本文關(guān)鍵詞：p97在小鼠卵母細(xì)胞減數(shù)分裂成熟過程中作用的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：p97在動物體內(nèi)被稱為VCP(valosin-containing protein),在酵母內(nèi)稱為Cdc48p,秀麗隱桿線蟲中稱為CDC-48,這種蛋白質(zhì)在所有的真核細(xì)胞中是非常保守的一種蛋白,且這種蛋白對于釀酒酵母,黑腹果蠅、秀麗隱桿線蟲和小鼠的發(fā)育都是必須的。p97在細(xì)胞中的存在的量是巨大的,約占細(xì)胞內(nèi)總蛋白量的1%。p97是泛素化選擇分子伴侶,它的主要作用是打開折疊的蛋白質(zhì)及將特定蛋白質(zhì)復(fù)合物解聚,p97將ATP水解產(chǎn)生的化學(xué)能轉(zhuǎn)換成將目標(biāo)蛋白解聚和分離的機(jī)械能,p97在細(xì)胞的多種過程和活動中發(fā)揮重要色作用,例如:高爾基體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核膜的組裝,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)的降解(ERAD),泛素化蛋白酶降解途徑,細(xì)胞周期調(diào)節(jié),DNA修復(fù),阻滯多聚谷氨酸的聚合,自噬體的成熟,和線粒體自噬,。P97的功能的多樣性主要取決于它與不同的共因子和蛋白結(jié)合。有絲分裂中p97在DNA復(fù)制,極光激酶B定位,染色體分離,微管紡錘體的拆卸,核膜的重組。p97是一種多功能蛋白,且它的功能對于多種細(xì)胞,多種生物過程具有重要的作用,然而它對于卵母細(xì)胞減數(shù)分裂成熟過程中的作用還不是很清楚。我們的研究只在研究p97在卵母細(xì)胞減數(shù)分裂成熟過程中的作用。本研究的創(chuàng)新為應(yīng)用免疫熒光技術(shù)證實(shí)p97在小鼠卵母細(xì)胞減數(shù)分裂成熟過程中發(fā)揮重要的作用。目的:研究p97在小鼠卵母細(xì)胞減數(shù)分裂成熟過程中作用。方法：1.Western Blot測定p97的蛋白表達(dá)水平,免疫熒光染色進(jìn)行p97的各階段減數(shù)分裂卵母細(xì)胞內(nèi)定位,及對比分析對照空白組和經(jīng)p97的抑制劑DBe Q處理后的昆明白鼠的卵母細(xì)胞的減數(shù)分裂過程的進(jìn)展情況,檢測CDC25a和CDC25b在經(jīng)DBe Q處理后的卵母細(xì)胞中表達(dá)水平的變化。2.免疫熒光檢測經(jīng)DBe Q處理后的卵母細(xì)胞的染色體的分離情況,染色體鋪片后觀察經(jīng)DBe Q處理后的卵母細(xì)胞的染色體的結(jié)構(gòu)和數(shù)目的變化。結(jié)果:1.卵母細(xì)胞中p97功能受到抑制后導(dǎo)致卵母細(xì)胞GVBD受到抑制,且阻礙GVBD后卵母細(xì)胞的減數(shù)分裂的進(jìn)程使卵母細(xì)胞停滯于MI期和ATI期。2.卵母細(xì)胞中p97的功能抑制后細(xì)胞核內(nèi)的CDC25a,CDC25b的表達(dá)量下降。3.經(jīng)DBe Q處理后的MI和MII期的小鼠卵母細(xì)胞出現(xiàn)異常的染色質(zhì)的凝集,染色體的排列紊亂及染色體的不能正確分離。結(jié)論:1.p97參與小鼠的卵母細(xì)胞正常的減數(shù)分裂成熟過程的恢復(fù)。2.p97參與小鼠的卵母細(xì)胞GVBD后的減數(shù)分裂的進(jìn)程。3.p97參與小鼠的卵母細(xì)胞減數(shù)分裂過程中的染色體的凝集、排列和分離。
【關(guān)鍵詞】：卵母細(xì)胞 p97 減數(shù)分裂 免疫熒光 DBeQ
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R321
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 1 引言9-11
• 2 材料和方法11-15
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果15-22
• 4 討論22-26
• 5 結(jié)論26-27
• 參考文獻(xiàn)27-32
• 綜述32-44
• 參考文獻(xiàn)38-44
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果44-45
• 致謝45

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本文編號：251793