【摘要】：[目的]探討Wnt3a基因?qū)撬栝g充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)成軟骨分化的影響。[方法]分離培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs),攜帶Wnt3a及陰性對(duì)照基因(Mock)的慢病毒感染骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,構(gòu)建過(guò)表達(dá)Wnt3a骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;采用甲苯胺藍(lán)染色及QPCR觀察Wnt3a對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨分化能力的影響;使用MTT法觀察Wnt3a對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖能力的影響。[結(jié)果]在0~72 h內(nèi),實(shí)驗(yàn)組MTT法檢測(cè)吸光值明顯大于對(duì)照組(P0.05);BMSCs體外成軟骨誘導(dǎo)后,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞團(tuán)明顯小于對(duì)照組,且甲苯胺藍(lán)染色較淺;實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較,成軟骨指標(biāo)Col2A1、Aggrecan和SOX9的m RNA表達(dá)降低(P0.05)。[結(jié)論]Wnt3a可促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖,但抑制了骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的成軟骨分化。
【圖文】：

第24卷第2期2016年1月中國(guó)矯形外科雜志OrthopedicJournalofChinaVol.24，No.2Jan.2016圖1大鼠BMSCs細(xì)胞形態(tài)觀察(×100)，，a:培養(yǎng)第1d，b:第3代圖2WesternBlot鑒定轉(zhuǎn)染W(wǎng)nt3a及Mock的BMSCs圖3MTT法檢測(cè)過(guò)表達(dá)Wnt3a及Mock的BMSCs生長(zhǎng)曲線圖4甲苯胺藍(lán)染色觀察過(guò)表達(dá)Wnt3a及Mock的BMSCs成軟骨培養(yǎng)21d后情況(×40)157

第24卷第2期2016年1月中國(guó)矯形外科雜志OrthopedicJournalofChinaVol.24，No.2Jan.2016圖1大鼠BMSCs細(xì)胞形態(tài)觀察(×100)，a:培養(yǎng)第1d，b:第3代圖2WesternBlot鑒定轉(zhuǎn)染W(wǎng)nt3a及Mock的BMSCs圖3MTT法檢測(cè)過(guò)表達(dá)Wnt3a及Mock的BMSCs生長(zhǎng)曲線圖4甲苯胺藍(lán)染色觀察過(guò)表達(dá)Wnt3a及Mock的BMSCs成軟骨培養(yǎng)21d后情況(×40)157
【作者單位】： 解放軍總醫(yī)院骨科運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(編號(hào):81271983)
【分類(lèi)號(hào)】：R329

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本文編號(hào)：2531863