【摘要】：本研究通過(guò)微生物分離和分子鑒定方法針對(duì)來(lái)源于和田長(zhǎng)壽老人和一般人腸道的細(xì)菌及乳酸菌總數(shù)進(jìn)行測(cè)定。對(duì)其中的乳酸菌進(jìn)行分離鑒定的同時(shí)，篩選出具有膽固醇能力及耐受胃腸道酸性、膽汁鹽性能和奶蛋白酶性能的菌株并對(duì)產(chǎn)生有抑菌作用的發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行初步研究和探討作用機(jī)理。 微生物數(shù)量測(cè)定及分類實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，長(zhǎng)壽老人腸道中細(xì)菌總數(shù)為7.2×10~6cfu/g，乳酸菌數(shù)量為4.9×10~4cfu/g，一般人腸道中細(xì)菌總數(shù)為8.0×10~6cfu/g，乳酸菌數(shù)量為7.3×10~3cfu/g。 通過(guò)選擇性培養(yǎng)基平板涂布法篩選得到長(zhǎng)壽老人和一般人腸道乳酸菌27株，經(jīng)細(xì)胞和菌落形態(tài)結(jié)構(gòu)、革蘭氏染色和生理生化特性，16S rDNA基因序列分析和系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果表明，27株分別屬于腸球菌屬和乳桿菌屬，其中18株屬于耐久腸球菌，1株屬于屎腸球菌，5株屬于植物乳桿菌植物亞種，2株屬于戊糖乳桿菌，1株屬于類干酪乳桿菌。 從抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果得知，27株實(shí)驗(yàn)菌株都有一定的抑菌能力，但從長(zhǎng)壽老人糞便中分離得到的所有菌株抑菌能力強(qiáng)于來(lái)自一般人腸道的所有菌株。耐久腸球菌R02-23，植物乳桿菌植物亞種R03-13，戊糖乳桿菌S04對(duì)三種指示菌抑制效果均較好，作為進(jìn)一步研究益生菌（乳酸菌）抑菌機(jī)理。乳酸菌代謝產(chǎn)物---有機(jī)酸（乳酸，丁酸和乙酸）和細(xì)菌素類（對(duì)熱穩(wěn)定且對(duì)酸和蛋白酶敏感）做主要底物進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在低pH條件下兩類物質(zhì)有明顯的抑菌作用。低pH是表現(xiàn)抑菌活性的必要條件，本研究中pH低于4.50時(shí)抑菌物質(zhì)才能發(fā)揮作用。 膽固醇廣泛存在于動(dòng)物體內(nèi)，是細(xì)胞膜的組成成分，參與了一些甾體類激素和膽酸的生物合成，但是特內(nèi)膽固醇含量高于正常值并導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病的發(fā)生與發(fā)展。所以本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)菌株的體外降膽固醇能力。27株乳酸菌都有一定的降膽固醇的能力，脫除率在22.32%-78.57%之間，，平均脫除率50.63%，13株（都是長(zhǎng)壽老人源菌株）脫除率高于平均值。長(zhǎng)壽益生菌中最高脫除率為78.57%，最低為40.41%，對(duì)照組中最高脫除率是48.21%，最低是22.32%。篩選高降膽固醇能力的菌株10株，并檢測(cè)10株菌對(duì)膽汁鹽，對(duì)酸和蛋白酶的耐受性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，10株實(shí)驗(yàn)菌株中篩選出耐酸，耐膽汁鹽，耐蛋白酶能力強(qiáng)的三株菌（耐久腸球菌R02-23，植物乳桿菌植物亞種R03-13，戊糖乳桿菌S04）。對(duì)耐久腸球菌R02-23，植物乳桿菌植物亞種R03-13，戊糖乳桿菌S04等三株菌進(jìn)行降膽固醇機(jī)理研究，結(jié)果表明，三株菌具有降低發(fā)酵液膽固醇含量的作用，并具有一定程度的吸附和同化作用，通過(guò)菌體對(duì)一定程度超聲波耐受能力的考察，證明菌體對(duì)膽固醇的同化作用和生物功能之間具有一定的相關(guān)性，并初步確認(rèn)為益生菌降膽固醇的機(jī)制。 以上所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，R02-23，R03-13，S04等長(zhǎng)壽老人源乳酸菌的抑菌能力，降膽固醇能力和耐受胃腸道中惡劣環(huán)境的能力都強(qiáng)于一般人的乳酸菌（R07-28，R05-35）。因此長(zhǎng)壽老人的長(zhǎng)壽能力與耐久腸球菌R02-23，植物乳桿菌植物亞種R03-13，戊糖乳桿菌S04有很大的關(guān)系，這方面的具體內(nèi)容需進(jìn)行進(jìn)一步研究。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：新疆大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類號(hào)】：R371

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王濤;;益生菌的研究進(jìn)展及展望[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2007年17期

2 溫曉慶;;乳酸菌及有效成分抗腫瘤作用與機(jī)制探討[J];北京農(nóng)業(yè);2008年12期

3 張長(zhǎng)青,張國(guó)偉,張葵玲;培菲康輔助治療肝硬化自發(fā)性腹膜炎的療效[J];廣東醫(yī)學(xué);2005年01期

4 溫柏平;乳酸菌與腫瘤防治[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)學(xué)分冊(cè);1996年01期

5 秦俊法;;中國(guó)的百歲老人研究Ⅲ.百歲老人聚居區(qū)——中國(guó)長(zhǎng)壽之鄉(xiāng)的成因和評(píng)定[J];廣東微量元素科學(xué);2007年11期

6 周素芳,秦雪,梁谷,吳耀生,周德義;用酶標(biāo)凝集素檢測(cè)胃液中的胃蛋白酶[J];廣西科學(xué)院學(xué)報(bào);1997年03期

7 劉娟;王蔭榆;吳正鈞;郭本恒;;植物乳桿菌ST-Ⅲ菌株降膽固醇作用的研究[J];工業(yè)微生物;2008年05期

8 王海波;馬微;錢(qián)程;張?zhí)m威;;益生菌的研究現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢(shì)[J];現(xiàn)代食品科技;2006年03期

9 黃培寧;雙岐三聯(lián)活菌制劑治療霉菌性腸炎68例[J];海南醫(yī)學(xué);2004年03期

10 王旭明,陳宗澤,袁毅;益生菌作用機(jī)理的研究進(jìn)展[J];吉林農(nóng)業(yè)科學(xué);2002年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

1 李平蘭;長(zhǎng)壽老人源雙歧桿菌優(yōu)良菌株的篩選及生理功能研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

2 牛天貴;食品中膽固醇微生物轉(zhuǎn)化機(jī)理與應(yīng)用研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2000年

3 郭翔;降膽固醇益生乳酸菌篩選及其功能機(jī)理的研究[D];江南大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 王巍;具有降膽固醇功能益生菌的篩選[D];黑龍江大學(xué);2009年

2 徐晶雪;降膽固醇益生菌的研究[D];黑龍江大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2389783