【摘要】：初步對(duì)麻疹-結(jié)核聯(lián)合疫苗進(jìn)行研究，同時(shí)觀察TLR識(shí)別配體不同組合佐劑對(duì)結(jié)核分枝桿菌融合蛋白免疫原性的影響，及DDA對(duì)TLR識(shí)別配體的輔助效應(yīng)。麻疹弱毒苗與麻疹滅活苗分別與融合蛋白Mtb10.4-HspX（MH）混合，制備聯(lián)合疫苗，并以MH作為對(duì)照;同時(shí)，CpG-ODN（CpG）和/或PolyICLC聯(lián)合/不聯(lián)合DDA，分別與融合蛋白Mtb10.4-HspX（MH）混合，制備亞單位疫苗，于第1、4、7周皮下免疫C57BL/6小鼠。以PBS和BCG（僅免疫1次）作為對(duì)照。末次免疫后6周，采血檢測(cè)血清抗體水平，并分離脾淋巴細(xì)胞，檢測(cè)分泌IFN-γ的淋巴細(xì)胞水平。 經(jīng)MH，HspX及PPD抗原刺激后，，MH+MV1組分泌IFN-γ的細(xì)胞數(shù)高于MH+MV2組（P0.05），而MH+MV2組分泌IL-4的細(xì)胞數(shù)高于MH+MV1組（P0.05）;兩種聯(lián)合疫苗組均可誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗MH及HspX的IgG1、IgG2b、IgG2c水平均明顯高于BCG組（P0.05），且各聯(lián)合疫苗組IgG2c/IgG1均高于BCG組（P0.05）。 經(jīng)MH及HspX抗原刺激后，MH+CpG+PolyICLC+DDA組小鼠分泌IFN-γ的脾淋巴細(xì)胞數(shù)高于其它各組（P0.05），MH+CpG+PolyICLC組其次，顯著高于MH+CpG及MH+PolyICLC組（P0.05）；聯(lián)合DDA佐劑組均分別高于對(duì)應(yīng)的未聯(lián)合DDA佐劑組（P0.05）。各亞單位疫苗組誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗MH及HspX的IgG1、IgG2b、IgG2c水平均明顯高于BCG組（P0.05），其中MH+CpG+PolyICLC+DDA組三種抗體水平最高；各亞單位疫苗組IgG2c/IgG1均高于BCG組（P0.05）。 結(jié)果表明，麻疹弱毒-結(jié)核聯(lián)合疫苗可誘導(dǎo)產(chǎn)生較高的細(xì)胞免疫應(yīng)答，同時(shí)CpG+PolyICLC+DDA佐劑增強(qiáng)了結(jié)核分枝桿菌融合蛋白的免疫原性；CpG和PolyICLC具有佐劑協(xié)同作用；DDA有助于CpG和/或PolyICLC誘導(dǎo)特異性細(xì)胞免疫應(yīng)答。
[Abstract]:The effect of different adjuvants of TLR recognition ligand on the immunogenicity of Mycobacterium tuberculosis fusion protein and the auxiliary effect of DDA on TLR recognition ligands were studied. Measles attenuated vaccine and inactivated measles vaccine were mixed with fusion protein Mtb10.4-HspX (MH) to prepare combined vaccine, and MH was used as control. At the same time, CpG-ODN (CpG) and / or PolyICLC combined / uncombined DDA, were mixed with the fusion protein Mtb10.4-HspX (MH) to prepare subunit vaccine. C57BL/6 mice were subcutaneously immunized at the 1st week of 4th week. PBS and BCG (immunized only once) were used as control. At 6 weeks after the last immunization, the serum antibody level was measured, and the spleen lymphocytes were isolated and the IFN- 緯 secreting lymphocytes were detected. After stimulation by MH,HspX and PPD antigen, the number of cells secreting IFN- 緯 in MH MV1 group was higher than that in MH MV2 group (P0.05), while the number of IL-4 secreting cells in MH MV2 group was higher than that in MH MV1 group (P0.05). The IgG1,IgG2b,IgG2c levels of MH and HspX induced by two combined vaccine groups were significantly higher than those of BCG group (P0.05), and IgG2c/IgG1 of each combined vaccine group was higher than BCG group (P0.05). The number of spleen lymphocytes secreting IFN- 緯 in, MH CpG PolyICLC DDA group after stimulation with MH and HspX antigen was higher than that in other groups (P0.05), MH CpG PolyICLC group, significantly higher than MH CpG and MH PolyICLC group (P0.05); The combined DDA adjuvant group was higher than the corresponding DDA adjuvant group (P0.05). The levels of IgG1,IgG2b,IgG2c against MH and HspX induced by each subunit vaccine group were significantly higher than those of BCG group (P0.05), in which the MH CpG PolyICLC DDA group had the highest level of three kinds of antibodies; the IgG2c/IgG1 level of each subunit vaccine group was higher than that of BCG group (P0.05). The results showed that the combined measles attenuated virus / tuberculosis vaccine could induce a higher cellular immune response, and CpG PolyICLC DDA adjuvant enhanced the immunogenicity of Mycobacterium tuberculosis fusion protein, while CpG and PolyICLC had synergistic effects. DDA helps CpG and / or PolyICLC induce specific cellular immune responses.
【學(xué)位授予單位】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：2413729