【摘要】：[背景]：膽汁酸由膽固醇轉(zhuǎn)化而來,具有調(diào)節(jié)膽固醇代謝、促進脂類的消化和吸收、防止膽石形成等重要作用,同時也具有一定的細胞毒性。胎兒肝臟在妊娠中期就能夠合成膽汁酸,但缺乏代謝能力。胎盤在母胎間膽汁酸轉(zhuǎn)運中發(fā)揮了重要作用。有機陰離子轉(zhuǎn)運體OATPs在人類目前共有11個亞家族被確認(rèn)。多項研究表明胎盤中OATPs參與了母胎間膽汁酸的轉(zhuǎn)運,而其中OATP1B3可能在胎盤滋養(yǎng)層細胞的轉(zhuǎn)運功能上發(fā)揮主要作用。 [目的]：研究胎盤OATP1B3對兩種膽汁酸的轉(zhuǎn)運作用,為ICP對胎兒危害機制探討、降低胎兒風(fēng)險及新靶向藥物的研發(fā)提供潛在策略。 [方法]：用慢病毒載體介導(dǎo)的RNAi技術(shù)沉默OATP1B3的表達,用Real-time PCR和Western blot檢測干擾效率；用MTT法檢測兩種膽汁酸對細胞的毒性作用；將正常的和干擾后的Swan細胞分別構(gòu)建體外單層滋養(yǎng)細胞屏障模型,運用高效液相色譜技術(shù)檢測兩種膽汁酸轉(zhuǎn)運情況。 [結(jié)果]：(1)MTT法：GCA、GCDCA以10μmol/L、20μmol/L濃度作用24h對細胞無明顯毒性作用(P0.05)；(2)慢病毒載體介導(dǎo)的RNAi:a. Real-time PCR檢測干擾后mRNA表達下降了94.42%(P0.05)；b.Western blot檢測干擾后蛋白表達下降了49.51%(P0.05)；(3)成功構(gòu)建體外單層滋養(yǎng)細胞屏障模型：平臺期TEER值為31.90±1.47Ω；(4)膽汁酸底物轉(zhuǎn)運檢測：正常組、陰性對照組、實驗組轉(zhuǎn)運曲線形態(tài)基本一致,均與空白組不同,實驗組對GCA、GCDCA轉(zhuǎn)運量明顯低于正常組和陰性對照組。在頂端側(cè)加入起始濃度的GCA/GCDCA,隨著時間變化,GCA/GCDCA逐漸從頂端側(cè)被轉(zhuǎn)運至底端側(cè),當(dāng)?shù)锥藗?cè)的GCA/GCDCA濃度高于頂端側(cè)時呈現(xiàn)相反方向的轉(zhuǎn)運。 [結(jié)論]：(1)GCA、 GCDCA在20μmol/L以下濃度24h內(nèi)對Swan細胞沒有明顯的毒性作用。(2)OATP1B3shRNA慢病毒介導(dǎo)的RNAi能特異性抑制Swan細胞OATP1B3mRNA和蛋白水平的表達。(3).人胎盤滋養(yǎng)細胞系中OATP1B3對GCA、GCDCA的轉(zhuǎn)運發(fā)揮重要作用。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號】：R321

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉艷霞;IGF-1對胎盤產(chǎn)生前列腺素類化合物的效應(yīng)[J];國外醫(yī)學(xué).婦產(chǎn)科學(xué)分冊;1994年03期

2 李笑天;胎兒血流速度波形的血液動力學(xué)機制研究進展[J];國外醫(yī)學(xué).婦產(chǎn)科學(xué)分冊;1996年01期

3 孫愛龍,莊蘇星,彭士明;胎盤中人絨毛膜促性腺激素的提取[J];鎮(zhèn)江醫(yī)學(xué)院學(xué)報;1997年04期

4 Alirahima ,Neville W.Bruce;鼠交配前、后單側(cè)卵巢切除對胎兒及胎盤發(fā)育的影響[J];解剖學(xué)研究;1989年02期

5 姚楠;;胎盤口服液的制備和質(zhì)量控制[J];中成藥;1989年04期

6 郭瑞娣,江夕夫;人胎盤中微量鉛的測定[J];衛(wèi)生研究;1990年05期

7 喻凱,童夙明;鉛對孕鼠腦垂體—卵巢—胎盤軸及人絨毛毒性作用的研究[J];環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué);1992年02期

8 曹珍修;產(chǎn)后出血防治進展[J];重慶醫(yī)學(xué);1992年01期

9 劉伯寧，，陶雯琪，徐元鼎;應(yīng)用圖像分析儀對正常足月胎盤不同層次內(nèi)絨毛的體規(guī)學(xué)研究[J];上海醫(yī)學(xué);1994年01期

10 楊秦榮,張明惠,陳國娣;羊水過多并胎盤畸胎瘤1例[J];陜西醫(yī)學(xué)雜志;1994年11期

相關(guān)會議論文 前10條

1 蘇立杰;趙書紅;朱猛進;黃江南;余梅;;應(yīng)用Exiqon芯片分離大白豬33天和90天胎盤差異表達microRNA[A];中國動物遺傳育種研究進展——第十五次全國動物遺傳育種學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2009年

2 夏紅飛;郝艷紅;彭景ii;;妊娠大鼠子宮和胎盤IL-1β表達及IFN-γ對其表達的影響[A];第九次全國生殖生物學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文摘要集[C];2003年

3 汪暉;;外源物致宮內(nèi)發(fā)育遲緩的胎腎上腺內(nèi)分泌功能干預(yù)機制[A];2007年全國藥物毒理學(xué)會議論文集[C];2007年

4 黃江南;趙書紅;朱猛進;張總平;余梅;;豬ISG15基因在子宮內(nèi)膜組織中的表達以及與繁殖性狀的關(guān)聯(lián)分析的研究[A];中國動物遺傳育種研究進展——第十五次全國動物遺傳育種學(xué)術(shù)討論會論文集[C];2009年

5 侯月;倪鑫;;雌激素及其受體拮抗劑對胎盤CRH基因表達調(diào)節(jié)作用的分子機制[A];中國生理學(xué)會第21屆全國代表大會暨學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2002年

6 張毅;李長東;江小霞;劉元林;張雙喜;吳英;唐佩弦;毛寧;;胎盤間充質(zhì)干細胞的分離及對臍血CD_(34)~+細胞的體外擴增作用[A];第九屆全國實驗血液學(xué)會議論文摘要匯編[C];2003年

7 梁興通;葉愛蓮;;胎盤早期剝離的超聲診斷和鑒別診斷[A];慶祝中國超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會成立20周年——第八屆全國超聲醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

8 劉劍洪;;植入性胎盤6例臨床分析[A];第八次全國婦產(chǎn)科學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

9 劉建;黃建容;常淑芳;;FXR在ICP胎盤膽酸轉(zhuǎn)運中的作用機制研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第五次全國圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2005年

10 劉錫梅;尉紅;;LBWF的胎盤病理改變及胎盤EGFR免疫組化分析[A];第八次全國婦產(chǎn)科學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2004年

相關(guān)重要報紙文章 前10條

1 本報記者 薛慶元;產(chǎn)婦胎盤成了醫(yī)院的“產(chǎn)品”[N];中國消費者報;2004年

2 明晃;胎盤不可當(dāng)補品吃[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2007年

3 王小溪;胎盤不可濫服[N];衛(wèi)生與生活報;2008年

4 陸基宗;別盲目食用胎盤[N];中國中醫(yī)藥報;2006年

5 楊鋒;胎盤——胎兒的“全職保姆”[N];中國醫(yī)藥報;2002年

6 ;胎盤交易有禁不止 部分醫(yī)院依然私下買賣胎盤[N];中國中醫(yī)藥報;2005年

7 王凡;世界罕見：異卵雙胞胎共用胎盤[N];中國醫(yī)藥報;2004年

8 ;男人吃胎盤越吃越雌性[N];保健時報;2005年

9 本報記者　李曉宏;產(chǎn)婦胎盤流向何處[N];人民日報;2005年

10 鄧?yán)碛?盲目食用胎盤會致病[N];中國中醫(yī)藥報;2001年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉智;計算機輔助分析胎盤超聲圖像及臍血流信號的實驗與臨床研究[D];復(fù)旦大學(xué);2003年

2 胡曉;雌激素受體α對小鼠實驗性自身免疫性腦脊髓炎的抑制作用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2011年

3 陳春經(jīng);慢病毒載體介導(dǎo)胰島素樣生長因子-1基因修飾肌源性干細胞移植治療雌性壓力性尿失禁大鼠的實驗研究[D];福建醫(yī)科大學(xué);2012年

4 范小斌;缺氧誘導(dǎo)因子2在生理妊娠和妊高征胎盤中的表達及其意義[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

5 周建松;HPV16E6/E7共同啟動子shRNA慢病毒的構(gòu)建及其對宮頸癌細胞株抑制作用的體內(nèi)外研究[D];浙江大學(xué);2012年

6 李東紅;妊高征患者胎盤組織差異表達基因的篩選與確定[D];中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);2003年

7 曹寶花;膜聯(lián)蛋白V和Fcγ受體Ⅲ在胎盤的分布及其與HBV宮內(nèi)感染關(guān)系的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

8 周曉東;胎盤基質(zhì)干細胞骨向分化及生物反應(yīng)器構(gòu)建骨組織的修復(fù)效果[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2005年

9 楊鋼;PGHS-2在胎盤、絨毛膜、羊膜、蛻膜的表達及分娩前后的變化[D];四川大學(xué);2005年

10 陸琰;四種方案誘導(dǎo)人胎盤間充質(zhì)干細胞向胰島β樣細胞分化[D];暨南大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 閆咨儒;胎盤OATP1B3對兩種膽汁酸轉(zhuǎn)運特征的研究[D];浙江大學(xué);2012年

2 王朕華;妊高征患者胎盤中NPY和cFN的表達及血漿中NPY變化的研究[D];鄭州大學(xué);2002年

3 常文輝;妊娠早期、中期胎盤及引產(chǎn)胎兒HBV感染狀況的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

4 趙彩珍;妊娠高血壓綜合征胎盤的體視學(xué)研究[D];江西醫(yī)學(xué)院;2000年

5 侯磊;妊高征胎盤HGF及其受體c-met表達的研究[D];鄭州大學(xué);2003年

6 黃彥霞;妊高征患者血中AdM、Hcy、NO的水平及胎盤形態(tài)學(xué)變化的研究[D];鄭州大學(xué);2002年

7 王志堅;VCAM-1和MMP-9在妊高征合并胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩患者胎盤中的表達及意義[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2002年

8 焦蕊麗;體外受精-胚胎移植足月妊娠胎盤中表皮生長因子受體的表達及其形態(tài)學(xué)變化[D];河北醫(yī)科大學(xué);2004年

9 董黎;妊高征胎盤LN、IL-10及TNF-a表達的研究[D];鄭州大學(xué);2004年

10 董e

本文編號：2465041