【摘要】：miRNA不僅廣泛參與了蚊生長、發(fā)育的調(diào)控,還參與了媒介與病原體的相互作用,因此miRNAs可能作為蚊蟲防制與蚊媒病原體控制的靶點(diǎn),但目前尚無有效的轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)。為研究白紋伊蚊濃核病毒-3(AalDV-3)是否可以作為有效的載體,我們利用內(nèi)含子內(nèi)表達(dá)miRNA海綿的策略,以埃及伊蚊內(nèi)源性miR-210為靶基因,構(gòu)建了重組病毒AalDV-anti-210。使用跨內(nèi)含子引物通過RT-PCR驗(yàn)證了內(nèi)含子可在蚊體內(nèi)外的剪接效果,通過qPCR方法對(duì)埃及伊蚊Aag2細(xì)胞與埃及伊蚊幼蟲的感染后的miR-210的表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果證實(shí),含有miRNA海綿的內(nèi)含子可以有效的蚊體內(nèi)外剪接,重組病毒可以在蚊體內(nèi)外高效的抑制靶miR-210的表達(dá)水平。該結(jié)果為探索AalDV-3在蚊蟲基因功能研究及生物殺蟲劑方面的潛在價(jià)值提供了理論依據(jù)。
[Abstract]:MiRNA is not only involved in the regulation of mosquito growth and development, but also in the interaction between vector and pathogen. Therefore, miRNAs may be the target of mosquito control and mosquito pathogen control, but there is no effective transduction system. In order to study whether Aedes albopictus concentrated nuclear virus (AalDV-3) can be used as an effective vector, we constructed the recombinant virus AalDV-anti-210. by using intron expression of miRNA sponge and targeting the endogenous miR-210 gene of Aedes aegypti. The splicing effect of intron in vivo and in vitro was verified by RT-PCR using transintron primer. The expression of miR-210 in Aag2 cells of Aedes aegypti and Aedes aegypti larvae after infection was detected by qPCR method. The results showed that the intron containing miRNA sponge could effectively splice the mosquito in vivo and in vitro, and the recombinant virus could effectively inhibit the expression of target miR-210 in vivo and in vitro. The results provide a theoretical basis for exploring the potential value of AalDV-3 in the study of mosquito gene function and biological insecticides.
【作者單位】： 曲阜師范大學(xué)醫(yī)院防疫科;中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所;
【分類號(hào)】：R373

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本文編號(hào)：2326439