發(fā)布時(shí)間：2019-09-21 19:30

【摘要】：第一部分:低頻超聲聯(lián)合環(huán)丙沙星對銅綠假單胞菌生物被膜的殺菌作用 【目的】研究低頻超聲聯(lián)合環(huán)丙沙星對銅綠假單胞菌生物被膜(biofilm, BF)的膜內(nèi)細(xì)菌的殺菌作用。 【方法】體外建立銅綠假單胞菌PAO1菌株BF模型,用快速銀染法鑒定BF。將BF模型隨機(jī)分為5組:空白對照組,低頻超聲組,環(huán)丙沙星組,環(huán)丙沙星+低頻超聲組(超聲輻射前給藥),低頻超聲+環(huán)丙沙星組(超聲輻射后給藥),分別處理后用二甲氧唑黃(XTT)比色法測定BF內(nèi)細(xì)菌活性的情況。 【結(jié)果】快速銀染法顯示聚乙烯表面可見成熟BF。XTT比色法顯示5組在450nm處的吸光值(OD450值),空白對照組為2.30±0.55,低頻超聲組為2.71±0.80,環(huán)丙沙星組為2.57±0.70,環(huán)丙沙星+低頻超聲組為1.48±0.50,低頻超聲+環(huán)丙沙星組為1.63±0.50,空白對照組、低頻超聲組、環(huán)丙沙星組的細(xì)菌活性之間無顯著性差異(P0.05),環(huán)丙沙星+低頻超聲組與低頻超聲+環(huán)丙沙星組與其他三組相比細(xì)菌活性有顯著性差異(P0.05),環(huán)丙沙星+低頻超聲組與低頻超聲+環(huán)丙沙星組的細(xì)菌活性沒有顯著差異(P0.05)。 【結(jié)論】低頻超聲及環(huán)丙沙星單獨(dú)作用對BF無殺菌作用,低頻超聲聯(lián)合環(huán)丙沙星后,對BF有很好的殺菌作用。 第二部分:低頻超聲聯(lián)合環(huán)丙沙星對銅綠假單胞菌生物被膜結(jié)構(gòu)的影響 【目的】研究低頻超聲聯(lián)合環(huán)丙沙星對銅綠假單胞菌PAO1菌株生物被膜(biofilm, BF)結(jié)構(gòu)的影響,并初步探討其作用機(jī)制。 【方法】體外建立PAO1菌株BF模型,隨機(jī)分為5組:空白對照組,低頻超聲組,環(huán)丙沙星組,環(huán)丙沙星+低頻超聲組(超聲輻射前給藥),低頻超聲+環(huán)丙沙星組(超聲輻射后給藥),5組分別處理后,用熒光探針SYTO9/PI標(biāo)記,激光共聚焦顯微鏡(Confocal Laser Scanning Microscopy, CLSM)觀察,并結(jié)合圖像結(jié)構(gòu)分析(Image Structure Analyzer, ISA)軟件對BF結(jié)構(gòu)進(jìn)行定量分析;掃描電鏡(Scanning Electron Microscope, SEM)觀察BF結(jié)構(gòu)的改變。 【結(jié)果】空白對照組、低頻超聲組、環(huán)丙沙星組的BF厚度、區(qū)域孔徑、平均擴(kuò)散距離、結(jié)構(gòu)熵均無顯著性差異(P0.05),環(huán)丙沙星+低頻超聲組和低頻超聲+環(huán)丙沙星組BF厚度變薄,區(qū)域孔徑增大,平均擴(kuò)散距離與結(jié)構(gòu)熵減小,與空白對照組、低頻超聲組、環(huán)丙沙星組比有顯著性差異(P0.05);掃描電鏡顯示,低頻超聲或環(huán)丙沙星單獨(dú)處理后的BF清除不明顯,仍然可以看見大量的BF,低頻超聲聯(lián)合環(huán)丙沙星處理以后,BF清除非常明顯。 【結(jié)論】低頻超聲對BF結(jié)構(gòu)無影響,聯(lián)合環(huán)丙沙星后,具有很好的殺菌作用,且能破壞BF結(jié)構(gòu)。
【圖文】：

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28圖 2 銅綠假單胞菌生物被膜銀染結(jié)果 (×200sult of silver staining for Pseudomonas aeruginosa
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R378.991

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2539517