【摘要】：目的： 1.探討腸道菌群對卵清蛋白致敏效應(yīng)的影響。 2.研究腸道菌群紊亂與食物過敏發(fā)生的先后順序。 3.研究雙歧桿菌對食物過敏的預(yù)防和治療作用。 方法： 構(gòu)建棕色挪威大鼠(Brown-Norway Rat, BNRat)卵清蛋白(ovalbumin, OVA)致敏動物模型,以卵清蛋白lmg每天連續(xù)灌胃6周,同時分別建立PBS對照組,卡那霉素破壞腸道菌群組,雙歧桿菌預(yù)防組和雙歧桿菌治療組；每周剪尾尖取血動態(tài)檢測血清中OVA特異性IgE水平和IgG水平,以IgE水平高于對照組X+3S為致敏判斷標(biāo)準(zhǔn)；同時每周用代謝籠無菌操作收集大鼠糞便,檢測糞便菌落總數(shù),及采用相對熒光定量PCR方法分別檢測雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌的mRNA表達(dá)水平；6周后處死大鼠取回腸下段組織,分別通過光鏡、電鏡、免疫組化方法觀察各組腸粘膜完整情況、炎癥反應(yīng)情況,及CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞數(shù)量變化。 結(jié)果： 1.致敏情況：OVA組和卡那霉素組各有4只大鼠致敏,致敏率為57%；雙歧桿菌預(yù)防組和雙歧桿菌治療組各有1只大鼠致敏,致敏率為14%。 2.OVA特異性IgG抗體檢測：重復(fù)測量資料的方差分析結(jié)果顯示,處理因素和時間之間存在交互作用。第二周PBS組、雙歧桿菌預(yù)防組的OVA特異性IgG水平分別同OVA組間均存在統(tǒng)計學(xué)差異,P0.05。第四周PBS組、雙歧桿菌預(yù)防組的OVA特異性IgG水平分別與OVA組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05；卡那霉素組分別和OVA組、雙歧桿菌治療組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。第六周PBS組、雙歧桿菌預(yù)防組的OVA特異性IgG水平分別同OVA組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05；卡那霉素組和雙歧桿菌治療組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。 3.CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞免疫組化結(jié)果：OVA組、卡那霉素組、雙歧桿菌預(yù)防組和治療組的CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞數(shù)量均較PBS組少,其中,雙歧桿菌預(yù)防組和治療組CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞數(shù)量較OVA組和卡那霉素組增多。 4.糞便菌落總數(shù)檢測結(jié)果：重復(fù)測量資料的方差分析結(jié)果顯示,處理因素和時間之間存在交互作用。第一周PBS組、OVA組分別同卡那霉素組間存在統(tǒng)計學(xué)差異,P0.05; OVA組同雙歧桿菌預(yù)防組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。第二周PBS組同其余四組間均存在統(tǒng)計學(xué)差異,P0.05。第三周各組間均無統(tǒng)計學(xué)差異。第四周PBS組和OVA組分別于卡那霉素組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。第五周PBS組同雙歧桿菌預(yù)防組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。第六周雙歧桿菌預(yù)防組分別同PBS組、OVA組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。 5.雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌的相對熒光定量PCR結(jié)果：雙歧桿菌能夠抑制腸道中大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌等致病菌的mRNA表達(dá)水平,提高雙歧桿菌、乳酸桿菌等益生菌的mRNA表達(dá)水平,OVA對腸道菌群的表達(dá)能夠產(chǎn)生一定影響。 6.各組回腸下段HE染色光鏡結(jié)果：PBS組、雙歧桿菌預(yù)防組腸道絨毛完整,未見粘膜上皮細(xì)胞損傷；治療組偶可見粘膜上皮細(xì)胞損傷,絨毛水腫；OVA組和卡那霉素組小腸絨毛大部分剝脫,絨毛上皮細(xì)胞出現(xiàn)局灶性壞死,粘膜絨毛水腫、潰瘍。 7.PBS組、OVA組和雙歧桿菌預(yù)防組回腸下段電鏡結(jié)果：PBS組和雙歧桿菌預(yù)防組腸絨毛整齊完整,OVA組腸絨毛有缺損剝脫現(xiàn)象；PBS組腸粘膜緊密連接結(jié)構(gòu)嚴(yán)密, OVA組可見緊密連接明顯擴(kuò)大,雙歧桿菌預(yù)防組緊密連接結(jié)構(gòu)較PBS組松散。 結(jié)論： 1.食物過敏發(fā)生前,腸道菌群紊亂已經(jīng)存在。 2.雙歧桿菌具有預(yù)防和治療食物過敏的作用。 3.OVA能夠?qū)е滦∧c粘膜CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞數(shù)量減少,能夠?qū)δc道菌群產(chǎn)生一定影響。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R371

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8 王t，

本文編號：2340819