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大腸桿菌可溶性表達(dá)人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原的制備及應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2018-09-13 16:08
【摘要】:旨在建立基于大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的高效可溶性表達(dá)人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原(SCCAg)方法,獲得具有較好活性的重組SCCAg抗原并應(yīng)用于建立抗原檢測(cè)方法;趐GEX-6P-1載體和大腸桿菌E.coliER2566菌株開展重組SCCAg抗原可溶性表達(dá)純化方法研究,評(píng)價(jià)純化抗原活性,篩選特異性單克隆抗體,初步建立并評(píng)價(jià)SCCAg抗原檢測(cè)方法。結(jié)果顯示,pGEX-6P-1載體和E.coliER2566菌株可用于建立較高效的可溶性表達(dá)和純化SCCAg抗原的方法,獲得了具有較高純度和活性的重組SCCAg抗原,篩選獲得特異性單克隆抗體并初步建立了SCCAg管式化學(xué)發(fā)光檢測(cè)方法。建立了有效的基于大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的可溶性表達(dá)和純化SCCAg的方法。
[Abstract]:The aim of this study was to establish an efficient and soluble (SCCAg) method for expression of human squamous cell carcinoma antigen (SCCAg) based on Escherichia coli expression system. The recombinant SCCAg antigen with good activity was obtained and applied to the detection of human squamous cell carcinoma antigen. The methods of soluble expression and purification of recombinant SCCAg antigen were studied based on pGEX-6P-1 vector and Escherichia coli E.coliER2566 strain, the purified antigen activity was evaluated, the specific monoclonal antibody was screened, and the detection method of SCCAg antigen was preliminarily established and evaluated. The results showed that pGEX-6P-1 vector and E.coliER2566 strain could be used to establish a more efficient method for the expression and purification of SCCAg antigen. The recombinant SCCAg antigen with high purity and activity was obtained. The specific monoclonal antibody was screened and the SCCAg tube chemiluminescence assay was established. An effective method of soluble expression and purification of SCCAg based on Escherichia coli expression system was established.
【作者單位】: 廈門大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院分子疫苗學(xué)與分子診斷學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室國家傳染病診斷試劑與疫苗工程技術(shù)研究中心;廈門萬泰凱瑞生物技術(shù)有限公司;
【基金】:國家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(“863”計(jì)劃)(2011AA02A101)
【分類號(hào)】:R392

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本文編號(hào):2241674

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