【摘要】：巨噬細胞(macrophages,Mφ)在機體正常發(fā)育、體內(nèi)平衡、組織修復(fù)和對病原體的免疫反應(yīng)中起著重要作用。為了研究豚鼠(Cavia porcellus)Mφ在結(jié)核免疫中的作用及機制,本研究通過淀粉肉湯溶液預(yù)刺激的方法分離培養(yǎng)了豚鼠腹腔Mφ,并進行了細胞形態(tài)學(xué)觀察、細胞活力、吞噬功能、非特異性酯酶染色和細胞表面特異性抗原表達檢測等一系列鑒定。在此基礎(chǔ)上,利用結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染分離培養(yǎng)的Mφ,并分析BCG對MφNO的產(chǎn)生和細胞凋亡的影響。結(jié)果表明,分離培養(yǎng)的腹腔Mφ具有Mφ所特有的形態(tài)特征、較強細胞活力和吞噬能力,并可檢測到特異性的白細胞分化抗原14(cluster of differentiation 14,CD14)、CD40和CD68等的表達。與未感染的對照組相比,BCG感染24 h后Mφ產(chǎn)生的NO極顯著增加(P0.01),細胞的凋亡率也極顯著升高(P0.01)。表明淀粉肉湯溶液刺激的方法可成功獲取豚鼠腹腔Mφ,同時證實BCG感染后能誘導(dǎo)其產(chǎn)生的NO增多,并且細胞凋亡率增加,提示其可能在抗結(jié)核免疫中起重要作用。研究結(jié)果為MTB和Mφ相互作用研究提供細胞模型和數(shù)據(jù)支撐。
[Abstract]:Macrophages (macrophages,M 蠁) play an important role in normal development, balance in vivo, tissue repair and immune response to pathogens. In order to study the role and mechanism of guinea pig (Cavia porcellus) M 蠁 in tuberculosis immunity, we isolated and cultured guinea pig peritoneal M 蠁 by starch broth solution prestimulation, and observed the cell morphology, cell viability and phagocytosis. A series of non-specific esterase staining and cell surface specific antigen expression detection and a series of identification. On this basis, M 蠁 was infected by Bacillus Calmette-Gu 茅 rin,BCG (Bacillus Calmette-Gu 茅 rin,BCG), and the effect of BCG on the production and apoptosis of M 蠁 NO was analyzed. The results showed that the isolated and cultured peritoneal M 蠁 had the characteristic morphological characteristics of M 蠁, strong cell viability and phagocytosis, and the expression of specific leukocyte differentiation antigen 14 (cluster of differentiation 14 CD14), CD40 and CD68 could be detected. Compared with the uninfected control group, the NO produced by M 蠁 was significantly increased (P0.01) and the apoptosis rate was significantly increased (P0.01) after 24 h of BCG infection. The results showed that the starch broth solution stimulation method could successfully obtain M 蠁 in guinea pig abdominal cavity. It was also confirmed that BCG infection could induce the increase of NO production and the increase of apoptosis rate, which suggested that it might play an important role in anti-tuberculosis immunity. The results provide cell model and data support for the study of interaction between MTB and M 蠁.
【作者單位】： 浙江理工大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(No.31260287) 浙江省自然科學(xué)基金項目(No.LY17C120001) 浙江理工大學(xué)科研啟動基金項目(No.15042016-Y)
【分類號】：R392

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張華;曲震寰;王瑩;阮洪生;葛文中;秦學(xué)功;;小鼠腹腔巨噬細胞的分離培養(yǎng)與吞噬功能測定[J];黑龍江醫(yī)藥科學(xué);2007年05期

2 周德存;骨髓間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)和應(yīng)用[J];安徽醫(yī)學(xué);2003年04期

3 丁自強,吳中立;肺泡Ⅱ型上皮細胞的分離培養(yǎng)和磷脂酶A_2的損傷作用[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1989年05期

4 張春霞;修忠標;林建華;陳曉東;;兔骨髓間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J];福建中醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2005年06期

5 羅亞坤;程燕;;小鼠腹腔巨噬細胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J];科技致富向?qū)?2013年18期

6 楊忠,蔡文琴,何家全;大膠質(zhì)細胞混合培養(yǎng)與分離培養(yǎng)的方法評價[J];免疫學(xué)雜志;2001年05期

7 周燕瓊;郭福曉;賈強用;張艷美;鄭燕珊;李樂娜;石剛剛;;新生大鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞的分離培養(yǎng)及鑒定[J];汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2008年03期

8 劉杰，章崇杰，，何生，張平，魏大鵬，趙宗蓉，蔡美英;高效分離培養(yǎng)腫瘤浸潤淋巴細胞方法的建立[J];華西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;1996年01期

9 李雙星;樸豐源;戚媛;劉曉輝;李亞晨;劉爽;李雙月;;羅曼鶴雞骨髓間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)和鑒定[J];山東醫(yī)藥;2014年11期

10 方利君;付小兵;孫同柱;李建福;程飚;王玉新;;豬骨髓間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)及分化潛能的鑒定[J];感染.炎癥.修復(fù);2003年02期

相關(guān)會議論文 前10條

1 薛強;唐清;侯敏;唐勤;張繼芬;陳偉海;陳剛;徐曉玉;;一種簡易、穩(wěn)定的大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞分離培養(yǎng)新方法[A];'2012第五屆全國臨床中藥學(xué)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2012年

2 李爽;肖能坎;朱旭紅;;骨髓間充質(zhì)干細胞的研究進展及其在燒創(chuàng)傷中的應(yīng)用前景[A];第八屆全國燒傷外科學(xué)年會論文匯編[C];2007年

3 徐國興;謝茂松;李瓊;肖紫云;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)[A];中華醫(yī)學(xué)會第十二屆全國眼科學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2007年

4 梁雪;粟永萍;孔佩艷;陳幸華;彭賢貴;徐輝;常誠;艾國平;;人骨骨髓間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)及表型分析[A];第10屆全國實驗血液學(xué)會議論文摘要匯編[C];2005年

5 黃月琴;王松波;王麗娜;朱曉彤;高萍;束剛;江青艷;;豬骨髓間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)與成脂誘導(dǎo)分化[A];全國動物生理生化第十一次學(xué)術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2010年

6 郭亞楠;陸合;張德純;沈?qū)W成;;鈣化胎盤中納米細菌的分離培養(yǎng)與鑒定[A];重慶市預(yù)防醫(yī)學(xué)會2012年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2012年

7 巨容;杜江;王斌;封志純;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)及分化鑒定[A];全國圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)專題學(xué)術(shù)研討會論文匯編[C];2007年

8 王敏;時永全;周新民;韓英;;一種同時分離培養(yǎng)大鼠肝細胞及肝枯否細胞技術(shù)的建立[A];中華醫(yī)學(xué)會第十六次全國病毒性肝炎及肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2013年

9 張娟;劉珍清;宋柳江;栗炳南;譚孟群;;胎兒骨髓間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究[A];湖南省首屆生理—藥理科學(xué)青年論壇論文摘要匯編[C];2009年

10 林秋雄;余細勇;單志新;林曙光;李輝;;羊胸主動脈內(nèi)皮細胞的分離培養(yǎng)與鑒定[A];中國生理學(xué)會第六屆應(yīng)用生理學(xué)委員會全國學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2003年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 郭亞楠;胎盤鈣化組織中納米細菌的分離培養(yǎng)與鑒定及其相關(guān)蛋白的初步分析[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2012年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前8條

1 馬俊勛;肝臟干細胞分離培養(yǎng)及體外細胞因子調(diào)控的實驗研究[D];第一軍醫(yī)大學(xué);2004年

2 王鵬;骨髓間充質(zhì)干細胞的分離培養(yǎng)及腦脊液對骨髓間充質(zhì)干細胞的影響[D];蘇州大學(xué);2009年

3 姜鵬;嗅鞘細胞（OECs）的分離培養(yǎng)及其應(yīng)用初探[D];東北師范大學(xué);2008年

4 黃家志;兔骨髓間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)及誘導(dǎo)多向分化的實驗研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2011年

5 鐘隆飛;大鼠陰莖海綿體干細胞的分離培養(yǎng)及鑒定[D];蘇州大學(xué);2010年

6 吳盼盼;幼豬肺泡上皮和血管內(nèi)皮祖細胞分離培養(yǎng)技術(shù)探討[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

7 蘇娟;小鼠肝干細胞的分離培養(yǎng)及其生物學(xué)特性研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2001年

8 劉夏陽;彎曲菌的分離培養(yǎng)及分型分析[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2014年

本文編號：2304055