本文關(guān)鍵詞：急慢性應(yīng)激對小鼠空間學(xué)習(xí)記憶功能的影響及腦內(nèi)Wnt3a的表達(dá)，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的與方法:本研究急性應(yīng)激模型的建立是通過對小白鼠進(jìn)行足底電擊作為唯一應(yīng)激源;慢性應(yīng)激模型的建立是通過7種不同的應(yīng)激源(包括冰水游泳、通宵照明、斜籠擁擠、禁食、高臺、禁水、電擊,每天隨機從中選擇1種應(yīng)激方式,總共持續(xù)21天)。研究急性應(yīng)激作用和慢性應(yīng)激作用對小白鼠自發(fā)行為和空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響,以及腦內(nèi)Wnt3a和β-catenin表達(dá)的變化。實驗小白鼠的行為學(xué)觀察和檢測,以及空間學(xué)習(xí)記憶能力的檢測分別通過曠場實驗和Morris水迷宮實驗方法;通過HE染色技術(shù)和免疫組織化學(xué)染色技術(shù)檢測小白鼠腦內(nèi)各區(qū)的神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)及Wnt3a和β-cantenin的表達(dá)。研究結(jié)果:1.曠場實驗結(jié)果:急性應(yīng)激組小白鼠與對照組小白鼠相比,在急性應(yīng)激后立即,應(yīng)激組小白鼠直立次數(shù)和爬行格數(shù)均明顯提高,糞便粒數(shù)和中心格停留時間有明顯的減少,而修飾次數(shù)無明顯變化;在急性應(yīng)激停止后一周,兩組比較各項指標(biāo)無顯著差異。慢性應(yīng)激組小白鼠與對照組小白鼠相比,應(yīng)激組小白鼠的直立次數(shù)和爬行格數(shù)均顯著減少,而中心格停留時間顯著提高;而在慢性應(yīng)激停止后一周,兩組小白鼠的穿越格數(shù)、直立次數(shù)、修飾次數(shù)、糞便粒數(shù)都有顯著性差異,但中心格停留時間差異不顯著。2.Morris水迷宮實驗結(jié)果:急性應(yīng)激組小白鼠與對照組小白鼠相比,在定位航行實驗中,急性應(yīng)激實驗小白鼠搜尋平臺的逃避潛伏期明顯縮短;在空間搜索實驗中,急性應(yīng)激實驗小白鼠在目標(biāo)象限(即有平臺的象限)游泳時間明顯提高。急性應(yīng)激停止一周后的數(shù)據(jù)差異不顯著。慢性應(yīng)激組小白鼠與對照組小白鼠相比,在定位航行試驗中,慢性應(yīng)激實驗小白鼠尋找平臺的逃避潛伏期明顯提高。慢性應(yīng)激停止后一周,除了在第二周期有明顯差異,其他三個周期差異不明顯。空間搜索實驗中,應(yīng)激組小白鼠在目標(biāo)象限的游泳時間明顯減少;慢性應(yīng)激停止后一周差異不明顯。3.HE染色實驗結(jié)果:急性應(yīng)激組小白鼠與對照組小白鼠相比,神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)無明顯變化;一周后差異不明顯。而慢性應(yīng)激組小白鼠與對照組小白鼠相比,海馬和前腦皮層的神經(jīng)元數(shù)目變化較明顯,細(xì)胞著色顏色淺,并且染色不均勻,細(xì)胞發(fā)生萎縮變形,出現(xiàn)了不同程度的損傷情況;應(yīng)激停止后一周有所恢復(fù)。4.免疫組化實驗結(jié)果:急性應(yīng)激組小白鼠和對照組小白鼠,在應(yīng)激后立即和應(yīng)激后一周,海馬各區(qū)均未見明顯的Wnt3a和β-catenin陽性細(xì)胞表達(dá),且差異不明顯,平均目標(biāo)灰度值差異也不明顯;而在前腦皮層中,均可見Wnt3a和β-catenin陽性細(xì)胞明顯表達(dá)。應(yīng)激組小白鼠與對照組比較,在急性應(yīng)激后立即,前腦皮層Wnt3a和β-catenin陽性細(xì)胞數(shù)增多且差異顯著,應(yīng)激后一周差異不顯著。慢性應(yīng)激中,在應(yīng)激后立即和應(yīng)激后一周,應(yīng)激組和對照組小白鼠海馬各區(qū)均未見Wnt3a和β-catenin陽性細(xì)胞明顯表達(dá);而在前腦皮層中,均可見Wnt3a和β-catenin陽性細(xì)胞表達(dá),與對照組小白鼠比較,應(yīng)激組小白鼠Wnt3a陽性細(xì)胞數(shù)表達(dá)明顯較少,β-catenin也明顯減少。研究結(jié)論:1.急性應(yīng)激作用使小白鼠的曠場行為增強,空間學(xué)習(xí)記憶能力增強;而慢性應(yīng)激作用使小白鼠的曠場行為下降,明顯損傷實驗小白鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力。2.急性應(yīng)激作用對小白鼠的神經(jīng)元形態(tài)結(jié)構(gòu)無明顯影響;慢性應(yīng)激作用則會導(dǎo)致小白鼠海馬和前腦皮層神經(jīng)元形態(tài)發(fā)生變化。3.急性應(yīng)激和慢性應(yīng)激作用中,在小白鼠海馬均未見Wnt3a和β-catenin明顯表達(dá);而急性應(yīng)激作用導(dǎo)致小白鼠前腦皮層Wnt3a和β-catenin表達(dá)顯著上調(diào),慢性應(yīng)激作用導(dǎo)致小白鼠前腦皮層Wnt3a和β-catenin表達(dá)下調(diào)顯著。4.應(yīng)激后小白鼠行為和學(xué)習(xí)記憶能力的變化可能與前腦皮層Wnt3a的表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：急性應(yīng)激 慢性應(yīng)激 曠場行為 空間學(xué)習(xí)記憶 Wnt3a β-catenin 海馬 前腦皮層
【學(xué)位授予單位】：曲阜師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R338.64
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-7
• 英文縮略詞7-11
• 第一部分 文獻(xiàn)綜述 急慢性應(yīng)激作用對動物學(xué)習(xí)記憶功能的影響及其機制的研究進(jìn)展11-18
• 1.急性應(yīng)激作用和慢性應(yīng)激作用對動物機體的影響11-13
• 1.1 應(yīng)激源和應(yīng)激反應(yīng)11-12
• 1.2 涉及應(yīng)激反應(yīng)的腦區(qū)12-13
• 1.2.1 前腦皮層12
• 1.2.2 海馬12-13
• 2.學(xué)習(xí)記憶功能的研究進(jìn)展13-17
• 2.1 學(xué)習(xí)記憶的神經(jīng)生物學(xué)機制13
• 2.2 涉及學(xué)習(xí)記憶的腦區(qū)13-15
• 2.2.1 前腦皮層13-14
• 2.2.2 海馬14
• 2.2.3 紋狀體邊緣區(qū)14
• 2.2.4 嗅皮層14-15
• 2.3 Wnt在學(xué)習(xí)記憶中的作用15-17
• 2.3.1 Wnt的生物學(xué)特性15
• 2.3.2 Wnt在神經(jīng)發(fā)生中的作用15
• 2.3.3 Wnt其他作用15-16
• 2.3.4 Wnt3a與學(xué)習(xí)記憶的關(guān)系16
• 2.3.5 β-catenin與經(jīng)典信號通路16-17
• 3.本實驗研究的目的意義17-18
• 第二部分 實驗研究18-42
• 一.急性應(yīng)激作用對小鼠空間學(xué)習(xí)記憶的影響及腦內(nèi)Wnt3a表達(dá)18-32
• 1.前言18
• 2.實驗材料和實驗方法18-24
• 2.1 實驗材料18-19
• 2.1.1 實驗動物18-19
• 2.1.2 實驗藥品試劑19
• 2.1.3 實驗儀器19
• 2.2 實驗方法19-20
• 2.2.1 動物分組19
• 2.2.2 急性應(yīng)激動物模型建立19-20
• 2.3 小白鼠行為學(xué)檢測20-21
• 2.3.1 曠場(Open field)行為20
• 2.3.2 Morris水迷宮實驗測定學(xué)習(xí)記憶能力20-21
• 2.4 不同腦區(qū)神經(jīng)元形態(tài)學(xué)觀察以及其Wnt3a和 β-catenin的表達(dá)21-24
• 2.4.1 取腦21-22
• 2.4.2 HE染色22
• 2.4.3 免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry)染色22-24
• 2.4.4 圖像分析24
• 2.5 統(tǒng)計學(xué)處理24
• 3.實驗結(jié)果24-30
• 3.1 急性應(yīng)激作用對小白鼠曠場行為的結(jié)果24-25
• 3.2 急性應(yīng)激作用對小白鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響25-28
• 3.2.1 急性應(yīng)激作用對小白鼠定位航行學(xué)習(xí)能力的影響25-26
• 3.2.2 急性應(yīng)激作用對小鼠空間搜索能力的影響26-28
• 3.3. 急性應(yīng)激作用對小白鼠各腦區(qū)神經(jīng)元形態(tài)的影響28
• 3.4. 急性應(yīng)激作用對小白鼠各腦區(qū)Wnt3a表達(dá)的影響28-29
• 3.5 急性應(yīng)激作用對小白鼠各腦區(qū) β-catenin表達(dá)的影響29-30
• 4.討論30-32
• 二、慢性應(yīng)激作用對小白鼠空間學(xué)習(xí)記憶的影響及腦內(nèi)Wnt3a的表達(dá)32-42
• 1 前言32
• 2.實驗材料和實驗方法32-33
• 2.1 實驗材料32
• 2.1.1 實驗動物32
• 2.1.2 實驗試劑32
• 2.1.3 實驗儀器32
• 2.2 實驗方法32-33
• 2.2.1 動物分組32
• 2.2.2 建立慢性應(yīng)激動物模型32-33
• 2.3 小白鼠行為學(xué)檢測33
• 2.3.1 曠場(Open field)行為33
• 2.3.2 Morris水迷宮學(xué)習(xí)記憶能力檢驗33
• 2.4 不同腦區(qū)神經(jīng)元形態(tài)學(xué)的觀察及Wnt3a及 β-catenin的表達(dá)33
• 2.4.1 取腦33
• 2.4.2 HE染色33
• 2.4.3 免疫組織化學(xué)33
• 2.4.4 圖像分析33
• 2.5 統(tǒng)計學(xué)處理33
• 3.結(jié)果33-40
• 3.1 慢性應(yīng)激作用對小鼠體重的影響33-34
• 3.2 慢性應(yīng)激作用對小白鼠曠場行為的影響34
• 3.3 慢性應(yīng)激作用對小白鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響34-38
• 3.3.1 慢性應(yīng)激作用對小白鼠定位航行學(xué)習(xí)能力的影響34-36
• 3.3.2 慢性應(yīng)激作用對小白鼠空間搜索能力的影響36-38
• 3.4 慢性應(yīng)激作用對小白鼠各腦區(qū)神經(jīng)元形態(tài)的影響38
• 3.5 慢性應(yīng)激作用對小白鼠各腦區(qū)Wnt3a表達(dá)的影響38-39
• 3.6 慢性應(yīng)激作用對小白鼠各腦區(qū) β-catenin表達(dá)的影響39-40
• 4.討論40-42
• 結(jié)論42-43
• 附圖43-49
• 參考文獻(xiàn)49-56
• 在校期間的研究成果及發(fā)表的學(xué)術(shù)論文56-57
• 致謝57

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本文編號：251333