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肺炎鏈球菌誘導SPLUNC1表達及白藜蘆醇對SPLUNC1表達的影響

發(fā)布時間:2018-09-10 12:35
【摘要】:目的 探討肺炎鏈球菌(SP)感染時短腭、肺及鼻咽上皮克隆1(SPLUNC1)的宿主防御作用,及白藜蘆醇(Res)對SPLUNC1表達的影響,為SP感染性疾病的治療提供新的思路。方法 根據(jù)感染復數(shù)(MOI)不同將SP感染BEAS-2B細胞分為對照組、MOI20 SP組和MOI50 SP組;根據(jù)Res藥物濃度不同將Res預處理MOI20 SP感染BEAS-2B細胞分為12.5Res+SP組、25Res+SP組、50Res+SP組(Res終濃度分別為12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L)。通過CCK-8法檢測細胞活性,并選出SP、Res最佳作用濃度及時間。正式實驗分為對照組、Res組、SP組和Res+SP組,采用實時定量PCR法和ELISA法檢測各組SPLUNC1 m RNA及蛋白表達。結果 隨SP感染時間延長,細胞活性呈降低趨勢;與對照組和MOI20 SP組相比,MOI50 SP組細胞活性有下降趨勢;與MOI20 SP組相比,25Res+SP組細胞活性增強(P0.05),50Res+SP組細胞活性降低(P0.05)。以MOI20 SP菌懸液和25μmol/L Res進行正式實驗。SP組和Res+SP組隨感染時間延長,BEAS-2B細胞SPLUNC1m RNA水平表達先增高,后降低(P0.05);與SP組相比,各時間點Res+SP組SPLUNC1 m RNA及蛋白表達水平均增高(P0.05);與對照組相比,僅Res組SPLUNC1 m RNA及蛋白表達水平隨時間延長未見明顯改變(P0.05)。結論 SP感染可以誘導SPLUNC1表達,發(fā)揮宿主防御作用,Res可以在感染發(fā)生時上調SPLUNC1的表達,以濃度及時間依賴的方式加強細胞保護。
[Abstract]:Objective to investigate the host defense effect of short palate, lung and nasopharyngeal epithelial clone 1 (SPLUNC1) in Streptococcus pneumoniae (SP) infection and the effect of resveratrol (Res) on the expression of SPLUNC1 in order to provide a new idea for the treatment of SP infectious diseases. Methods BEAS-2B cells infected with SP were divided into control group and MOI50 SP group according to the complex number of (MOI) infection, and Res pretreated BEAS-2B cells with MOI20 SP infection were divided into 12.5Res SP group (Res 25 res SP group) (Res end concentration was 12.5 渭 mol/L,25 渭 mol/L,50 渭 mol/L) according to the different concentration of Res, and Res pretreated MOI20 SP infected BEAS-2B cells was divided into 12.5Res SP group with 25 res SP group (Res end concentration was 12.5 渭 mol/L,25 渭 mol/L,50 渭 mol/L). The cell activity was detected by CCK-8, and the optimum concentration and time of SP,Res were selected. The rats were divided into two groups: control group, res group, SP group and Res SP group. The expression of SPLUNC1 m RNA and protein in each group were detected by real-time quantitative PCR and ELISA. Results with the prolongation of SP infection time, cell activity decreased; compared with control group and MOI20 SP group, cell activity decreased in moi 50 SP group, and increased in MOI20 SP group (P0.05) compared with MOI20 SP group (P0.05). The expression of SPLUNC1m RNA in MOI20 SP suspension and 25 渭 mol/L Res group was increased first and then decreased with the prolongation of infection time (P0.05), compared with SP group, the expression of SPLUNC1m RNA in Res SP group and SP group increased at first and then decreased (P0.05), compared with SP group, the expression of SPLUNC1m RNA in Res SP group increased at first and then decreased (P0.05). The expression of SPLUNC1 m RNA and protein in Res SP group was higher than that in control group (P0.05), but the expression level of SPLUNC1 m RNA and protein in Res group did not change with time (P0.05). Conclusion SP infection can induce the expression of SPLUNC1. Res can up-regulate the expression of SPLUNC1 at the time of infection and enhance the cell protection in a concentration-and time-dependent manner.
【作者單位】: 溫州醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院育英兒童醫(yī)院兒童呼吸科;

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