【摘要】：目的制備新城疫病毒(NDV)核蛋白(NP)的單克隆抗體(單抗),并用于建立一種可定量檢測NDV病毒含量的雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測方法(NDV NP ELISA)。方法基于NDV病毒株F48E9獲得NP基因,經(jīng)原核表達(dá)方式制備出重組抗原rNP;免疫小鼠制備NDV NP特異性單抗;單抗經(jīng)HRP標(biāo)記和配對篩選,建立NDV NP ELISA,分析其特異性、靈敏度、精密度、準(zhǔn)確度和檢測線性,并分析本方法定量檢測的NP含量與PFU病毒滴度的定量相關(guān)性。結(jié)果建立基于單抗3C10和4E7的NDV NP ELISA,其定量檢測NDV rNP的最佳線性范圍為0.015~0.250μg/ml(R2=0.9974),回收率在88.4%~106.01%,變異系數(shù)小于3.4%;該方法具有良好特異性;該方法定量檢測NDV抗原含量與PFU病毒感染滴度有較好的相關(guān)性(R2=0.9209)。結(jié)論建立NDV NP ELISA,可準(zhǔn)確定量檢測NDV病毒中的NP抗原含量,為NDV病毒含量的測定提供一種可靠簡便的分析方法。
[Abstract]:......
【作者單位】： 廈門大學(xué)國家傳染病診斷試劑與疫苗工程技術(shù)研究中心生命科學(xué)學(xué)院;廈門大學(xué)分子疫苗學(xué)與分子診斷學(xué)國家重點實驗室公共衛(wèi)生學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31670934):基于廣譜中和單抗的通用型流感疫苗設(shè)計及其結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)研究~~
【分類號】：R392-33

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本文編號：2469979