【摘要】：目的:應(yīng)用低鉀飼料致家兔低血鉀模型,測(cè)定家兔血漿鉀離子濃度,以觀察低鉀程度,同時(shí)觀察骨骼肌組織鉀離子,鈉離子,鎂離子含量,細(xì)胞膜上Na,K-ATP酶活性及α1α2亞型的表達(dá)情況,探究缺鉀時(shí)家兔血漿鉀,骨骼肌組織內(nèi)鉀離子含量的變化規(guī)律,并初步探討其變化的機(jī)制。 方法:清潔級(jí)健康家兔48只,體重2.0~2.7kg、兔齡12~14周,雄性(河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供),隨機(jī)分為6組,每組8只,按低鉀飼喂的時(shí)間分為正常對(duì)照組(A組)、低鉀飲食3天組(B組)、低鉀飲食6天組(C組)、低鉀飲食9天組(D組)、低鉀飲食12天組(E組)、低鉀飲食15天組(F組)。家兔購(gòu)入后先放置于安靜、舒適的環(huán)境中,正常飼喂一周后開(kāi)始用家兔低鉀飼料飼喂,低鉀飲食期間自由攝取蒸餾水。以低鉀飲食開(kāi)始前當(dāng)天作為第0天,低鉀飲食后第1天作為第1天,依次類(lèi)推。分別以低鉀飼喂第0天,第3天,第6天,第9天,第12天,第15天作為終點(diǎn)處死動(dòng)物并留取相應(yīng)標(biāo)本。 標(biāo)本處理當(dāng)天先取出家兔稱重,記錄體重變化情況,后置于安靜環(huán)境下2小時(shí)。4%戊巴比妥于耳緣靜脈注射1ml/kg,麻醉后,迅速剪去家兔右下肢兔毛,以75%的乙醇溶液消毒右下肢,用大剪刀剪開(kāi)其右下肢皮膚,分離筋膜,分別暴露分離比目魚(yú)肌和股靜脈。先由股靜脈留取血液樣本2ml,應(yīng)用離子選擇電極法測(cè)定血漿鉀離子濃度,后取比目魚(yú)肌約2g,去除肌肉上的筋膜組織,準(zhǔn)確稱重,用預(yù)冷生理鹽水沖洗比目魚(yú)肌組織,取濾紙反復(fù)吸干,放入標(biāo)記好的凍融管,迅速置于液氮罐中冷凍保存。用以測(cè)定Na,K-ATP酶活性,取材結(jié)束-70℃冰箱保存。比目魚(yú)肌Na,K-ATP酶活性按照考馬斯亮藍(lán)蛋白測(cè)定試劑盒,檢測(cè)總蛋白含量后用超微量ATP酶測(cè)試盒檢測(cè)Na,K-ATP酶活性。取比目魚(yú)肌約35mg,去除肌肉上的筋膜組織,用預(yù)冷等滲氯化鋰沖洗,取濾紙反復(fù)吸干,準(zhǔn)確稱重,-20℃保存。采用火焰原子吸收光度計(jì)測(cè)定骨骼肌組織內(nèi)鉀離子,鈉離子,鎂離子含量。取比目魚(yú)肌約500-600 mg,去除肌肉上的筋膜組織,用預(yù)冷生理鹽水沖洗比目魚(yú)肌組織,取濾紙反復(fù)吸干,放入凍融管,標(biāo)上標(biāo)簽,迅速置于液氮罐中冷凍保存,取材結(jié)束-70℃冰箱保存。采用Western blot測(cè)定A組D組F組比目魚(yú)肌Na,K-ATP酶α1,α2亞型表達(dá)。 所有數(shù)據(jù)通過(guò)spss13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( X±s)表示,組間比較采用單因素方差分析。 結(jié)果: 1家兔低鉀飲食前后體重比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2低鉀飲食3天后即可觀察到血漿鉀離子下降(P0.05),血漿鉀離子隨低鉀飲食天數(shù)增加而逐漸下降。 3低鉀飲食3天后,觀察比目魚(yú)肌組織內(nèi)鉀離子含量與A組相比開(kāi)始降低(P0.05),且隨著低鉀飲食天數(shù)增加,比目魚(yú)肌組織內(nèi)鉀離子含量逐漸降低。 4低鉀飲食3天后,觀察比目魚(yú)肌組織內(nèi)鈉離子含量與A組相比增加(P0.05),且隨著低鉀飲食天數(shù)增加,比目魚(yú)肌組織內(nèi)鈉離子含量逐漸增高。F組比目魚(yú)肌組織內(nèi)鎂離子含量相對(duì)A組降低(P0.05)。 5低鉀飲食3天后,可觀察到比目魚(yú)肌Na,K-ATP酶活性下降(P0.05),且隨著低鉀飲食天數(shù)增加,比目魚(yú)肌Na,K-ATP酶活性降低。 6 D組比目魚(yú)肌Na,K-ATP酶α1亞型表達(dá)較A組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,F組相對(duì)A組降低(P0.05),D組α2亞型表達(dá)相對(duì)A組降低(P0.05),F組相對(duì)A組顯著降低。 結(jié)論:低鉀飲食可造成比目魚(yú)肌組織內(nèi)鉀離子含量降低,比目魚(yú)肌組織內(nèi)鈉離子顯著增高,鎂離子含量降低。比目魚(yú)肌Na,K-ATP酶活性隨血漿鉀離子下降而下降,低鉀飲食期間比目魚(yú)肌Na,K-ATP酶α_1亞型表達(dá)有降低趨勢(shì),α_2亞型表達(dá)隨著血漿鉀的降低而降低。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類(lèi)號(hào)】：R-332

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2418860