發(fā)布時間：2018-12-18 11:31

【摘要】：目的:研究B7-H1蛋白疫苗對HBV轉(zhuǎn)基因小鼠免疫應答的影響,探索治療慢性乙型肝炎的新方法。方法:用不同劑量的乙型肝炎疫苗和B7-H1蛋白疫苗聯(lián)合免疫HBV轉(zhuǎn)基因小鼠,應用ELISA法檢測轉(zhuǎn)基因小鼠在不同時間點血清抗B7-H1抗體滴度,同時在免疫后第14周末處死小鼠取脾細胞,檢測不同的免疫方法對小鼠脾細胞產(chǎn)生HBsAg特異性Th1類細胞因子(IFN-γ及IL-2)、對HBsAg特異性分泌IFN-γT細胞數(shù)量及對小鼠淋巴細胞增殖的影響。結(jié)果:成功完成小鼠的免疫計劃,5周起血清中即能測到B7-H1抗體,同一時間點各組之間的抗體滴度值并無明顯差異。加B7-H1蛋白免疫各組與相同劑量單用HBsAg蛋白免疫各組相比:IL-2均明顯減低(P0.05),分泌IFN-γT的T細胞數(shù)量下降,但脾淋巴細胞分泌IFN-γ的水平各組間無明顯差異;MTT法測定的淋巴細胞增殖能力各組間也無明顯變化。結(jié)論:B7-H1蛋白疫苗可誘導HBV轉(zhuǎn)基因小鼠產(chǎn)生明顯的抗B7-H1抗體應答,但不能增強抗HBsAg的免疫應答。較小劑量的HBsAg即可引起HBV轉(zhuǎn)基因小鼠Th1類細胞因子(IFN-γ及IL-2)的分泌以及淋巴細胞增殖。
[Abstract]:Aim: to study the effect of B7-H1 protein vaccine on immune response of HBV transgenic mice and to explore a new method for the treatment of chronic hepatitis B. Methods: HBV transgenic mice were immunized with different doses of hepatitis B vaccine and B7-H1 protein vaccine. The titers of anti-B7-H1 antibody in serum of transgenic mice were detected by ELISA method at different time points. At the end of the 14th week after immunization, the mice were killed to take the spleen cells and to detect the production of HBsAg specific Th1 cytokines (IFN- 緯 and IL-2) in the spleen cells of the mice by different immune methods. Effect on the number of IFN- 緯 T cells secreted by HBsAg and on lymphocyte proliferation in mice. Results: B7-H1 antibody could be detected in the serum from 5 weeks after the successful completion of the immunization plan of mice. There was no significant difference in antibody titer between the groups at the same time point. Compared with the same dose groups immunized with HBsAg protein, IL-2 was significantly decreased (P0.05) and the number of T cells secreting IFN- 緯 T was decreased in the groups immunized with B7-H1 protein. However, there was no significant difference in the levels of IFN- 緯 secreted by splenic lymphocytes. The proliferative ability of lymphocytes measured by MTT method also had no significant change among groups. Conclusion: B7-H1 protein vaccine can induce HBV transgenic mice to produce obvious anti B7-H1 antibody response, but can not enhance the immune response against HBsAg. A small dose of HBsAg could induce the secretion of Th1 cytokines (IFN- 緯 and IL-2) and lymphocyte proliferation in HBV transgenic mice.
【作者單位】： 第四軍醫(yī)大學唐都醫(yī)院全軍感染病診療中心;
【基金】：國家“十一五”傳染病重大專項資助(2008ZX10002-008)
【分類號】：R392.12

【參考文獻】

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1 熊一力,賈彥征,王洪敏,劉光澤,任紅,周智,張定鳳;乙型肝炎病毒轉(zhuǎn)基因小鼠用于研究治療乙型肝炎藥物初探[J];中華肝臟病雜志;2001年01期

【共引文獻】

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2 曾瀅,易學瑞,張宜俊,汪恩浩,熊一力;大劑量重組HBsAg對HBV轉(zhuǎn)基因小鼠細胞免疫調(diào)節(jié)作用[J];廣東醫(yī)學;2003年07期

3 劉惠萍,熊一力,施理,張宜俊;大劑量HBsAg疫苗對HBV轉(zhuǎn)基因小鼠細胞免疫調(diào)節(jié)的研究[J];解放軍醫(yī)學雜志;2005年01期

4 張一,童華生,袁鏗,袁芳,胡銀英;慢性乙型肝炎病人樹突狀細胞體外培養(yǎng)的實驗研究[J];江西醫(yī)學院學報;2004年06期

5 易學瑞,曾瀅,祖萍,朱征宇,劉光澤,甘建輝,袁有成,汪恩浩,張宜俊;基因重組(酵母)乙肝疫苗對HBV轉(zhuǎn)基因小鼠細胞免疫調(diào)節(jié)作用[J];上海實驗動物科學;2003年03期

6 鄭曲波,張宜俊,劉惠萍,易學瑞,祖萍,章谷生;慢性HBV感染者外周血樹突狀細胞和T細胞體外應答功能的檢測和分析[J];上海醫(yī)學檢驗雜志;2003年02期

7 童華生,張一,袁鏗,胡銀英,袁芳;HBsAg負載慢性乙型肝炎患者外周血樹突狀細胞表型分子的變化[J];中華傳染病雜志;2005年01期

8 李端,閆永平,徐德忠,門可,張景霞,雷小英;乙型肝炎病毒轉(zhuǎn)基因鼠孕期應用拉米夫定和干擾素的療效及安全性研究[J];中華婦產(chǎn)科雜志;2005年05期

9 張定鳳;從機體清除乙型肝炎病毒的規(guī)律探討抗病毒治療的新策略[J];中華肝臟病雜志;2001年04期

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3 彭江龍;不同病程乙型肝炎患者PBMC中T細胞亞群的研究[D];安徽理工大學;2005年

4 徐大為;DHBV分子流行病學調(diào)查及雛鴨人工感染DHBV疾病模型的建立與初步應用[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2006年

5 謝巍;鴨白細胞介素2（IL-2）基因的克隆和表達[D];重慶醫(yī)科大學;2006年

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7 吳國斌;慢性HBV攜帶者外周血T細胞亞群的變化及其與血清HBV DNA水平的關(guān)系[D];昆明醫(yī)學院;2006年

【二級參考文獻】

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2 熊一力,賈彥征,王洪敏,劉光澤,任紅,周智,張定鳳;乙型肝炎病毒轉(zhuǎn)基因小鼠用于研究治療乙型肝炎藥物初探[J];中華肝臟病雜志;2001年01期

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9 ;本刊2011年第10期專題:病原菌及耐藥株檢測[J];軍醫(yī)進修學院學報;2011年09期

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5 沃健兒;侯偉;劉克洲;李敏偉;陳離偉;胡中榮;劉榮華;胡敏君;;不同結(jié)合臂長10-23 DNAzymes對乙型肝炎病毒S基因和C基因表達的抑制作用[A];2005年浙江省感染病、肝病學術(shù)會議論文匯編[C];2005年

6 王春花;成軍;王欣欣;吳煜;劉妍;郎振為;;乙型肝炎病毒前-前-S蛋白在大腸桿菌中的表達和純化研究[A];中華醫(yī)學會全國第九次感染病學學術(shù)會議論文匯編[C];2006年

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8 侯寧;王劍;李文龍;張繼帥;楊曉;;心臟和軟骨組織特異性表達Cre重組酶轉(zhuǎn)基因小鼠的基因型鑒定[A];中國遺傳學會七屆一次青年研討會暨上海高校模式生物E——研究院第一屆模式生物學術(shù)研討會論文匯編[C];2005年

9 雷宇;黎燕;王蜀強;陳壓西;周智;任紅;;乙型肝炎病毒S基因四環(huán)素調(diào)控體系的構(gòu)建及其在真核細胞中的表達[A];中華醫(yī)學會第十二次全國病毒性肝炎及肝病學術(shù)會議論文匯編[C];2005年

10 王春花;成軍;郎振為;王欣欣;吳煜;劉妍;;乙型肝炎病毒前-X蛋白在大腸桿菌中的表達和純化[A];中華醫(yī)學會第十二次全國病毒性肝炎及肝病學術(shù)會議論文匯編[C];2005年

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2 于明山;轉(zhuǎn)基因小鼠研制成功為克隆器官提供基礎(chǔ)[N];中國高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)導報;2003年

3 王鳳梅;上�；蛐∈笊硎捞矫豙N];遼寧日報;2003年

4 本報記者 李嬋;克隆豬身上發(fā)熒光[N];北京科技報;2004年

5 中國科學院遺傳與發(fā)育生物學研究所 勞為德;哺乳動物的遺傳改造[N];科技日報;2001年

6 通訊員 吳志軍　杜建國;北京蛋白質(zhì)組研究中心獲三項新成果[N];科技日報;2009年

7 中國科學院動物研究所研究員 沈孝宙;關(guān)于GMO的對話[N];中國國門時報(中國出入境檢驗疫報);2001年

8 記者 蔣建科;軍事醫(yī)科院實驗動物研究邁上新臺階[N];人民日報;2000年

9 郝成濤　何玉璽;流感病毒是否具有抗藥性,一測便知曉[N];科技日報;2009年

10 實習生 周英;轉(zhuǎn)基因如何從小鼠到人類？[N];科技日報;2010年

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1 李政;酵母人工染色體（YAC）介導的含HS2定點突變的人β-珠蛋白基因簇在轉(zhuǎn)基因小鼠中的表達[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;1998年

2 朱化星;mRFP1報告基因表達及Gal4-UAS二元表達系統(tǒng)在小鼠中的應用[D];復旦大學;2005年

3 高俊;細菌人工染色體（BAC）介導的人載脂蛋白apoA-Ⅰ C-Ⅲ A-Ⅳ A-Ⅴ基因簇轉(zhuǎn)基因小鼠研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2002年

4 馮東曉;細菌人工染色體（BAC）介導的人α-珠蛋白基因簇轉(zhuǎn)基因小鼠的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2001年

5 劉慶輝;帶紅系增強子的人βE-珠蛋白基因在轉(zhuǎn)基因小鼠中的表達[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;1992年

6 韋玉生;BAC介導ApoCⅢ增強子刪除的人載脂蛋白apoAⅠ/CⅢ/AⅣ/AⅤ基因簇突變株轉(zhuǎn)基因鼠系的建立以及其與完整基因簇轉(zhuǎn)基因小鼠的比較研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2005年

7 范志強;蚓激酶基因在山羊乳腺中的表達及轉(zhuǎn)基因小鼠的制備[D];中國醫(yī)科大學;2005年

8 王鵬雁;口蹄疫病毒干擾RNA轉(zhuǎn)基因小鼠模型的構(gòu)建[D];石河子大學;2008年

9 潘金水;乙型肝炎病毒包膜蛋白與跳躍斷裂易位蛋白相互作用的驗證[D];福建醫(yī)科大學;2009年

10 劉曉穎;腫瘤壞死因子α誘導的cIAP_2蛋白抑制乙型肝炎病毒復制的研究[D];復旦大學;2005年

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3 楊炳春;乙型肝炎病毒突變型表面抗原在桿狀病毒表達系統(tǒng)中的表達、純化及其免疫活性研究[D];廈門大學;2008年

4 李明;利用ICSI技術(shù)生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因小鼠[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2005年

5 李文龍;血管內(nèi)皮細胞特異表達Cre重組酶轉(zhuǎn)基因小鼠的建立[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2005年

6 蔡蘭蘭;基于四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)的TRE-C-imp13轉(zhuǎn)基因小鼠的構(gòu)建及表達分析[D];廈門大學;2009年

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8 鄭逸梅;pBC-rtTA轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立和應用[D];揚州大學;2006年

9 竺淑佳;前腦特異性過表達VGLUT1轉(zhuǎn)基因小鼠的構(gòu)建及初步表型分析[D];華東師范大學;2009年

10 高學松;應用噬菌體展示技術(shù)篩選乙型肝炎病毒核心啟動子結(jié)合蛋白[D];河北醫(yī)科大學;2005年

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