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HSP70在感染性休克大鼠腎組織中的表達及氯胺酮的干預(yù)作用

發(fā)布時間:2018-11-20 16:26
【摘要】:目的本實驗旨在觀察感染性休克大鼠不同時間點平均動脈壓(MAP)、腎組織熱休克蛋白70(HSP70)、血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)的變化,以及氯胺酮對它們的影響,探討感染性休克大鼠腎臟損傷,HSP70的演變及氯胺酮的干預(yù)機制。方法選健康雄性Wistar大鼠54只,隨機分為三組:假手術(shù)(SHAM)組、盲腸結(jié)扎加穿孔(CLP)組及氯胺酮(KT)組。各組大鼠術(shù)前均行頸總動脈置管術(shù),連續(xù)監(jiān)測并記錄平均動脈壓。術(shù)畢均經(jīng)尾靜脈給予生理鹽水持續(xù)補液至實驗結(jié)束,速率為10ml·kg-1·h-1。SHAM組開腹后不做任何處理,其余兩組行盲腸結(jié)扎穿孔術(shù)(CLP)。備皮消毒后,沿腹中線剪開中下腹部皮膚約2cm,游離腸系膜和盲腸,用3-0絲線環(huán)行結(jié)扎盲腸根部,用9號針頭在盲端穿刺2處,兩針孔相距約3mm,輕輕擠壓盲腸至少量糞渣流出,還納腸管,并逐層縫合關(guān)腹。碘伏消毒并包扎傷口。KT組于CLP前20min腹腔給藥40 mg/kg。各組在3h、6h、12h分別經(jīng)心臟采血,檢測尿素氮和肌酐的含量,并用免疫組化方法檢測熱休克蛋白70(HSP70)的表達。 結(jié)果①一般情況及大體形態(tài)學(xué):與SHAM組比較,CLP組大鼠精神萎靡,嗜睡,活動減少,甚至出現(xiàn)呼吸急促,眼角分泌物等。實驗完畢后處死動物,觀察腹腔有膿液或血性滲出物滲出,惡臭,盲腸腫脹變黑,壞疽、粘連,肝腎等器官充血水腫,有時表面可見出血點;KT組明顯減輕。②血流動力學(xué)改變:各組動物術(shù)后平均動脈壓均呈進行性下降。CLP組和KT組在9h后MAP明顯下降(P0.01);KT組MAP下降較CLP組明顯減輕(P<0.01)。③血清肌酐(Cr)含量的變化:在3h和6h兩個時間點沒有明顯變化;術(shù)后12h,與SHAM組比較,CLP組大鼠血清Cr顯著升高(P0.01);KT組血清Cr較CLP組明顯降低(P0.05)。④尿素氮含量的變化:與SHAM組比較,CLP組大鼠血清BUN含量在術(shù)后6h和12h顯著升高(P<0.01);與CLP組比較,KT組大鼠血清BUN含量在6、12h時相點明顯降低(P0.05)。⑤HSP70表達量的變化:三組腎組織中HSP70均有表達,CLP組及KT組均明顯高于SHAM組(P0.01);KT組明顯高于CLP組(P0.05)。結(jié)論感染性休克時腎組織中HSP70的含量顯著增高,并且隨時間的推移而逐漸增強,而氯胺酮能抑制膿毒癥大鼠血清BUN和Cr的增高,減輕腎組織損害,對膿毒癥大鼠腎臟具有一定的保護,此作用可能與誘導(dǎo)HSP70表達增強有關(guān)。
[Abstract]:Objective to observe the changes of heat shock protein 70 (HSP70) and serum creatinine (Cr),) urea nitrogen (BUN) in renal tissue of (MAP), at different time points in rats with septic shock and the effect of ketamine on them. To investigate the renal injury, the evolution of HSP70 and the intervention mechanism of ketamine in septic shock rats. Methods 54 healthy male Wistar rats were randomly divided into three groups: sham operation (SHAM) group, cecal ligation plus perforated (CLP) group and ketamine (KT) group. The common carotid artery catheterization was performed before operation and the mean arterial pressure was continuously monitored and recorded. At the end of the operation, all the patients received continuous infusion of normal saline through the caudal vein until the end of the experiment at the rate of no treatment after laparotomy in the 10ml kg-1 h-1.SHAM group, and (CLP). Was performed in the other two groups with cecal ligation and perforation. After disinfecting the skin, the skin of the middle and lower abdomen was cut along the midabdominal line about 2 cm, the mesentery and caecum were free, the root of the caecum was ligated with 3-0 silk thread, and the two pinholes were about 3 mm apart. Gently squeeze the cecum to a small amount of fecal residue, return the intestinal tube, and close the abdomen layer by layer. Iodophor was disinfected and wound bandaged. KT group received intraperitoneal administration of 20min for 40 mg/kg. before CLP. The blood samples were collected from the heart at 3 h, 6 h and 12 h, respectively. The contents of urea nitrogen and creatinine were measured, and the expression of heat shock protein 70 (HSP70) was detected by immunohistochemical method. Results 1 General condition and general morphology: compared with SHAM group, the rats in CLP group were depressed in spirit, drowsiness, decreased in activity, and even appeared shortness of breath, eye horn secretion and so on. At the end of the experiment, the animals were killed to observe the exudation of pus or blood exudates, stench, swelling and blackening of caecum, gangrene, adhesion, hyperemia and edema of liver and kidney, and some bleeding spots were observed on the surface. The hemodynamic changes in KT group were significantly alleviated. 2 the mean arterial pressure in each group was decreased progressively, while MAP in CLP group and KT group decreased significantly after 9 hours (P0.01). The decrease of MAP in KT group was significantly less than that in CLP group (P < 0. 01). 3 the change of serum creatinine (Cr) was not obvious at 3 h and 6 h, but at 12 h after operation, the serum Cr in CLP group was significantly higher than that in SHAM group (P0.01). The level of serum Cr in KT group was significantly lower than that in CLP group (P0.05). 4 the level of serum BUN in CLP group was significantly higher than that in SHAM group at 6 and 12 hours after operation (P < 0. 01). Compared with CLP group, the content of serum BUN in KT group was significantly decreased at 6h / 12h (P0.05). The change of 5HSP70 expression was found in renal tissue of three groups. The expression of HSP70 in CLP group and KT group was significantly higher than that in SHAM group (P0.01). KT group was significantly higher than CLP group (P0.05). Conclusion during septic shock, the content of HSP70 in renal tissue increases significantly, and gradually increases with time. Ketamine can inhibit the increase of serum BUN and Cr in septic rats and alleviate the damage of renal tissue. It can protect the kidney of sepsis rats, which may be related to the increase of HSP70 expression.
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2011
【分類號】:R363

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