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溫病濕熱證大鼠模型復(fù)制及加味藿樸夏苓湯作用機制的探討

發(fā)布時間:2019-09-27 02:00
【摘要】:目的:從建立溫病濕熱證大鼠模型入手,擇優(yōu)選取動物模型,觀察加味藿樸夏苓湯干預(yù)對模型大鼠血脂、TNF-a和IL-10以及舌組織AQP-5表達(dá)的影響,進(jìn)一步探討濕熱證病理及清熱祛濕方藥發(fā)揮治療作用的可能機制。 方法: 1、80只SD大鼠,隨機分為正常對照組(A組)、致病菌低劑量組(B、C、D組)、致病菌中劑量組(E、F、G組)、致病菌高劑量組(H、I、J組),每個劑量組下設(shè)置3個不同造模(濕熱環(huán)境)時間,B、E、H組造模21天,C、F、I組造模25天,D、G、J組造模28天。參照多因素復(fù)合造模方法建立濕熱證大鼠模型,觀察大鼠體溫、體重、食量、飲水量、癥狀及舌苔的變化,比較分析不同造模條件下模型證候指標(biāo)的變化,評價模型的質(zhì)量。 2、24只SD大鼠,隨機分正常對照組(自然環(huán)境+普通飼料飲食)、濕熱模型組(濕熱環(huán)境+高脂飼料飲食+大腸埃希氏菌灌胃)、藥物干預(yù)組(濕熱環(huán)境+高脂飼料飲食+大腸埃希氏菌灌胃+加味藿樸夏苓湯干預(yù))。按以上條件組合,采用造模時間28天及低劑量大腸埃希氏菌灌胃的造模條件復(fù)制濕熱證大鼠模型。觀察大鼠體溫、體重、食量、飲水量、癥狀和舌苔變化。采血送檢血脂,酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測大鼠血清TNF-α、IL-10的含量;取舌組織,行常規(guī)病理切片,HE染色,光鏡下觀察組織病理改變,采用免疫組化方法檢測AQP-5的表達(dá)情況。 結(jié)果: 1、采用多因素復(fù)合造模方法復(fù)制溫病濕熱證大鼠模型,不同的濕熱環(huán)境造模時間和大腸埃希氏菌灌胃劑量組合,各造模組無論是在體溫、食量、飲水量方面,還是在可觀察的動物癥狀、舌苔方面,均表現(xiàn)出不同程度的溫病濕熱證臨床證候。 2、在維持灌菌后體溫升高的嚴(yán)重程度和持續(xù)時間方面,致病菌低劑量組(B、C、D組)表現(xiàn)最好;在維持造模后的低飲食量和低飲水量方面,28天造模組(D、G、J組)嚴(yán)重程度較高;在舌苔出現(xiàn)率和癥狀的嚴(yán)重程度及穩(wěn)定性方面28天造模組仍然具有明顯的優(yōu)勢,癥狀出現(xiàn)的齊同性則為D、I、J組最好。綜合評價提示:D組大鼠各項證候指標(biāo)出現(xiàn)率、嚴(yán)重程度高,穩(wěn)定性、齊同性好,模型質(zhì)量最優(yōu)。 3、濕熱模型組體溫,TC、TG、LDL-c水平,血清TNF-a和IL-10濃度明顯升高(P0.05,P0.00),體重、飲水量、食量減少和HDL-c水平降低,較正常對照組有顯著差異(P0.05,P0.00);藥物干預(yù)組較濕熱模型組飲水量、食量顯著增加,血清。TNF-α、IL-10濃度顯著降低(P0.05);除TNF-α濃度藥物干預(yù)組較正常對照組明顯升高(P0.05)外,余觀測指標(biāo)恢復(fù),較正常組無顯著差別(P0.05) 4、濕熱模型組舌黏膜層的角質(zhì)細(xì)胞層、棘細(xì)胞層增厚,不完全角化細(xì)胞增多;舌固有層中度淋巴細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞浸潤、組織疏松水腫,肌層血管充血、組織輕度水腫。藥物干預(yù)組較濕熱模型組角質(zhì)細(xì)胞層、棘細(xì)胞層變薄,與正常對照組光鏡下無明顯差別;舌固有層輕度淋巴細(xì)胞浸潤、肌層無病理變化。 5、積分光密度和面積密度比較,濕熱模型組和藥物干預(yù)組舌組織AQP-5表達(dá)均較正常對照組明顯增加(P0.00,P0.05);藥物干預(yù)組AQP-5表達(dá)較濕熱模型組顯著減少(P0.05) 結(jié)論: 1、采用延長濕熱環(huán)境造模時間至28天及低劑量的致病微生物灌胃的造模條件,可復(fù)制出各項癥狀體征明顯、穩(wěn)定性、齊同性好的溫病濕熱證大鼠模型。 2、濕熱環(huán)境時間的適當(dāng)延長對增強模型大鼠癥狀體征的穩(wěn)定性、齊同性有積極的影響,低灌菌劑量可避免產(chǎn)生LPS耐受并使模型大鼠體溫升高且持續(xù)穩(wěn)定。 3、溫病濕熱證模型大鼠存在血脂紊亂,血清TNF-a和IL-10水平升高,舌組織病理改變和AQP-5的過度表達(dá)。舌組織AQP-5的過度表達(dá),可能與模型鼠膩苔的形成有關(guān)。 4、加味藿樸夏苓湯干預(yù)能改善模型大鼠的濕熱證候,其機制可能與其抑制機體炎癥反應(yīng),糾正血脂代謝紊亂,減輕舌組織炎癥和降低AQP-5表達(dá)的綜合調(diào)整作用有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號】:R-332;R285.5

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號:2542429

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