 通訊員 張淼;豬器官或?qū)⑻娲梭w損壞器官[N];廣東科技報;2011年

7 記者 李立平;首批體細(xì)胞克隆醫(yī)用小型豬培育成功[N];大眾科技報;2007年

8 記者 李志峰　實習(xí)生 姜陽;小香豬每月生活費上千元[N];重慶日報;2010年

9 瞿劍;我國科學(xué)家首次育成小型豬近交系[N];中國畜牧獸醫(yī)報;2013年

10 記者 胡其峰;“小型豬近交系”首次成功育成[N];光明日報;2013年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張華;腹腔鏡技術(shù)建立小型豬肝損傷模型及肝臟環(huán)境變化的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

2 李偉;高滲鹽溶液干預(yù)對心肺復(fù)蘇后小型豬的保護作用及機制的實驗研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

3 陶博;小型豬心肌梗死后血管新生的在體多模態(tài)融合成像及干預(yù)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2016年

4 吳健敏;中國特有小型豬內(nèi)源性反轉(zhuǎn)錄病毒的檢測與全基因克隆[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2004年

5 崔立;實驗用小型豬種群凈化技術(shù)及其不同模型的建立和應(yīng)用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2005年

6 盧德章;小型豬特異性麻醉頡頏劑的研制及其催醒機理的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

7 陳云;小型豬實驗動物化和糖尿病模型及中藥“脾胃康”作用研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2005年

8 彭享勝;心肌梗死小型豬圍術(shù)期模型的構(gòu)建及內(nèi)源性血紅素氧合酶-1心臟保護作用的實驗研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學(xué)院;2005年

9 楊家大;應(yīng)用實時熒光定量方法研究實驗用小型豬細(xì)胞色素P450的表達(dá)[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

10 崔敬;小型豬腎損傷疾病模型的構(gòu)建及干預(yù)研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王月;腹腔鏡技術(shù)安裝小型豬多血管插管的實驗研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

2 劉濤;肝臟缺血與損傷對小型豬生理功能和組織再生的影響[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2015年

3 王金俠;冠狀動脈粥樣硬化小型豬腦Aβ的變化及健脾祛痰化瘀法的干預(yù)作用[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2015年

4 王志博;小型豬腹腔鏡與開放性腎部分切除術(shù)的對比研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2016年

5 鄭英宇;健脾祛痰化瘀法干預(yù)冠狀動脈粥樣硬化小型豬腦Aβ的實驗研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2016年

6 郭榮鑫;糖原磷酸化酶同工酶BB在小型豬心肌缺血模型變化趨勢分析[D];河南大學(xué);2016年

7 高銘杰;多模態(tài)小型豬心臟圖像的分割與配準(zhǔn)[D];西安電子科技大學(xué);2015年

8 張孌松;小型豬特異性麻醉頡頏劑對小型豬血流動力學(xué)的影響[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

9 馬昆;小型豬特異性麻醉頡頏劑催醒效果綜合監(jiān)測[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

10 董曉英;基于教學(xué)用途的小型豬脈澀變模型研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2008年

  本文關(guān)鍵詞：糖原磷酸化酶同工酶BB在小型豬心肌缺血模型變化趨勢分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：254340