【摘要】：目的:腎缺血再灌注損傷(renal ischemia/reperfusion injury,RI /RI)是臨床上常見的病理生理現(xiàn)象,在缺血性急性腎損傷的病理過程中起重要作用,是多因素參與的復(fù)雜病理過程。缺血預(yù)處理( ischemic preconditioning,IPC )指組織器官遭受反復(fù)短暫缺血后,可在后續(xù)的長期缺血中得到保護,使缺血損傷減輕。研究發(fā)現(xiàn),IPC對心、肝和小腸等許多器官均具有保護作用,但其作用機制尚未完全闡明。短暫反復(fù)IPC是否對RI /RI具有保護作用,目前少有報道。因此,探討短暫反復(fù)IPC對RI /RI的保護作用及其機制,對RI/RI的防治具有十分重要的意義。本實驗旨在應(yīng)用生理,生化,放射免疫及免疫組化等方法觀察短暫反復(fù)IPC對RI/RI的作用,并探討其可能的作用機制。 方法:成年健康雄性SD大鼠40只,體重150-180g,在18-22°度實驗室安靜飼養(yǎng)兩日后動物隨機分為5組,即: 1假手術(shù)組(Sham) 2缺血再灌注組(I/R) 3五分鐘缺血預(yù)處理一次+缺血再灌注(1+I/R) 4五分鐘缺血預(yù)處理二次+缺血再灌注(2+I/R) 5五分鐘缺血預(yù)處理三次+缺血再灌注(3+I/R)各組動物經(jīng)1%戊巴妥鈉腹腔麻醉,開腹,暴露雙側(cè)腎動、靜脈。假手術(shù)組,只開腹不夾閉雙側(cè)腎動、靜脈;I/R組,夾閉雙側(cè)腎動、靜脈45 min松夾再灌;1+ I/R、2+ I/R和3+ I/R各組則分別夾閉雙側(cè)腎動、靜脈五分鐘再灌五分鐘一次,兩次和三次(IPC)后再行夾閉雙側(cè)腎動、靜脈45 min,松夾再灌后,逐層縫合腹膜,腹壁肌肉和皮膚。24小時后取血及雙側(cè)腎臟測定血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、腎組織丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(iNOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、內(nèi)皮素(ET)以及腎組織HO-1的表達。 結(jié)果: 1大鼠RI/RI后,光鏡所見:Sham組腎組織無明顯異常;I/R組腎組織損傷加重,表現(xiàn)為腎小管上皮細(xì)胞渾濁腫脹、壞死、管腔擴張,間質(zhì)變寬、水腫、有大量炎細(xì)胞浸潤。1+I/R組、2+I/R和3+I/R各組腎小管損傷程度均較I/R組明顯減輕,間質(zhì)炎細(xì)胞明顯減少,水腫明顯減輕。其中以3+I/R組損傷程度減輕的最為顯著。 2大鼠RI/RI后,I/R組腎功能明顯下降,BUN和Scr均明顯高于Sham(P0.01);與I/R組相比,1+I/R、2+I/R和3+I/R各組BUN和Scr均明顯降低(P0.05～0.01),其中以3+I/R組降低程度最為顯著。 3大鼠RI/RI后, I/R組MDA含量較Sham組顯著升高;SOD活力則較Sham組明顯降低(P0.01);與I/R組相比,1+I/R、2+I/R和3+I/R各組SOD活力均明顯增加,而MDA含量則明顯降低(P0.05～0.01),其中以3+I/R組MDA含量降低的最為顯著。 4大鼠RI/RI后,I/R組NO和iNOS含量均明顯高于Sham組(P0.01);與I/R組相比,1+I/R、2+I/R和3+I/R各組NO含量均明顯增加(P0.05～0.01),而iNOS含量則明顯降低(P0.05～0.01)。 5大鼠RI/RI后,I/R組ET含量明顯高于Sham組(P0.01);與I/R組相比,1+I/R、2+I/R和3+I/R各組ET含量則顯著減低(P0.05～0.01),其中以3+I/R組降低的最為顯著。 6大鼠RI/RI后,腎組織HO-1免疫組化顯示:Sham組腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)HO-1表達不明顯,I/R組腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)HO-1表達較Sham組明顯增加,與I/R組相比,1+I/R、2+I/R和3+I/R各組腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)HO-1表達均明顯增加,其中以3+I/R組HO-1表達增加的最為明顯。 結(jié)論: 1 RI/RI后,腎功能和腎小管上皮細(xì)胞明顯受損。RI/RI大鼠BUN、Scr、MDA、iNOS含量均較Sham組明顯增加,SOD活力則較Sham組明顯降低,腎組織ET含量明顯增加,腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)HO-1免疫反應(yīng)陽性顆粒表達增加。 2短暫反復(fù)IPC可顯著減輕RI/RI大鼠腎組織損傷,降低BUN、Scr和MDA含量,增加腎組織SOD活力。表明短暫反復(fù)IPC可以減輕RI/RI大鼠腎組織損傷,改善腎功能。3短暫反復(fù)IPC能明顯降低腎組織iNOS含量,增加NO含量,降低腎組織ET含量,增加腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)HO-1免疫反應(yīng)陽性顆粒的表達。表明短暫反復(fù)IPC減輕RI/RI大鼠腎組織損傷的機制可能與增加NO含量、降低ET含量以及上調(diào)腎臟HO-1的表達有關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R363

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本文編號：2256143