【摘要】：為探討超濾法在重組腺相關病毒精制中的可行性,采用不同截留分子量的超濾管對重組腺相關病毒樣品rAAV9-Kal進行超濾處理.利用鱟試劑盒和qPCR法定量檢測截留液和濾過液中的內毒素和病毒含量,評價超濾技術對樣品中內毒素的去除效果.結果表明:在乙二胺四乙酸二鈉和脫氧膽酸鈉的預處理下,30kD的超濾管對樣品的回收率及內毒素去除率分別為0.912 2,0.870 6.因此,在單一超濾條件下,30kD的超濾管是重組腺相關病毒樣品超濾純化的最佳選擇.
[Abstract]:In order to investigate the feasibility of ultrafiltration in the purification of recombinant adeno-associated virus, the rAAV9-Kal of recombinant adeno-associated virus samples was treated with ultrafiltration tubes with different molecular weights. The endotoxin and virus contents in the intercepting fluid and filtrate were measured by Limulus lysate kit and qPCR method to evaluate the removal effect of ultrafiltration technology on endotoxin in the sample. The results showed that the recovery rate and endotoxin removal rate of 30kD ultrafiltration tube were 0.912 ~ 0.8706, respectively, under the pretreatment of ethylenediamine tetraacetate disodium and deoxycholate sodium. Therefore, under the condition of single ultrafiltration, the ultrafiltration tube of 30kD is the best choice for ultrafiltration purification of recombinant adeno-associated virus samples.
【作者單位】： 華僑大學生物醫(yī)學學院;福建醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(2012AA020810) 福建省中青年教師教育科研項目(JA14020) 華僑大學科研基金資助項目(14BS111)
【分類號】：R373

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