【摘要】：本文研究了絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPKs)信號(hào)通路在組蛋白去乙�；敢种苿�(histone deacetylase inhibitors,HDACis)曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)抑制間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)C3H10T1/2成脂分化中的調(diào)節(jié)機(jī)制.首先利用MTT法檢測(cè)TSA對(duì)其增殖活性的影響;Western印跡法首先檢測(cè)MAPKs信號(hào)通路中pERK和p-p38蛋白在間充質(zhì)干細(xì)胞C3H10T1/2成脂分化過(guò)程中的表達(dá)情況,以及不同濃度、不同時(shí)間TSA處理對(duì)pERK和p-p38蛋白差異變化情況;其次再用Western印跡檢測(cè)TSA對(duì)成脂分化過(guò)程中間充質(zhì)干細(xì)胞pERK和p-p38蛋白表達(dá)的影響.MTT結(jié)果顯示,TSA濃度在1 nmol/L～100 nmol/L范圍內(nèi)抑制C3H10T1/2細(xì)胞的增殖活性,且TSA濃度約為60 nmol/L時(shí)即抑制一半以上的C3H10T1/2細(xì)胞增殖活性.Western印跡結(jié)果顯示,TSA處理5 min～80 min,及濃度在1 nmol/L～100 nmol/L范圍內(nèi)激活MAPK信號(hào)通路中pERK和p-p38蛋白的表達(dá);C3H10T1/2細(xì)胞成脂分化過(guò)程中,胞內(nèi)pERK和p-p38蛋白的表達(dá)呈現(xiàn)下調(diào)趨勢(shì);而TSA抑制了成脂分化過(guò)程中C3H10T1/2細(xì)胞內(nèi)pERK和p-p38蛋白的表達(dá)變化.本研究結(jié)果提示,在C3H10T1/2細(xì)胞成脂分化過(guò)程中,MAPK信號(hào)途徑分子pERK和p-p38表達(dá)下調(diào);TSA可能是通過(guò)活化pERK和p-p38進(jìn)而抑制間充質(zhì)干細(xì)胞C3H10T1/2成脂分化.
[Abstract]:In this study, we studied the inhibitory effect of mitogen-activated protein kinase (mitogen activated protein kinases,MAPKs) signaling pathway on (mesenchymal stem cells, of mesenchymal stem cells by histone deacetylase inhibitor (histone deacetylase inhibitors,HDACis (A (trichostatin A, TSA). The regulatory mechanism of MSCs) C3H10T1/2 in adipogenic differentiation. Firstly, MTT method was used to detect the effect of TSA on its proliferative activity. Western blot was used to detect the expression of pERK and p-p38 proteins in MAPKs signaling pathway during adipogenic differentiation of mesenchymal stem cells (C3H10T1/2), and the difference of pERK and p-p38 proteins treated with TSA at different concentration and time. Secondly, the effect of TSA on the expression of pERK and p-p38 protein in mesenchymal stem cells during adipogenic differentiation was detected by Western blot. The results showed that the concentration of TSA inhibited the proliferation of C3H10T1/2 cells in the range of 1 nmol/L~100 nmol/L. When the concentration of TSA was about 60 nmol/L, the proliferation activity of C3H10T1/2 cells was inhibited by more than half. Western blot results showed that TSA treated 5 min~80 min,. And the expression of pERK and p-p38 proteins in the MAPK signaling pathway was activated in the range of 1 nmol/L~100 nmol/L. The expression of pERK and p-p38 proteins in C3H10T1/2 cells was down-regulated during adipogenic differentiation, while TSA inhibited the expression of pERK and p-p38 proteins in C3H10T1/2 cells during adipogenic differentiation. These results suggest that the expression of MAPK signal pathway molecules pERK and p-p38 is down-regulated in the process of adipogenic differentiation of C3H10T1/2 cells, and TSA may inhibit the adipogenic differentiation of mesenchymal stem cells C3H10T1/2 by activating pERK and p-p38.
【作者單位】： 暨南大學(xué)生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院組織移植與免疫實(shí)驗(yàn)中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.30600587,No.30900563,No.81071483) 中央高�；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專(zhuān)項(xiàng)資金項(xiàng)目 江蘇省教育廳自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.10KJB180006)~~
【分類(lèi)號(hào)】：R329

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本文編號(hào)：2455592