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纖維蛋白膠攜載的粒細胞集落刺激因子促進大鼠缺血后肢血管再生的作用

發(fā)布時間:2019-02-22 14:16
【摘要】:目的:研究肌注纖維蛋白膠攜載的粒細胞集落刺激因子(Gel+G-CSF)對大鼠外周血白細胞總數(shù)和缺血下肢血管再生的影響。 材料與方法: 1、于EP管中將纖維蛋白膠主體(加入了G-CSF)和催化劑混合制成凝膠塊,加入PBS液,于37℃下恒溫孵育。分別于24、48、72、96h各時間點用ELISA試劑盒檢測PBS釋放液中G-CSF濃度,計算G-CSF的累積釋放率。 2、雄性SD大鼠30只,制成大鼠后肢缺血模型,成模后隨機分3組:Gel+G-CSF組(n=10)、G-CSF組(n=10)和PBS組(n=10),分別肌肉注射Gel+G-CSF、G-CSF和PBS。于造模術前及術后第1、3、5、7天計數(shù)外周血白細胞總數(shù),于造模后的第1周和第4周每組分別處死5只大鼠,取肌組織冰凍切片行堿性磷酸酶染色、蘇術素染色、 α-SMA和VEGF免疫組化染色,觀察毛細血管、細胞浸潤情況、α-SMA陽性血管和VEGF表達情況;計數(shù)毛細血管和α-SMA陽性血管密度。 結果: 1、Gel+G-CSF體外釋放情況:Gel+G-CSF在24h、48h和72h的累計釋放率約52.5±4.50%、76.3±4.47%、87.9±4.38%,Gel+G-CSF在72h內(nèi)逐漸緩釋出大部分的G-CSF。 2、外周血白細胞數(shù)的變化:Gel+G-CSF組外周血白細胞總數(shù)在術后第1天達峰值(14.69±1.11×109/L)且明顯低于G-CSF組在術后第3天達到的峰值(21.00±2.26×109/L)。 3、促血管再生作用:Gel+G-CSF組(686±108/mm2)的毛細血管密度明顯高于G-CSF組(491±110/mm2)和PBS組(252±78/mm2),P0.05。Gel+G-CSF組(6.1±0.8/mm2)的α-SMA陽性血管密度明顯高于PBS組(2.6±1.3/mm2),P0.05。 4、促細胞浸潤及VEGF表達作用:Gel+G-CSF組肌組織內(nèi)浸潤的細胞數(shù)和VEGF表達細胞數(shù)明顯高于G-CSF組和PBS組。 結論: Gel+G-CSF可以促進大鼠缺血后肢肌組織細胞的浸潤,,并使其活化分泌VEGF來促進血管再生。肌注Gel+G-CSF與肌注G-CSF相比,其血管再生作用強,而外周血白細胞數(shù)升高的副作用小。
[Abstract]:Aim: to study the effects of intramuscular injection of granulocyte colony-stimulating factor (Gel G-CSF) loaded with fibrin glue on the total number of leukocytes in peripheral blood and vascular regeneration of ischemic lower extremity in rats. Materials and methods: 1. The fibrin glue (G-CSF) was mixed with catalyst in EP tube to form gel block, then PBS solution was added, and incubated at 37 鈩

本文編號:2428308

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