【摘要】：巨噬細胞(macrophages,Mφ)在機體正常發(fā)育、體內平衡、組織修復和對病原體的免疫反應中起著重要作用。為了研究豚鼠(Cavia porcellus)Mφ在結核免疫中的作用及機制,本研究通過淀粉肉湯溶液預刺激的方法分離培養(yǎng)了豚鼠腹腔Mφ,并進行了細胞形態(tài)學觀察、細胞活力、吞噬功能、非特異性酯酶染色和細胞表面特異性抗原表達檢測等一系列鑒定。在此基礎上,利用結核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染分離培養(yǎng)的Mφ,并分析BCG對MφNO的產生和細胞凋亡的影響。結果表明,分離培養(yǎng)的腹腔Mφ具有Mφ所特有的形態(tài)特征、較強細胞活力和吞噬能力,并可檢測到特異性的白細胞分化抗原14(cluster of differentiation 14,CD14)、CD40和CD68等的表達。與未感染的對照組相比,BCG感染24 h后Mφ產生的NO極顯著增加(P0.01),細胞的凋亡率也極顯著升高(P0.01)。表明淀粉肉湯溶液刺激的方法可成功獲取豚鼠腹腔Mφ,同時證實BCG感染后能誘導其產生的NO增多,并且細胞凋亡率增加,提示其可能在抗結核免疫中起重要作用。研究結果為MTB和Mφ相互作用研究提供細胞模型和數據支撐。
[Abstract]:Macrophages (macrophages,M 蠁) play an important role in normal development, balance in vivo, tissue repair and immune response to pathogens. In order to study the role and mechanism of guinea pig (Cavia porcellus) M 蠁 in tuberculosis immunity, we isolated and cultured guinea pig peritoneal M 蠁 by starch broth solution prestimulation, and observed the cell morphology, cell viability and phagocytosis. A series of non-specific esterase staining and cell surface specific antigen expression detection and a series of identification. On this basis, M 蠁 was infected by Bacillus Calmette-Gu 茅 rin,BCG (Bacillus Calmette-Gu 茅 rin,BCG), and the effect of BCG on the production and apoptosis of M 蠁 NO was analyzed. The results showed that the isolated and cultured peritoneal M 蠁 had the characteristic morphological characteristics of M 蠁, strong cell viability and phagocytosis, and the expression of specific leukocyte differentiation antigen 14 (cluster of differentiation 14 CD14), CD40 and CD68 could be detected. Compared with the uninfected control group, the NO produced by M 蠁 was significantly increased (P0.01) and the apoptosis rate was significantly increased (P0.01) after 24 h of BCG infection. The results showed that the starch broth solution stimulation method could successfully obtain M 蠁 in guinea pig abdominal cavity. It was also confirmed that BCG infection could induce the increase of NO production and the increase of apoptosis rate, which suggested that it might play an important role in anti-tuberculosis immunity. The results provide cell model and data support for the study of interaction between MTB and M 蠁.
【作者單位】： 浙江理工大學生命科學學院;
【基金】：國家自然科學基金項目(No.31260287) 浙江省自然科學基金項目(No.LY17C120001) 浙江理工大學科研啟動基金項目(No.15042016-Y)
【分類號】：R392

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本文編號：2304055