麻疹病毒滬191株反向遺傳系統(tǒng)的建立
[Abstract]:A reverse genetic system of measles virus strain Shanghai 191 (MV-_ (S191) was established. The RNA,RT-PCR of MV-_ (S191) was extracted and amplified into 7 segments. The anti-genomic cDNA, of measles virus was digested, ligated and spliced into the full-length anti-genome of MV-_ (S191). Hepatitis D ribozyme (HdvRZ) and hammerhead nuclease (HamRZ),) were cloned into pT7-MCS vector at their 3 'and 5' ends, respectively, and pT7MV_ (S191) was obtained. Insertion of green fluorescent protein (GFP), into the P-M region of MV-_ (S191) to obtain pT7MV_ (S191)-ATU-GFP, and construction of nucleoprotein (N), expressing measles virus Three co-plasmids of phosphoprotein (P) and large protein (L). PT7MV_ (S191) and pT7MV_ (S191)-ATU-GFP were co-transfected into BSRT7 cells by liposome and heat shock for 3 h. After 3 days of transfection, the supernatant was taken and infected with Vero-SLAM cells. The expression of green fluorescent protein (GFP) and syncytial formation were detected by RT-PCR, microscope, and two infectious viruses were successfully saved in the system. The reverse genetic system of MV-_ (S191) was successfully established, which laid a foundation for the development of new vaccine based on measles virus.
【作者單位】： 成都生物制品研究所有限責任公司;
【分類號】：R373
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，本文編號：2321999
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