【摘要】：目的評價不同儲存條件對結(jié)核亞單位疫苗參考品(簡稱參考品)免疫原性的影響。方法按以下抗原與佐劑比例配制1人份疫苗參考品:[10μg Ag85b蛋白+10μg EC蛋白+50μg Ploy IC+0.2 mg Al(OH)3]/0.2 ml。將疫苗參考品于-70及4℃分別保存1、6、9、12個月,并于每個時間點免疫BALB/c小鼠,實驗分4組:PBS組、冷藏組(4℃保存參考品)、凍存組(-70℃保存參考品)及現(xiàn)配組,均經(jīng)小鼠后肢內(nèi)側(cè)肌肉注射,0.2 ml/只,共免疫3次,每次間隔10 d,末次注射10 d后,收集小鼠脾淋巴細胞,并經(jīng)眼球采血,分離血清。ELISPOT法檢測抗原特異性的IL-2、IFNγ水平,CCK-8法檢測細胞增殖水平,間接ELISA法檢測血清Ig G抗體效價。結(jié)果經(jīng)Ag85b和EC刺激,現(xiàn)配組各月間的斑點形成細胞數(shù)(spot forming cells,SFCs)及脾細胞增殖指數(shù)(stimulating indox,SI)差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),且均顯著高于PBS組(P0.05),表明免疫學檢驗?zāi)Ｐ统闪⑶曳�(wěn)定,各試驗組與現(xiàn)配組結(jié)果具有可比性。經(jīng)4℃冷藏12個月,參考品的Ag85b及EC特異性IL-2、IFNγ相對水平及脾淋巴細胞相對增殖水平均顯著低于冷藏1個月的參考品(P0.01),經(jīng)-70℃凍存12個月,參考品的Ag85b、EC特異性IL-2、IFNγ相對水平及脾淋巴細胞相對增殖水平與凍存1個月的參考品差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。與現(xiàn)配組比較,冷藏組及凍存組Ag85b和EC特異性抗體水平相對平穩(wěn),各月間差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05),且兩組間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論 -70℃凍存12個月內(nèi)的參考品的細胞及體液免疫水平均未明顯降低,可作為該參考品的長期保存條件。不同保存條件對疫苗免疫保護力的影響需進一步考察。
[Abstract]:Objective to evaluate the effect of different storage conditions on immunogenicity of tuberculosis subunit vaccine reference. Methods 1 human vaccine reference material was prepared according to the ratio of antigen and adjuvant: [10 渭 g Ag85b protein 10 渭 g EC protein 50 渭 g Ploy IC 0.2 mg Al (OH) 3] / 0.2 ml. The vaccine reference materials were stored at -70 鈩，

本文編號：2288835