【摘要】：目的應(yīng)用微量凍存法建立EB病毒(EBV)轉(zhuǎn)化臍帶血淋巴母細胞系(LCLs),為永久保存具遺傳疾病的臍帶血資源提供研究基礎(chǔ)。方法知情同意下收集妊娠中期至晚期終止妊娠的20例孕婦臍帶血樣本,采用微量凍存法,通過EBV轉(zhuǎn)化獲得臍帶血LCLs,凍存復(fù)蘇后,染色體G顯帶分析,檢測建系前后的核型穩(wěn)定性。結(jié)果 20例樣本中19例成功進行微量凍存法轉(zhuǎn)化,成功率95%,轉(zhuǎn)化成功的臍帶血LCLs凍存后復(fù)蘇成功率達100%。除1例因胎兒為水腫胎失敗外,19例臍帶血樣本均可在10 d左右觀察到淋巴細胞增大呈母細胞化,增殖的淋巴母細胞凝聚成團,6~8周后可獲得穩(wěn)定生長的臍帶血LCLs,轉(zhuǎn)化前后的淋巴細胞染色體核型無明顯差異。結(jié)論應(yīng)用微量凍存法可成功建立臍帶血LCLs,EB病毒轉(zhuǎn)化的臍帶血LCLs細胞遺傳學(xué)特性穩(wěn)定,可用于進一步的遺傳學(xué)研究。
[Abstract]:Objective to establish the transformation of EB virus (EBV) into umbilical cord hemolymph mother cell line (LCLs), by microcryopreservation to provide a basis for the permanent preservation of cord blood resources with genetic diseases. Methods Cord blood samples were collected from 20 pregnant women with informed consent from the middle to the third trimester of pregnancy. The chromosome G-banding analysis was performed after LCLs, cryopreservation and resuscitation of cord blood were obtained by EBV transformation. The karyotype stability before and after the establishment of the system was tested. Results among the 20 cases, 19 cases were successfully transformed by microcryopreservation, the success rate was 95%, and the successful rate of resuscitation of umbilical cord blood LCLs after cryopreservation was 100%. Except for one case of fetal failure due to fetal edema, 19 cord blood samples could be observed to be mother cell enlarged and proliferating lymphoblastoid cells condensed into clusters at about 10 days. After 6 to 8 weeks, stable cord blood LCLs, could be obtained. There was no significant difference in karyotype of lymphocyte before and after transformation. Conclusion the cytogenetic characteristics of cord blood LCLs transformed by umbilical cord blood LCLs,EB virus can be successfully established by microcryopreservation, which can be used for further genetic research.
【作者單位】： 廣東省婦幼保健院醫(yī)學(xué)遺傳中心;
【基金】：廣東省醫(yī)學(xué)科研基金立項課題(編號:B2014024)
【分類號】：R329.2

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