發(fā)布時間：2018-10-31 12:33

【摘要】：目的 研究J774細胞凋亡與PA上清液感染的關系；應用western blot法研究Fas和FAP-1蛋白在PA上清液誘導J774細胞凋亡過程中的作用。 方法 1、用15%濃度的PA上清液感染J774細胞3h，6h，9h，，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 2、以Annexin-V-FITC/PI雙染流式細胞儀檢測及Hoechest33258熒光染色等細胞形態(tài)學觀察指標，研究PA上清液感染對J774細胞凋亡的誘導作用。 3、用western blot法對FAP-1和Fas蛋白定量檢測。 結果 Hoechest33258熒光顯微鏡下觀察：15%濃度的PA上清液感染J774細胞9h可見許多細胞有典型的凋亡形態(tài)學改變，并可見凋亡小體。經Hoechest33258熒光染色檢查和Annexin-V-FITC/PI雙染流式細胞儀檢測，隨著PA上清液感染J774細胞時間的延長，J774細胞凋亡率均增高。各實驗組J774細胞凋亡率均數(shù)與對照組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P0.01）；各實驗組間比較差異均有統(tǒng)計學意義（P0.01）；兩種檢測方法比較，相同時間感染條件下的J774細胞凋亡率均數(shù)差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）。western blot結果顯示，在PA上清液感染J774細胞3h后，F(xiàn)as蛋白表達與對照組相比明顯增強，且隨著時間的延長表達逐漸增強，直到PA上清液感染J774細胞9h；而FAP-1蛋白表達隨著時間的延長表達逐漸減弱。 結論 1、J774巨噬細胞凋亡與銅綠假單胞菌上清液感染有關。 2、銅綠假單胞菌上清液導致的J774細胞凋亡具有時間依賴性。 3、該實驗凋亡的機制涉及Fas和FAP-1蛋白的表達。
[Abstract]:Objective to study the relationship between the apoptosis of J774 cells and the infection of PA supernatant, and to study the role of Fas and FAP-1 protein in the process of PA supernatant induced J774 cell apoptosis. Methods 1. J774 cells were infected with 15% PA supernatant for 6 h or 9 h and cultured in 37 鈩

本文編號：2302200