【摘要】：目的： 1.探討腸道菌群對卵清蛋白致敏效應的影響。 2.研究腸道菌群紊亂與食物過敏發(fā)生的先后順序。 3.研究雙歧桿菌對食物過敏的預防和治療作用。 方法： 構建棕色挪威大鼠(Brown-Norway Rat, BNRat)卵清蛋白(ovalbumin, OVA)致敏動物模型,以卵清蛋白lmg每天連續(xù)灌胃6周,同時分別建立PBS對照組,卡那霉素破壞腸道菌群組,雙歧桿菌預防組和雙歧桿菌治療組；每周剪尾尖取血動態(tài)檢測血清中OVA特異性IgE水平和IgG水平,以IgE水平高于對照組X+3S為致敏判斷標準；同時每周用代謝籠無菌操作收集大鼠糞便,檢測糞便菌落總數,及采用相對熒光定量PCR方法分別檢測雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌的mRNA表達水平；6周后處死大鼠取回腸下段組織,分別通過光鏡、電鏡、免疫組化方法觀察各組腸粘膜完整情況、炎癥反應情況,及CD4+T細胞和CD8+T細胞數量變化。 結果： 1.致敏情況：OVA組和卡那霉素組各有4只大鼠致敏,致敏率為57%；雙歧桿菌預防組和雙歧桿菌治療組各有1只大鼠致敏,致敏率為14%。 2.OVA特異性IgG抗體檢測：重復測量資料的方差分析結果顯示,處理因素和時間之間存在交互作用。第二周PBS組、雙歧桿菌預防組的OVA特異性IgG水平分別同OVA組間均存在統(tǒng)計學差異,P0.05。第四周PBS組、雙歧桿菌預防組的OVA特異性IgG水平分別與OVA組間差異有統(tǒng)計學意義,P0.05；卡那霉素組分別和OVA組、雙歧桿菌治療組間差異有統(tǒng)計學意義,P0.05。第六周PBS組、雙歧桿菌預防組的OVA特異性IgG水平分別同OVA組間差異有統(tǒng)計學意義,P0.05；卡那霉素組和雙歧桿菌治療組間差異有統(tǒng)計學意義,P0.05。 3.CD4+T細胞和CD8+T細胞免疫組化結果：OVA組、卡那霉素組、雙歧桿菌預防組和治療組的CD4+T細胞和CD8+T細胞數量均較PBS組少,其中,雙歧桿菌預防組和治療組CD4+T細胞和CD8+T細胞數量較OVA組和卡那霉素組增多。 4.糞便菌落總數檢測結果：重復測量資料的方差分析結果顯示,處理因素和時間之間存在交互作用。第一周PBS組、OVA組分別同卡那霉素組間存在統(tǒng)計學差異,P0.05; OVA組同雙歧桿菌預防組間差異有統(tǒng)計學意義,P0.05。第二周PBS組同其余四組間均存在統(tǒng)計學差異,P0.05。第三周各組間均無統(tǒng)計學差異。第四周PBS組和OVA組分別于卡那霉素組間差異有統(tǒng)計學意義,P0.05。第五周PBS組同雙歧桿菌預防組間差異有統(tǒng)計學意義,P0.05。第六周雙歧桿菌預防組分別同PBS組、OVA組間差異有統(tǒng)計學意義,P0.05。 5.雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌的相對熒光定量PCR結果：雙歧桿菌能夠抑制腸道中大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌等致病菌的mRNA表達水平,提高雙歧桿菌、乳酸桿菌等益生菌的mRNA表達水平,OVA對腸道菌群的表達能夠產生一定影響。 6.各組回腸下段HE染色光鏡結果：PBS組、雙歧桿菌預防組腸道絨毛完整,未見粘膜上皮細胞損傷；治療組偶可見粘膜上皮細胞損傷,絨毛水腫；OVA組和卡那霉素組小腸絨毛大部分剝脫,絨毛上皮細胞出現(xiàn)局灶性壞死,粘膜絨毛水腫、潰瘍。 7.PBS組、OVA組和雙歧桿菌預防組回腸下段電鏡結果：PBS組和雙歧桿菌預防組腸絨毛整齊完整,OVA組腸絨毛有缺損剝脫現(xiàn)象；PBS組腸粘膜緊密連接結構嚴密, OVA組可見緊密連接明顯擴大,雙歧桿菌預防組緊密連接結構較PBS組松散。 結論： 1.食物過敏發(fā)生前,腸道菌群紊亂已經存在。 2.雙歧桿菌具有預防和治療食物過敏的作用。 3.OVA能夠導致小腸粘膜CD4+T細胞和CD8+T細胞數量減少,能夠對腸道菌群產生一定影響。
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【學位授予單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2011
【分類號】：R371

【參考文獻】

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本文編號：2340818