本文關(guān)鍵詞：巴馬小型豬皮膚瘢痕模型的建立及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子的表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：建立巴馬小型豬切割傷和燒燙傷皮膚增生性瘢痕模型,并在創(chuàng)傷愈合以及瘢痕形成的過(guò)程中檢測(cè)創(chuàng)面組織TGF-β1/TGF-β3的表達(dá)情況。評(píng)估該動(dòng)物模型對(duì)人類增生性瘢痕的模擬性。方法：取健康4月齡雌性巴馬小型豬6只,體重約為13±0.6kg。全身麻醉后在動(dòng)物背部制備創(chuàng)面,左側(cè)切除中厚皮片；右側(cè)利用特制溫控燙傷儀調(diào)至100℃,垂直緊壓皮膚20s制備燒傷創(chuàng)面,創(chuàng)面面積為3×3cm2,創(chuàng)面間隔為2cm。創(chuàng)傷制備后分籠飼養(yǎng),使創(chuàng)口自然愈合。觀察創(chuàng)面愈合情況,參照Nageschmidt法計(jì)算創(chuàng)面愈合率。創(chuàng)傷制備后24小時(shí)、7、14、21、28及56天隨機(jī)選取動(dòng)物,取創(chuàng)面組織標(biāo)本,HE染色觀察創(chuàng)傷愈合過(guò)程中組織學(xué)改變并測(cè)量組織厚度；Masson染色觀察創(chuàng)傷愈合過(guò)程中膠原纖維的形態(tài)及排列并測(cè)量膠原面密度。免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)創(chuàng)面愈合及瘢痕形成過(guò)程中創(chuàng)面組織的TGF-β1/TGF-β3蛋白表達(dá)情況。熒光定量RT-PCR檢測(cè)創(chuàng)面愈合及瘢痕形成過(guò)程中創(chuàng)面組織的TGF-β1/TGF-β3 mRNA表達(dá)情況。透射電鏡觀察對(duì)比動(dòng)物正常皮膚及創(chuàng)面制備后56天瘢痕組織中成纖維細(xì)胞和膠原纖維的差異。結(jié)果：1.創(chuàng)面制備后,切割傷表面滲血,燒燙傷創(chuàng)面可見散在水泡。創(chuàng)面制備后第28天創(chuàng)面顏色紅,質(zhì)地韌,切割傷創(chuàng)面愈合率達(dá)99.8%,燒燙傷創(chuàng)面愈合率達(dá)99.0%。創(chuàng)面制備后56天,創(chuàng)面中央可觸及增生性組織,質(zhì)地韌,無(wú)明顯毛發(fā)生長(zhǎng)。2、HE染色顯示,創(chuàng)面制備后7天,創(chuàng)面組織中的真皮乳突層可見炎細(xì)胞及成纖維細(xì)胞趨化且增多。創(chuàng)面制備后56天的瘢痕組織與正常皮膚相比,成纖維細(xì)胞與膠原纖維增多,·真皮乳頭消失。正常皮膚厚度約為1.298±0.305 mm,切割傷瘢痕組織厚度為3.039±0.169 mm,燒燙傷瘢痕組織厚度為4.023±0.176 mm。Masson染色可見在創(chuàng)傷愈合過(guò)程中創(chuàng)面組織的真皮乳突層可見大量較為纖細(xì)的膠原纖維,包繞成纖維細(xì)胞,網(wǎng)狀層中的膠原纖維粗大、排列緊密且紊亂。3.透射電鏡顯示,在瘢痕組織中成纖維細(xì)胞呈梭形,胞體增大,胞漿豐富,核仁較大,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)增多并擴(kuò)張；膠原纖維密度增加,排列緊密。3、免疫組織化學(xué)法：創(chuàng)面制備后7、14、21、28及56天創(chuàng)面組織與正常皮膚相比,TGF-β1及TGF-β3的表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);創(chuàng)面制備后7天TGF-β1陽(yáng)性表達(dá)最高(P0.05),創(chuàng)傷制備后21天TGF-β3陽(yáng)性表達(dá)最高(P0.05)。4、熒光定量RT-PCR:創(chuàng)面制備后7、14、21、28及56天組織與正常皮膚相比,TGF-β1及TGF-β3 mRNA的表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。創(chuàng)面制備后7天TGF-β1mRNA相對(duì)表達(dá)量最高(P0.05),創(chuàng)面制備后56天組織中TGF-β1的水平仍高于正常皮膚(P0.05)；創(chuàng)面制備后21天TGF-β3mRNA表達(dá)水平最高(P0.05),創(chuàng)面制備后56天瘢痕組織TGF-β3 mRNA其表達(dá)水平仍高于正常皮膚(P0.05)。結(jié)論：1.巴馬小型豬背部中厚皮片切割傷可使巴馬小型豬背部產(chǎn)生增生性瘢痕；特制溫控燙傷儀100℃,20s可致皮膚深Ⅱ度燒傷,使巴馬小型豬背部產(chǎn)生增生性瘢痕。其瘢痕的組織學(xué)特點(diǎn)與人類增生性瘢痕相似。2、TGF-β1/TGF-β3在瘢痕組織中的表達(dá)特點(diǎn)與人類增生性瘢痕相似,提示該瘢痕模型與人的增生性瘢痕具有相似性。
【關(guān)鍵詞】：皮膚 瘢痕 小型豬 動(dòng)物模型 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R622;R-332
【目錄】：

• 個(gè)人簡(jiǎn)歷3-5
• 英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 前言11-14
• 材料與方法14-23
• 結(jié)果23-48
• 討論48-52
• 全文總結(jié)52-53
• 參考文獻(xiàn)53-57
• 綜述57-67
• 參考文獻(xiàn)64-67
• 致謝67

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本文編號(hào)：251630