【摘要】：目的:探討卡介苗(BCG)與ESAT-6激活的人外周血γδT細胞是否具有抗原提呈細胞的表型和功能。方法:用Ficoll密度梯度離心法分離人外周血單個核細胞(PBMC)后,經(jīng)尼龍毛柱法分離獲得T細胞。將T細胞分別用卡介苗與ESAT-6刺激擴增γδT細胞后用流式細胞儀分選純化γδT細胞,并檢測其抗原提呈細胞表型。PBMC用貼壁法制備單核細胞后,誘導培養(yǎng)分化為成熟DC細胞,用流式細胞儀檢測其成熟程度。T細胞用CFSE標記后分別按四種方法培養(yǎng):①與結核分枝桿菌分泌性抗原(Mtb-Sag)共同培養(yǎng);②與Mtb-Sag孵育2小時后的卡介苗激活的γδT細胞共同培養(yǎng);③與Mtb-Sag孵育2小時后的ESAT-6激活的γδT細胞共同培養(yǎng);④與Mtb-Sag孵育2小時后的成熟DC細胞共同培養(yǎng);培養(yǎng)后檢測T細胞及CD4+T細胞的增殖情況。結果:卡介苗與ESAT-6激活的γδT細胞CD80、CD86、HLA-DR的表達水平都增加,且后者顯著高于前者�？ń槊缗cESAT-6激活的γδT細胞培養(yǎng)組的T細胞增殖總數(shù)及CD4+T細胞的增殖有所增加;而后者顯著高于前者,與成熟DC細胞培養(yǎng)組的增殖情況相似。結論:用卡介苗與ESAT-6激活的人外周血γδT細胞都具有抗原提呈細胞的表型和抗原提呈作用;但后者顯著高于前者。
[Abstract]:Aim: to investigate the phenotype and function of antigen presenting cells in human peripheral blood 緯 未 T cells activated by BCG (BCG) and ESAT-6. Methods: human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were isolated by Ficoll density gradient centrifugation and T cells were isolated by nylon hair column method. 緯 未 T cells were isolated and purified by flow cytometry after stimulated by BCG and ESAT-6 respectively, and their phenotypes of antigen presenting cells were detected. After monocytes were prepared by adherent method, the cells were induced to differentiate into mature DC cells, and the differentiation of 緯 未 T cells into mature 緯 未 T cells was observed by flow cytometry, and the differentiation of 緯 未 T cells into mature PBMCs was observed. The mature degree of T cells was detected by flow cytometry. The T cells were cultured in four ways: 1) co-culture with Mycobacterium tuberculosis secretory antigen (Mtb-Sag); (2) 緯 未 T cells activated by BCG were co-cultured with Mtb-Sag for 2 hours, 緯 未 T cells activated by ESAT-6 were co-cultured with Mtb-Sag for 2 hours, and mature DC cells were incubated with Mtb-Sag for 2 hours. The proliferation of T cells and CD4 T cells was detected after culture. Results: both BCG and ESAT-6-activated 緯 未 T cells increased the expression of CD80,CD86,HLA-DR, and the latter was significantly higher than that of the former. The total proliferation of T cells and the proliferation of CD4 T cells were increased in BCG and ESAT-6 activated 緯 未 T cell culture groups, while the proliferation of CD4 T cells in the latter group was significantly higher than that in the mature DC cell culture group, which was similar to that of mature BCG T cell culture group. Conclusion: both BCG-activated 緯 未 T cells and ESAT-6-activated human peripheral blood 緯 未 T cells have the phenotypic and antigen presenting effects of antigen presenting cells, but the latter is significantly higher than the former.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院呼吸內科;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No.30872261)
【分類號】：R392

【參考文獻】

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3 賈平;杜先智;;esat6基因表達載體的構建及其在戈登鏈球菌中的表達[J];微生物學通報;2009年03期

【共引文獻】

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3 蔣暉;徐強;楊超;曹貞國;李朝旭;葉招明;;γδT細胞經(jīng)唑來膦酸刺激后對骨肉瘤細胞的殺傷作用[J];細胞與分子免疫學雜志;2010年12期

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2 趙溫利,田志剛,李柏青;γδT細胞與腫瘤免疫[J];國外醫(yī)學(腫瘤學分冊);1997年03期

3 陳 勇,胡建國,呂合作,侯彥強,張海峰,李柏青,何海輝;可激活人γδT細胞的結核桿菌耐熱多肽抗原的初步純化與活性鑒定[J];免疫學雜志;2002年03期

4 毛啟龍,馮修光,昌增益;結核桿菌小分子熱休克蛋白Hsp16.3的高效自發(fā)再折疊和再組裝[J];生物化學與生物物理進展;2002年01期

5 歐陽為明,金伯泉,張峗,劉雪松,李琦,夏海濱;9.1C3分子對人NK細胞和T細胞細胞毒作用的抑制效應[J];細胞與分子免疫學雜志;2000年02期

6 吳俊英,李柏青,張學光;APC在結核桿菌低分子多肽抗原體外激活人外周血γ~(δ+)T細胞中的作用[J];細胞與分子免疫學雜志;2001年05期

7 薛江楠,歐陽為明,賈衛(wèi),張新海,謝鑫,曹云新,寧雙飛,李琦,金伯泉;9.1C3/LAIR-1的真核表達、純化及單克隆抗體的制備和鑒定[J];細胞與分子免疫學雜志;2002年06期

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9 陳勇,呂合作,胡建國,李柏青;刺激人γδT細胞增殖的結核桿菌多肽抗原的生物學特性分析[J];細胞與分子免疫學雜志;2003年02期

10 何維;γδT細胞的抗原識別機制[J];中國免疫學雜志;1999年10期

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6 王莉芳 楊建輝;碌曲婦幼保健站創(chuàng)先爭優(yōu)活動有聲色[N];甘南日報(漢文版);2010年

7 黃梅縣疾控中心黨支部;以黨建助推省級文明疾控中心創(chuàng)建[N];黃岡日報;2010年

8 王莉芳 楊建輝;碌曲婦幼保健站創(chuàng)先爭優(yōu)活動有聲色[N];甘南日報(漢文版);2010年

9 黃梅縣疾控中心黨支部;以黨建助推省級文明疾控中心創(chuàng)建[N];黃岡日報;2010年

10 王莉芳 楊建輝;碌曲婦幼保健站創(chuàng)先爭優(yōu)活動有聲色[N];甘南日報(漢文版);2010年

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