【摘要】：目的:利用穩(wěn)定過表達(dá)Ankyrin repeat domain 49(ANKRD49)的GC-1(小鼠精原細(xì)胞)細(xì)胞模型,探討ANKRD49過表達(dá)對GC-1細(xì)胞凋亡的影響。方法:40J/m~2紫外線(UV)刺激GC-1細(xì)胞2 min誘導(dǎo)凋亡,分別利用流式細(xì)胞術(shù)、Hoechst33258染色和免疫印跡技術(shù)檢測過表達(dá)ANKRD49對GC-1細(xì)胞線粒體膜電位、核濃縮情況和凋亡相關(guān)蛋白多聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、Cleaved-Caspase-3、Bcl-xL和Bax的表達(dá)變化,以反映ANKRD49對GC-1細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果:流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果表明穩(wěn)定過表達(dá)ANKRD49的GC-1細(xì)胞線粒體膜電位下降率和細(xì)胞凋亡率均明顯低于空載體組和裸細(xì)胞組(P0.05)。Hoechst33258染色結(jié)果顯示ANKRD49穩(wěn)定過表達(dá)組細(xì)胞的凋亡百分比明顯低于其它組(P0.05)。Western blotting檢測結(jié)果顯示ANKRD49穩(wěn)定過表達(dá)組Cleaved-PARP、Cleaved-Caspase-3蛋白的表達(dá)水平明顯低于對照組,而Bcl-xL蛋白表達(dá)水平明顯高于對照組(P0.05)。結(jié)論:ANKRD49過表達(dá)可抑制UV誘導(dǎo)的GC-1細(xì)胞凋亡,其作用可能是直接或間接通過促進(jìn)Bcl-xL的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of ANKRD49 overexpression on the apoptosis of Ankyrin repeat domain 49 (ANKRD49) cells in GC-1 (mouse spermatogonial) cell model. Methods the apoptosis of GC-1 cell line 2 min was induced by UV (UV). The mitochondrial membrane potential of GC-1 cells was detected by flow cytometry with Hoechst33258 staining and Western blotting. In order to reflect the effect of ANKRD49 on the apoptosis of GC-1 cells, the nuclear concentration and the expression of Cleaved-Caspase-3 ADP ribose polymerase (poly ADP-ribose polymerase,PARP) were changed in order to reflect the effect of ANKRD49 on the apoptosis of GC-1 cells. Results: the results of flow cytometry showed that the decrease rate of mitochondrial membrane potential and the apoptosis rate of GC-1 cells with stable overexpression of ANKRD49 were significantly lower than those of empty vector group and bare cell group (P0.05). Hoechst33258 staining showed that the cells in ANKRD49 overexpression group were significantly lower than those in control group (P0.05). The percentage of apoptosis was significantly lower than that in other groups (P0.05). Western blotting analysis showed that the expression of Cleaved-PARP,Cleaved-Caspase-3 protein in the stable overexpression group of ANKRD49 was significantly lower than that in the control group. The expression of Bcl-xL protein was significantly higher than that of the control group (P0.05). Conclusion the overexpression of UV ANKRD49 can inhibit the apoptosis of GC-1 cells induced by UV, which may be achieved directly or indirectly by promoting the expression of Bcl-xL.
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;山西醫(yī)科大學(xué)寄生蟲學(xué)教研室;
【分類號】：R329.2

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本文編號：2235467