發(fā)布時(shí)間：2018-12-15 18:53

【摘要】：微小按蚊是我國(guó)重要的瘧疾傳播媒介，室內(nèi)滯留噴灑和擬除蟲(chóng)菊酯殺蟲(chóng)劑浸泡蚊帳是重要的防治措施，我國(guó)云南一直在應(yīng)用該化學(xué)方法防制。有報(bào)道稱(chēng)已發(fā)現(xiàn)微小按蚊對(duì)擬除蟲(chóng)菊酯殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生了抗藥性，有研究認(rèn)為我國(guó)云南的微小按蚊A和C型吸血行為和棲息行為也有所差異，但更進(jìn)一步的行為差異，特別是應(yīng)用殺蟲(chóng)劑之后，在殺蟲(chóng)劑壓力下微小按蚊對(duì)殺蟲(chóng)劑抗藥性與吸血和棲息行為的關(guān)系，還有待于深入研究。 1.微小按蚊分子分型 微小按蚊復(fù)合組成員，以及幾種親緣相近的蚊種具有相近的外形特征，在外形上容易混淆，，形態(tài)學(xué)鑒定容易出現(xiàn)錯(cuò)誤。該復(fù)合組迄今已記錄有微小按蚊A、B、C、D、E，我國(guó)云南南部主要為A型、C型，近年也有A/C混合型微小按蚊的報(bào)道。先對(duì)做采集的蚊蟲(chóng)進(jìn)行形態(tài)學(xué)分型，再用PCR方法對(duì)捕獲的微小按蚊進(jìn)行分子分型。An. minimus A364只，An. minimus C593只，An. jeyporiensis19只，An.aconitus15只，另有2只疑似為微小按蚊A/C混合型，54只不是微小組按蚊種團(tuán)成員。 2.微小按蚊棲息習(xí)性研究 在東方紅村選取若干牛圈和人房為采樣點(diǎn)，使用誘蚊燈采集成蟲(chóng)，每日19:00掛燈開(kāi)始采集，次日8:00收集蚊蟲(chóng)。對(duì)各個(gè)誘蚊燈所采集蚊蟲(chóng)進(jìn)行分別計(jì)數(shù)。經(jīng)過(guò)spss軟件統(tǒng)計(jì)分析得出結(jié)論An. minimus A偏好棲息人房；而An. minimus C偏好棲息于牛圈。 3.微小按蚊吸血習(xí)性研究 根據(jù)東方紅村的實(shí)際情況調(diào)查當(dāng)?shù)氐闹饕獎(jiǎng)游镅礊榕�、豬和雞，再加上人血源，設(shè)計(jì)特異性引物，鑒別捕獲蚊蟲(chóng)胃血來(lái)源。結(jié)果經(jīng)spss軟件分析，An.minimus A無(wú)明顯的吸血偏好；而An. minimus C偏好吸食牛血。 4.微小按蚊鈉通道基因序列研究 登錄GenBank可以查詢(xún)到An. minimus鈉離子通道部分編碼序列區(qū)(CDS)片段序列（GenBank: GU064930.3）和para型鈉離子通道基因序列（GenBank:EU155386.1）。根據(jù)para型鈉離子通道基因序列設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增An. minimus的ⅡS6區(qū)段序列并測(cè)序，共測(cè)序微小按蚊736只，其中415只測(cè)序結(jié)果理想，比對(duì)結(jié)果顯示在常見(jiàn)kdr突變的1014位點(diǎn)并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)突變，提示該地區(qū)微小按蚊的擊倒抗性很低或并沒(méi)有產(chǎn)生擊倒抗性。 5.微衛(wèi)星位點(diǎn)多樣性檢測(cè)結(jié)果及分析 登錄GenBank可以查詢(xún)到An. minimus已有28條微衛(wèi)星序列，編號(hào)為：HQ839797.1、HQ839799.1、HQ839801.1、HQ839803.1、HQ839797.1、HQ839795.1、HQ839793.1、 HQ839793.1、 HQ839789.1、 HQ839816.1、 HQ839814.1、HQ839810.1、 HQ839812.1、 HQ839808.1、 HQ839806.1、 HQ839804.1、HQ839802.1、 HQ839802.1、 HQ839798.1、 HQ839796.1、 HQ839794.1、HQ839792.1、HQ839792.1、HQ839815.1、HQ839813.1。根據(jù)以上序列設(shè)計(jì)引物，其中AM4、AM7-1、AM8、AM12、AM21、AM23、AM25-1和AM27-1，八個(gè)位點(diǎn)擴(kuò)增出清晰的條帶，測(cè)序結(jié)果理想，可用于微衛(wèi)星數(shù)據(jù)分析。將采集蚊蟲(chóng)分為八個(gè)組：A組為An. minimusA（云南東方紅村），B組為An. minimus C（云南東方紅村），C組為An. jeyporiensis（云南龍?zhí)链澹�，D組為An.aconitus（海南牙營(yíng)村），E組為An. aconitus（云南龍?zhí)链澹�，F(xiàn)組為An. minimusA（云南龍?zhí)链澹�，G組為An. minimus C（云南龍?zhí)链澹�，H組為An. minimus A（海南牙營(yíng)村），用微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)這些組的期望雜合度與觀察雜合度、多態(tài)性信息含量、哈迪-溫伯格平衡分析、群體內(nèi)的近交系數(shù)、群體分化系數(shù)等多方面分析，并對(duì)微小按蚊種團(tuán)進(jìn)行聚類(lèi)。各個(gè)位點(diǎn)期望雜合度與觀察雜合度的值非常相似，說(shuō)明這些標(biāo)記具有良好的多態(tài)性，適用于群體分析。實(shí)驗(yàn)用8個(gè)按蚊種群間的生物多樣性很好，各個(gè)位點(diǎn)的平均多態(tài)信息含量處于0.53～0.77之間，云南龍?zhí)链宀东@的An.aconitus遺傳多樣性略低，但都0.5，仍然比較豐富。哈迪-溫伯格平衡檢驗(yàn)結(jié)果各種群存在多位點(diǎn)的雜合子缺失，偏離了哈迪-溫伯格平衡標(biāo)準(zhǔn)，總的群體遺傳分化系數(shù)Fst=0.1386，各種群之間基因交流較少。聚類(lèi)分析結(jié)果表明同種之間距離接近，微小按蚊A型、C型與烏頭按蚊距離接近，與杰普爾按蚊距離較遠(yuǎn)，符合微小按蚊種團(tuán)的基本情況。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類(lèi)號(hào)】：R384.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2381125