【摘要】：【目的】鑒定及克隆新型隱球酵母(Cryptococcus neoformans)中PolⅢ型的U6啟動子(Cn U6啟動子),并驗證CnU6啟動子能否有效轉錄shRNA及CRISPR/Cas9系統(tǒng)中gRNA�！痉椒ā拷Y合Gen Bank數據庫已公布的新型隱球酵母基因組信息和本實驗室RNA-seq文庫數據,利用生物信息學技術分析得到新型隱球酵母中具有高轉錄水平的U6RNA序列。使用重疊PCR和Easy Geno方法將預測的CnU6啟動子分別克隆到sh RNA及gRNA的上游區(qū)域,通過觀察shRNA對靶基因的RNAi效果及gRNA引導Cas9核酸酶對靶位點的切割結果,確定CnU6啟動子能否轉錄短RNA。【結果】CnU6啟動子能夠轉錄形成shRNA對靶基因進行沉默,并且能轉錄形成g RNA引導Cas9核酸酶對靶點進行切割�！窘Y論】新型隱球酵母的CnU6啟動子被成功鑒定及克隆,它能有效驅動shRNA和gRNA的轉錄。
[Abstract]:[objective] to identify and clone the U6 promoter of Pol type 鈪，

本文編號：2195508